田嵩
(长春市宽城区医院 吉林长春 130051)
肾素—血管紧张素—醛固酮系统(RAAS)是由肾素、血管紧张素原、血管紧张素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、醛固酮和血管紧张素酶、血管紧张素Ⅰ转换酶等一系列激素及相应的酶组成,通过调节人体血压、水和电解质平衡,来维持机体内环境恒定。现综述如下。
2008年12月至2009年12月我院收治的102例高血压患者(收缩压≥140mm Hg,舒张压≥90mm Hg),男性73例,女性29例,年龄42~68岁,平均55岁,病程2~10年,其中轻型18例,中型58例,重型26例。
SN-695B型智能γ放射免疫计数器测量仪,上海核所日环光电仪器公司生产。仪器性能指标及功能:(1)探测效率≥76%,本底≤60m in-1。(2)8h稳定性:连续工作8h,探测效率附加误差≤2%,本底计数率在要求范围内。(3)活度响应的非线性不大于8%。(4)样品容量:一次容量为250管,测量中可随时加入样品。(5)四档核素选择:20~900Kev能量范围内的多种核素均可测量。
试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中血管紧张素Ⅱ水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血管紧张素Ⅱ抗原、生物素化的抗人血管紧张素Ⅱ抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管紧张素Ⅱ呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度[1]。
血浆肾素活性、血管紧张素Ⅱ、醛固酮,放射免疫试剂盒由北京华英生物技术研究所有限公司提供,批内变异系数CV<7%。最后结果在自动γ放射免疫计数器上直接测出样品浓度。样品均配副管测定。
1.5.1 醛固酮测定 血浆醛固酮浓度及尿醛固酮排出量受体位及钠摄入量的影响,立位及低钠时升高。原醛症中血浆、尿醛固酮皆增高。正常成人参考值:血浆醛固酮卧位时50~250pmol/L,立位时80~970pmol/L(血浆醛固酮pmol/L换算成ng/dl时除以27.7);尿醛固酮于钠摄入量正常时6.4~86nmol/d,低钠摄入时47~122nmol/d,高钠摄入时0~13.9nmol/d。原醛症伴严重低血钾者,醛固酮分泌受抑制,血、尿醛固酮增高可不太严重,而在补钾后,醛固酮增多更为明显。
1.5.2 肾素、血管紧张素Ⅱ测定 患者血浆肾素、血管紧张素Ⅱ基础值降低,有时在可测范围之下。正常参考值分别为(0.55±0.09)pg/(m L·h),(26.0±1.9)pg/m L。经肌内注射呋塞米(0.7m g/kg体重)并在取立位2h后,正常人血浆肾素、血管紧张素Ⅱ较基础值增加数倍,兴奋参考值分别为(3.48±0.52)pg/(m L·h)及(45.0±6.2)pg/m L。原醛症患者兴奋值较基础值只有轻微增加或无反应。醛固酮瘤患者肾素、血管紧张素受抑制程度较特发性原醛症更显著。醛固酮高而肾素、血管紧张素Ⅱ低为原醛症的特点,血浆醛固酮(ng/dL)/血浆肾素活性[ng/(m l·h)]比值大于30提示原醛症可能性,大于50具有诊断意义。
经过高血压三项的实验室检查,102例高血压患者血浆中有93例“肾素活性、血管紧张素Ⅱ和醛固酮”水平显著高于健康人的正常指标,超标率为91.18%。
肾素是分子量为40000的一种羧基蛋白水解酶,主要由肾脏近小球细胞产生、贮存、分泌。血管紧张素原主要来源于肝脏,循环中的血管紧张素原在肾素作用下,生成血管紧张素Ⅰ;血管紧张素Ⅰ在肺循环中经过血管紧张素转换酶的作用生成血管紧张素Ⅱ(AngⅡ);血管紧张素Ⅱ经氨基肽酶A作用生成血管紧张素Ⅲ。血管紧张素Ⅱ具有强烈的缩血管作用,同时与血管紧张素Ⅲ一起作用于肾上腺皮质球状带刺激醛固酮的合成。醛固酮(ALD)为类固醇激素,分子量360.4,它是一个非常强的电解质排泄的调节因子,作用是增加钠离子的吸收和钾离子的排出,临床上与很多疾病有关,如肾性高血压、醛固酮增多症等。特醛症患者在上午8~12时取立位时血浆醛固酮上升明显,并超过正常人,主要由于患者站立后血浆肾素有轻度升高,加上此型对血管紧张素的敏感性增强所致;醛固酮瘤患者在此条件下,血浆醛固酮不上升,反而下降,这是因为患者肾素-血管紧张素系统受抑制更重,立位后也不能升高,而血浆皮质激素(ACTH)浓度下降的影响更为明显。
总之,高血压三项的实验室检查是反映人类健康的三项重要指标,它的实验室检查具有重要价值,因此实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
[1]陈强文.原发性醛固酮增多症的诊断和治疗进展[J].广西医学,2009,38(10):1542.