禽流感疫苗不同免疫剂量对免疫鸡产生的抗体效价影响

王文昆 沙德先 余 琼 谢英琼

摘要通过应用同一批次的禽流感疫苗,在同一鸡群中采用相同的免疫方法和部位(均采用颈部皮下注射),在同一时间内进行不同免疫剂量的禽流感疫苗免疫注射试验。根据免疫剂量的不同,将所选养殖场的同群鸡分别分为4个试验组(0.3mL/只、0.4mL/只、0.5mL/只和0.8mL/只)进行疫苗免疫,免疫后采用相同的饲养管理方式进行同群饲养管理,在间隔相同的时间后,采样进行免疫抗体水平检测,结果其产生的免疫抗体效价阳性率与免疫剂量成正比,高的达到92%,而低的仅11%。根据群体抗体达标检测要求,抗体效价检测阳性率达到全群的70%才能达到免疫合格,而该次试验中免疫剂量为0.5mL/只和0.8mL/只的试验组其群体抗体效价阳性率达到免疫抗体效价群体合格的要求,其余2组未达标。

关键词禽流感;免疫;剂量;效价

中图分类号 S858.31 文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)11-0214-01

为了摸清畜牧业生产中禽流感疫苗免疫剂量对免疫抗体效价的影响,切实达到免疫目的,2008年底配合禽流感的强制免疫工作,西昌市选取了2家规模场和2个乡镇的农户所养殖的健康鸡作为试验动物,进行了同一鸡群不同免疫剂量的鸡所产生的免疫效果的对比试验。现将试验结果总结如下。

1材料与方法

1.1试验动物

选取1个规模养殖蛋鸡场、1个规模养殖商品鸡场和2个乡镇农户所养的5周龄以上的健康鸡作为试验动物。

1.2试验器材

(1)免疫疫苗。黑龙江省生物制品一厂生产的重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)。批号:200761;生产日期:20070927;有效期:12个月;参考免疫剂量:2～5周龄0.3 mL/只,5周龄以上0.5mL/只;保存状况:2～8℃避光保存,严禁冻结;规格:250mL/瓶。

(2)注射器。使用上海市万佳动物保健器械有限公司生产的兽医用可调连续注射器,在使用前进行严格清洗和消毒,由专人进行统一调试和注射。

(3)采样器械。碘酒、酒精、一次性注射器、消毒后的离心管和青霉素瓶等。

(4)试验器械。一次性96孔V型微量反应板、定量移液器、吸头、量筒、烧杯、加液槽、微量振荡器等。

(5)诊断试剂。哈尔滨维科生物技术开发公司生产。抗原批号为2007050704,有效期2年;阳性血清批号为200705,有效期2年。阿氏液、鸡红细胞悬液、pH值7.2、0.01moL/L PBS液等按照《GB/T18936-2003禽流感血凝抑制试验标准》规定的标准进行配制。

1.3试验方法

根据《GB/T18936-2003禽流感血凝抑制试验标准》规定的标准要求进行抗体效价检测。选取4个养殖场的5周龄以上健康鸡为试验动物,每个场的鸡均分为1～4组,每个组100只鸡,各场的试验鸡均分别进行同群饲养。各场的免疫剂量1～4组均分别为0.3mL/只、0.4 mL/只、0.5mL/只和0.8mL/只。根据《GB/T18936-2003禽流感血凝抑制试验标准》规定的标准,以完全抑制4单位抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度;只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔血清滴度误差不超过1个滴度,试验有效。HI效价≤3log2(1∶8)判定为HI试验阴性;HI效价=4log2(1∶16)判为可疑,需重复试验;HI效价≥5log2(1∶32)判为HI试验阳性。免疫群体其抗体效价阳性率在70%以上的判群体免疫抗体效价合格。

2结果与分析

蛋鸡养殖场1～4试验组免疫鸡抗体效价阳性率分别为16%、55%、80%、90%;商品鸡养殖场1～4试验组免疫鸡抗体效价阳性率分别15%、54%、78%、88%;乡镇农户散养户1～4试验组免疫鸡的抗体效价阳性率分别为12%、51%、82%、91%和11%、52%、83%、92%。根据试验标准要求:免疫群体其抗体效价阳性率在70%以上的判群体免疫抗体效价合格。本次试验中免疫剂量为0.5mL/只和0.8mL/只的试验组均达到免疫合格要求,其余2组均未达标。

3结论与讨论

(1)本试验所选择的试验动物为各养殖场的同群鸡,各场在免疫前后都分别进行同群饲养,这样就使同一养殖场的鸡其饲养水平、饲养环境均相同,仅免疫剂量不同,其免疫抗体效价合格率差异较大,高的达到92%,而低的仅11%,这说明疫苗免疫剂量对同群鸡产生的免疫抗体效价影响大。

(2)本试验中,剂量为0.5mL/只的试验组抗体效价阳性率平均为80.75%,最低78%,完全达到试验标准中群体免疫阳性率达70%以上的免疫合格要求,而疫苗使用说明中的参考剂量要求也是5周龄以上的注射0.5mL/只。这充分表明,只要严格按照使用说明的剂量进行免疫,就能达到免疫效果的要求,剂量过小产生的抗体效价阳性率不能达标,过大又容易引起鸡群的应急反应,造成不必要的经济损失。

(3)因注射禽流感疫苗时,使用的是连续注射器,就要求对注射器严格清洗和消毒,特别是注射器注射剂量要严格根据鸡的大小适时调校准确,以保证免疫效果。

(4)免疫后要多喂水,适量添加富含维生素的饲料,以增强体质,减少疫苗免疫引起的应急反应,保障免疫效果。

4参考文献

[1] 杨志丰.如何做好鸡群的疫苗接种管理[J].中国家禽,2005,27(13):51-52.

[2] 宋明则,张亚萍,张红,等.给鸡接种油乳剂苗的技术要求[J].中国家禽,2005,27(16):38.