张 磊,薛金果,史晓海,胡均雄
(徐州市家畜良种站,江苏 221151)
种公牛精液品质受很多因素的影响,诸如气温、营养、维生素、微量元素和种公牛自身生殖机能。气温、营养对种公牛精液品质影响比较明显且具有普遍性。在微量元素方面,除受饲料、牧草、饮水元素含量影响外,还可因不同牛的吸收、代谢状况不同,体内微量元素的含量有所差异,甚至差距颇大。为了探讨种公牛精液品质下降的原因及其与微量元素的关系,对徐州地区种公牛精液质量和微量元素营养状况进行了调查,重点测定了种公牛基础日粮及血液、被毛、精液中Zn、Cu 、Fe、Mn 、Cr五种微量元素含量 。
1.1 试验动物 选择17头成年西门塔尔种公牛(4~6岁)作为试验牛,其中11头为精液品质正常牛,6头为精液品质异常牛。精液品质正常指鲜精、冻精质量符合国家标准(GB4143—84)。精液品质异常指鲜精或冻精中有一项或多项指标超标(GB4143—84)。本试验在动物的选择上排除了青年牛及老年牛,从而避免了年龄因素对精液品质的影响。参试牛分槽饲养,每日2次定量饲喂,自由饮水。
1.2 仪器 MK-III型光纤压力自控密闭微波消解器(上海新科微波溶样测试技术研究所);WFX-120原子吸收分光光度计及WF-4C型石墨炉(北京瑞利分析仪器公司)。
1.3 试剂 硼氢化钾(KBOH4)、氢氧化钠(NaOH)、盐酸(HCl)、硝酸(HNO3)、过氧化氢(H2O2)均为优级纯;水为超纯水。试验所用玻璃器皿均用盐酸(V/V,1+1)溶液浸泡过夜并经去离子水处理。Zn、Cu、Fe、Mn和Cr元素标准贮存液以基准物质配制,临用前稀释成应用液。
1.4 样品
1.4.1 基础日粮 在充分搅拌混匀后的饲料堆上,在不同深度和方位,用几何法选5点,用采样锥取样,总量为1 000 g。
1.4.2 血液 早晨喂食5 h后,按常规局部剪毛、消毒,用一次性采血器在牛颈静脉采血,每牛8 mL,用肝素钠抗凝,置于指形离心管中。
1.4.3 精液 种公牛禁欲4 d后进行采精,每牛取原精液1 mL。
1.4.4 被毛 在额头上采取1.0 g距皮肤1~5 cm以内的毛发。剪毛前先梳理除去脱落部分及杂质。
1.5 分析方法
1.5.1 样品处理 采取饲料及被毛样品置于经盐酸处理的洁净称量瓶内,80℃烘干至恒重,烘干样品粉碎。称取0.2 g干样于微波消解罐中,加入5 mL的纯硝酸,1 mL30%的过氧化氢,拧紧罐盖,于微波炉内2档消解7~9 min,消化至无色透明液,冷却取出用超纯水定容至10 mL。
血液、精液样品,充分混匀后分别取1.0 mL于微波消解罐中,其余加溶液和消解步骤基本同上。
1.5.2 原子吸收分光光度计工作条件 Zn、Cu、Fe、Mn、Cr测定原子吸收分光光度计工作条件见表1。
表1 原子分光光度计工作条件
1.6 数据处理 采用Exce1 2000的统计分析功能进行t检验。
2.1 基础日粮中微量元素含量 表2表明,基础日粮中Zn元素含量大大低于美国NRC推荐的种公牛营养标准需要量[1-2](40 mg/kg),Cu元素低3.581 mg/kg,这一缺乏量要占种公牛营养需要量的35.81%。饲料中Fe、Mn、Cr三元素的含量与种公牛营养需要量很接近,能满足种公牛生长、生产的需要。表明,基础日粮中 Zn、Cu两元素缺乏,而 Fe、Mn、Cr三元素能满足种公牛的营养需要。
表2 饲料中微量元素含量 mg/kg
2.2 被毛中微量元素含量 表3表明,被毛中微量元素含量与日粮微量元素含量有关,由于日粮中Zn、Cu两元素缺乏,因而种公牛被毛中Zn、Cu两元素含量偏低。精液品质正常牛与异常牛相比,Zn、Cu两元素差异显著(P<0.05)。日粮中Fe、Mn、Cr三元素的含量能满足种公牛的营养需要,精液品质正常牛与异常牛相比,3元素含量差异不显著(P>0.05)。
2.3 血液中微量元素含量 血液中微量元素的含量能反映日粮中微量元素的摄入量。因基础日粮中Zn、Cu两元素缺乏,导致在栏种公牛血液中Zn、Cu元素含量偏低。精液品质正常牛与精液品质异常牛相比,Zn、Cu 两元素差异显著(P <0.05),而Fe、Mn、Cr三元素相比,差异不显著(P>0.05)。
2.4 精液中微量元素含量 很多数据、资料证明,微量元素对精液品质的影响很大。微量元素的缺乏或过量直接影响到精液品质的优劣。表3表明,精液品质正常牛与异常牛相比,Zn元素差异极显著(P<0.01),Cu元素差异显著(P<0.05),而 Fe、Mn、Cr三元素均差异不显著(P>0.05)。
表3 被毛、血液、精液中微量元素含量 mg/kg
3.1 不同品种动物对微量元素的吸收存在种间差异,同种动物对微量元素的吸收存在个体差异。虽然基础日粮相同,但精液品质正常牛与异常牛对微量元素吸收率不同,利用率亦不同,是造成两者间同组织中微量元素存在差异的一个重要因素。
3.2 通过对种公牛基础日粮、被毛、血液、精液中Zn、Cu 、Fe、Mn 、Cr五种微量元素含量测定,结果发现,近几年来徐州地区部分成年公牛精液品质不良、性欲差、生产能力低下与Zn、Cu缺乏有关。
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