四叶参多糖对糖尿病小鼠血糖及抗脂质过氧化作用的影响

张 峰 张继国 高永峰 杜瑛培

(泰山医学院药理学教研室，山东 泰安 271016)

糖尿病是以糖代谢紊乱为主的全身性疾病，自由基氧化损伤被认为是重要发病机制[1]。近年来，大量的研究表明植物多糖在降血糖/清除自由基方面有显著的活性，具有重要的应用前景。四叶参又名山海螺、羊乳、轮叶党参等，系桔梗科党参属多年生植物，其块根中富含多糖[2]、生物碱、黄酮等成分。有报道[3]四叶参多糖具有抗氧化作用，但是否具有降血糖作用缺乏研究。本实验就四叶参多糖对实验性糖尿病小鼠的血糖、抗氧化作用进行研究，以探讨四叶参多糖降糖与抗氧化作用的关系，旨在为合理开发泰山四叶参提供依据。

1 材料与方法

1.1 动物

健康SPF级昆明种小鼠，体重(18±2) g，♂，由泰山医学院实验动物中心提供，合格证号:鲁动质字 070103。

1.2药品与试剂

四叶参购于泰安市场，经粉碎、石油醚脱脂后，采用水提醇沉法[2]制备粗多糖，苯酚-硫酸法测定多糖含量为67.08%。盐酸二甲双胍，北京京丰制药有限公司生产，批号：060303；四氧嘧啶(Alloxan，ALX)，英国Fluka公司生产，临用前冰生理盐水配制；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)测定试剂盒，均购于南京建成生物工程研究所。

1.3 仪器

S-54型紫外分光光度计，上海棱光技术有限公司生产；怡成虹吸式血糖仪,北京怡成生物电子技术有限公司生产。

1.4 方法

1.4.1糖尿病小鼠模型制备

取小鼠60只，适应性饲养3 d。随机取10只作为正常对照组，其余为实验组。实验组小鼠禁食12 h后，尾静脉一次性注射四氧嘧啶60 mg·kg-1。正常对照组注射等容积生理盐水。实验组注射72 h后，剪尾取血测定空腹血糖，血糖值高于11.1 mmol·L-1者为合格糖尿病模型。

1.4.2动物分组及给药

将糖尿病模型小鼠随机分为：糖尿病模型组、四叶参多糖低(200 mg·kg-1)、高(400 mg·kg-1)剂量组及二甲双胍组。灌胃给药，1次/d，连续14 d。正常对照组和糖尿病模型组小鼠灌胃给予等容积蒸馏水。给药期间喂饲标准饲料，饮水不受限制。

1.4.3实验指标检测

于末次给药1 h后，断头取血，分别测定空腹血糖和血清SOD活性、MDA水平含量；剖开腹腔，取胰腺，用4℃ 生理盐水清洗，滤纸吸干，称质量，置玻璃匀浆器中研磨，加4℃生理盐水制成10%胰腺匀浆，检测MDA和SOD。SOD、MDA均严格按试剂盒说明进行检测。

1.4.4统计学方法

2 结 果

2.1 小鼠一般状况、血糖变化

造模后小鼠皮毛蓬乱，活动减少，反应迟钝，3 d后饮水、尿量明显增加。连续给药7 d后四叶参多糖及二甲双胍组小鼠活动量增加，皮毛渐恢复光泽，饮水、饮食和尿量逐渐降低。2周后检测空腹血糖水平，与模型组小鼠比较，四叶参多糖组小鼠血糖下降明显降低(P<0.05或P<0.01)。见表1。

2.2 四叶参多糖对糖尿病小鼠血清SOD活性、MDA含量的影响

糖尿病模型小鼠血清MDA含量较对照组小鼠明显升高，SOD的活性明显降低，给予四叶参多糖14 d后，小鼠血清MDA含量明显降低及SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01)。见表2。

2.3 四叶参多糖对糖尿病小鼠胰腺匀浆中SOD活性、MDA含量的影响

与正常对照组小鼠比较，糖尿病模型小鼠胰腺匀浆中MDA含量明显升高，SOD的活性则降低。给予四叶参多糖14 d后，小鼠胰腺匀浆中MDA含量减少，SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01)。见表3。

表1 四叶参多糖对糖尿病小鼠血糖水平的影响±s)

注：与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

表2 四叶参多糖对糖尿病小鼠血清SOD及MDA的影响±s)

注：与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

表3 四叶参多糖对糖尿病小鼠胰腺匀浆中SOD活性、MDA含量的影响±s)

注：与正常对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3 讨 论

自由基代谢平衡失调是引起糖尿病体内代谢紊乱的重要原因之一。正常情况下，体内自由基、过氧化脂质和抗氧化成分之间保持着动态平衡。当自由基在体内的产生增加时，由于其特殊的细胞毒性作用，可对机体产生一系列的损害作用，糖尿病时胰岛对氧化损伤的敏感性增加。SOD是机体主要的自由基清除剂，MDA是脂质过氧化过程中一种较稳定的产物，SOD活性及MDA含量可反映机体抗氧化能力。

实验采用四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型，小鼠血糖显著升高，血清及胰腺组织中SOD活性降低，MDA增高，说明四氧嘧啶通过自由基损伤B细胞，使胰腺功能受损，胰岛素合成减少，引发糖尿病。四叶参多糖治疗后，小鼠一般状况改善，空腹血糖下降，血清及胰腺组织中SOD活性明显升高，而MDA含量明显下降，提示四叶参多糖可通过抗脂质过氧化作用改善胰腺功能，从而降低血糖。糖尿病发病机制复杂，四叶参多糖降血糖的确切机制有待于进一步研究。

[1] 毛晓明，刘志民．氧化应激在糖尿病糖代谢中的作用[J]．江苏医药,2005, 31 (3):212．

[2] 孙紫阳.泰山四叶参多糖的提取和含量测定[J].河北医学,2007,13(11): 1293-1294.

[3] 王德才,李同德,徐晓燕,等. 泰山四叶参提取物对小鼠抗氧化能力的影响[J]. 中国中医药信息杂志, 2008,15(1):37-38．