圈 华,韩志辉
(青海大学农牧学院动物医学系,青海西宁 8100016)
青海省西宁地区鸡毒支原体感染的血清学检测*
圈 华,韩志辉
(青海大学农牧学院动物医学系,青海西宁 8100016)
应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对西宁部分县鸡血清中的鸡毒支原体抗体(MG-Ab)进行了检测,共检测血清286份,检出阳性样品146份,平均阳性率为51.08%。
鸡毒支原体;酶联免疫吸附试验;检测
鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染又称鸡败血支原体感染,是鸡毒支原体引起的鸡传染病。1898年,Nocard和Roux首次报道成功培养了支原体,20世纪30年代,Nelson可能首次在鸡中发现了支原体。到目前为止,已被确认的致病性禽支原体有鸡毒支原体(M.gallisepticum,MG)和滑液支原体(M.synoviae,MS)[1]。其中,鸡毒支原体感染对我国家禽养殖业造成的危害最大。
MG感染可引起鸡慢性呼吸道病,临床上主要表现为咳嗽、流鼻涕,严重时张口呼吸。感染MG的鸡抵抗力下降,易并发或继发大肠埃希菌病、新城疫、传染性支气管炎和传染性喉气管炎等疾病。据统计,MG感染后,雏鸡的弱雏率增加10%左右,蛋鸡的产蛋率下降 10%~20%,肉鸡的体重减少38%。MG感染严重影响集约化养鸡业发展[2]。
检测和诊断鸡毒支原体感染的方法有血清平板凝集试验、HI、ELISA、PCR和病原分离培养等,实验室研究和临床诊断[3]中以血清平板凝集试验和ELISA方法较为常用。为了了解西宁地区鸡毒支原体的感染及流行情况,用ELISA方法对来自湟中、湟源、大通等县的286份鸡血清进行了鸡毒支原体抗体检测,结果表明MG的平均抗体阳性率为51.08%,最高为70.0%,最低为4.76%。
1.1.1 被检血清 待检鸡无菌翅下静脉采血,分离血清,置4℃冰箱保存。
1.1.2 试剂 鸡败血支原体(MG)抗体检测试剂盒,含鸡毒支原体抗原(MG)包被板、MG阳性对照血清、MG阴性对照血清、酶标抗体、样品稀释液TMP、底物、终止液为北京爱德士元亨生物科技有限公司产品(批号为:06729-CB476)。
按试剂盒操作说明书进行,检测前将待检血清用样品稀释液作500倍稀释,低温保存。设立阳性和阴性对照,在650 nm波长测定和记录样本吸光值。样品的S/P值小于或等于0.5,判为阴性。样品的S/P值大于0.5,判为阳性。
大通县检测样本124份,阳性67份,阳性率为50.03%;湟中县21份,阳性1 份 ,阳性率4.76%;湟源县21份,阳性3份,阳性率14.29%;西宁市120份,阳性84份,阳性率70.00%;共检血清样品286份,其中阳性146份,平均阳性率为50.97%。
鸡毒支原体(MG)可引起感染鸡的慢性呼吸道病,其特征是咳嗽、流鼻涕、呼吸道口罗音和张口呼吸。本病主要通过飞沫和尘埃经呼吸道传播,也可经种蛋垂直传播;本病不但可以在同一鸡场的不同鸡舍间传播,也可以在不同鸡场之间传播;一般情况下,该病的死亡率不高,若混合其他病原感染则病情加重,从而导致大批死亡。
感染MG幼鸡可致生长发育不良;成年鸡多为隐性感染,产蛋下降或产软壳蛋的比例增大,且肉鸡酮体品质下降;种蛋孵化率明显降低,孵出的弱雏率增加,可造成严重的经济损失,成为当前危害养鸡业的重要传染病之一[4]。
本次检测结果表明,集中饲养的鸡感染率较高,如西宁市鸡场、大通县鸡场分别为 70.00%和50.03%;散养鸡感染率较底,如湟中县、湟源县分别4.76%和14.29%。可能与以下因素有关:一是我省多数鸡场自外地引进鸡苗,这些新引进的鸡苗本身已感染;二是对鸡群进行鸡新城疫弱毒疫苗免疫时,采用气雾和滴鼻法,可诱发本病的发生;三是引进种蛋时缺乏对对方鸡场疫病的了解和种蛋的检疫,引进带毒种蛋而导致垂直感染;四是有些养鸡场鸡只饲养密度过大、卫生条件较差、通风不良、加之我省早晚温差大,气温变化异常,导致鸡只抵抗力下降,容易诱发呼吸道疾病。
根据检测结果,建议采取以下措施:
首先鸡场要有合理的布局,良好的隔离、防疫和消毒制度,以及良好的饲养环境;其次加强净化检疫,淘汰阳性鸡,建立无病原鸡群。
对种蛋进行处理是控制鸡败血支原体感染垂直传播的有效措施。其方法主要有以下3种:①种蛋注射法:将抗生素注入正在孵化的种蛋的气室。研究表明,联合使用林可霉素和壮观霉素,效果较好。②种蛋浸泡法:将蛋加热至37.8℃,然后放入抗生素溶液(1.7℃~4.4℃,400 mg/L~1 000 mg/L的泰乐菌素或红霉素)中20 min~30 min。③种蛋加热法:将处于室温的种蛋置于有加压空气的孵化器内加温,使温度升高至46.1℃,保持12 h,然后降至孵化温度开始孵化。这种方法降低孵化率3%~12%,但这一方法可切断垂直传播途径[5]。
[1]邵国青.鸡支原体的防控现状及研究新进展[J].中国家禽,2009,31(11):5-9.
[2]冯元璋.鸡毒支原体感染和危害[J].中国家禽,2008,30(12):45-47.
[3]Brown M B,Bradbury J,Davis J K.Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology[M].Academic Press Inc.1996,93-104,283-292.
[4]吴清民.家畜传染病学[M].北京:中国农业出版社,2002:282-285.
[5]朱道中,吾红专.鸡败血支原体的预防和控制[J].中国家禽,2002,22(4):45.
Detection ofMycoplasma gallisepticumInfection in Avian in Xining of Qinghai Province
JUAN Hua,HAN Zhi-hui
(College of Agriculture and Animal Sciences,Qinghai University,Xining,Qinghai,810016,China)
The seral antibodies ofMycoplasmagallisepticum were detected from 286 samples collected from the area of Huangzhong,Huangyuan,Datong and Xining by ELISA.The results showed the positive samples were 146,and the average positive rate was 51.08%(146/286).
Mycoplasma gallisepticum;ELISA;detection
S852.62
B
1007-5038(2010)09-0126-02
2010-03-27
圈 华(1964-),女(藏族),青海西宁人,副教授,主要从事动物疾病研究与防治工作。