赵晓霞 沈莉 李建民 张爱红
国外输血事业发达国家为节约和充分利用血液资源,临床治疗用血小板多以手工汇集制备为主。手工制备血小板又以白膜法机器分离为主,本文对使用Compomaster G4自动血液分离仪,白膜法制备的42例单人份浓缩血小板制品质量进行调查,报告如下。
1.1 仪器 Beckman J-6B型离心机(美国制造)、Beckman counter血细胞计数仪(美国制造)、400 ml四联采血袋(广州华南)、Compomaster G4自动血液分离仪(德国费森尤斯制造)。
1.2 方法
1.2.1 血液的初次离心和分离:将四联袋采集的新鲜(1~3 h内)400 ml全血,以2 515 ×G,14 min,22℃为离心条件,置于离心机中进行重离心;离心后的血袋置于Compomaster G4自动血液分离仪上进行自动分离血浆和白膜;分离毕用止血钳将红细胞、血浆及白膜袋上的导管夹住并从仪器上取下联袋;对联袋进行热合封口,余下含白膜和空转移袋的二联袋,经静置1~2 h后进行二次离心。
1.2.2 白膜的二次离心和分离:将静置后含白膜和空转移袋的二联袋,以280×G,10 min,22℃为离心条件,置于离心机中进行轻离心;离心后的二联袋置于Compomaster G4自动血液分离仪上进行自动分离;分离毕用止血钳将导管夹住并从仪器上取下二联袋;热合下含血小板的袋子即为制备的浓缩血小板。
1.2.3 制备后血小板制品的检测:按Beckman counter血细胞计数仪说明书提供的方法和配套试剂对血小板制品进行检测。
2.1 400 ml全血手工制备浓缩血小板的质量标准[1]为:血小板计数(PLT)≥4.0×1010;白细胞(WBC)混入量≤5.0×108;红细胞污染量(RBC)≤2.0×109。
2.2 42 例单人份白膜法机器制备及12例单人份白膜法手工制备(除分离方法的差异外,余均相同)的浓缩血小板制品质量检测结果见表1。
表1 浓缩血小板制品质量检测情况±s
表1 浓缩血小板制品质量检测情况±s
注:#仅作为参比
方法 血小板计数(1010)白细胞混入量(108)红细胞污染量(109)红细胞损失量(g)4.35 ±0.21 0.24 ±0.05 1.05 ±0.03 35 ±2手工分离+白膜法#(n=12) 4.06±0.23 0.43±0.03 1.09 ±0.02 46±3 u值机器分离+白膜法(n=42)4.603 16.38 5.405 11.91 P值 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01
Compomaster G4自动血液分离仪的优点是:无论是分离血浆、白膜或血小板等血液成分,分离过程可根据不同客户的要求,针对不同的离心条件、不同的采血袋、不同的工艺要求等,依客户自行编制的不同“程序”(程序编制简单易学,且程序存贮空间大,可满足不同层次的需要),“程序”主要是让机器实现客户要求的一组命令,该命令可对电磁阀的开、关、封口,上、下挤压板挤压距离,血液成分流速控制,中置隔板的伸出与缩回,红外线探测头探测位置等进行自动控制,靠“程序”自动控制以提高血液成分的分离精度。该仪器中置隔板的设计,在分离白膜时有最大限度收获白膜和减少红细胞损失的双重作用。此外,在软件方面为客户提供了功能强大的平台,可满足诸如扫码、存贮、打印等需求。
本实验用Compomaster G4自动血液分离仪白膜法制备血小板,仅就血小板制品质量而言,无论是机器分离或手工分离白膜法制备的浓缩血小板制品质量均能符合国家标准。但在红细胞损失量和白细胞混入量上二者有差异,前者好于后者。究其原因,一是手工分离的过程中受操作者手法及熟练程度的影响;二是机器分离过程不受人为因素影响只是执行程序而已,且中置隔板和红外线探测头联合发挥作用可提高分离精度,同时分离程序编辑和调整也起一定作用。在保证血小板质量的前提下,且又尽可能减少浓缩红细胞的损失上,机器分离白膜较手工分离白膜可减少红细胞损失达10 g以上。
综上所述,由于实验本身数量及范围有限,不代表该仪器所能实现的最终结果。
1 李捷,沈莉,李建民,等.集量浓缩血小板的制备.河北医药,2009,31:614.