渔 讯
家兔人工授精是先进科学的配种方式,与传统的自然交配方式相比有以下优点:①可以节省种公兔的饲养成本。②可以防止品种退化,保持和不断提高兔群的品种质量。③可以充分利用优良种公兔的精液资源,而且繁殖的仔兔个体大、生长快、成活率高、出栏早,实行人工授精可提高兔场经济效益30%。④避免了种兔间的直接接触,可预防兔病的传播。人工授精主要有采精、精液品质检验、精液的浓缩或稀释、精液的保存和输精等几个关键工序。
一、采精
1. 种公兔的准备。种公兔在采精前1周和整个采精期间必须加强营养、增强光照和运动,每天在室外活动2个小时。一般经过1周的营养补充和诱导发情,公兔性活动已明显增强,精液生成旺盛。在采精的前两天让公兔与母兔自然交配2次,以便能采到最佳品质的精液。采精最好安排在家兔性欲最活跃的清晨或晚上凉爽时进行。第一次采精后隔1天采2次(清晨、晚上各1次),连续2周、休息1周,然后再重复上述过程。如果公兔已停止使用15天以上,在使用前都要有一个上述的调理过程。
2. 采精器的准备。①假阴道。外壳为直径30毫米、长80~85毫米的硬塑料管,内胎为人用避孕套。②集精杯。双层玻璃套瓶,外层为棕色保护瓶,内层为贮精瓶。③采精器的清洗与消毒。上述物品在使用前先用洗衣粉和1%高锰酸钾液刷洗干净,再用自来水、蒸馏水(或注射用水)依次冲洗,然后将塑料管和集精杯放在干燥箱内(160℃)或沸水内消毒20~30分钟。避孕套用蒸汽消毒15分钟。④假阴道的安装。先将消毒好的避孕套从管内穿过,一端翻套固定在外壳上,避孕套和塑料管之间加入40毫升左右45℃的热水,再将另一端翻套在外壳上,并用皮筋或胶圈固定,防止漏水或滑脱。集精杯两层之间加入37℃灭菌的温水,然后将其安装在假阴道的一端,固定。假阴道使用前,采精器整个内腔用配制的等渗精液稀释液冲洗1~2次。⑤采精的方法。将大小适宜、体质健壮、发情良好的母兔做台兔,将其阴部清洗消毒后,放到公兔笼内,先让公兔与台兔追逐片刻,以引起公兔的性欲。当公兔出现性冲动开始爬跨时,采精者左手抓住台兔的双耳及颈部皮肤,兔头向采精者方向固定,右手握住安装好的假阴道,以中指和无名指护住集精杯,从台兔腹部一侧将假阴道放到台兔两后腿之间,使假阴道口紧贴在阴门下部,并稍微用力托起台兔臂部。当公兔爬跨阴茎挺出时,采精者立即调整假阴道方向和位置,让公兔阴茎插入假阴道内。当公兔突然向前一挺、伴随一声尖叫倒在台兔一侧,说明公兔已射精完毕。这时,迅速把假阴道抽出,竖直,取下集精杯,采精完毕。
二、精液品质检验
1. 射精量。一般公兔射精量为0.5~2毫升,射精间隔时间长短对精液量有一定的影响。射精量越多,精子密度越高,活力越强,表示精液的品质越好。
2. 颜色和气味。正常家兔的精液呈淡乳白色,黏稠状,略带点腥味或无味。
3. 精子的活力。精子的活力是根据直线前进运动的精子占总精子数的百分比而判定,一般分为10个等级。如果全部精子几乎都呈直线前进运动则评为“1.0”级,90%的精子呈直线运动则评为“0.9”级,依次类推,直到“0.1”级。如果没有直线运动的精子,则为“0”级。显微镜观察方法:将0.5毫升精子在35℃温水中水浴5分钟,然后用吸管吸取少许精液滴于载玻片上,轻轻盖好盖玻片,用显微镜观察精子的活力和密度大小。优质精液呈直线运动的精子在70%以上,合格精液呈直线运动的精子在60%以上。
4. 精子的密度。测定精子密度的方法有估测法与计数法。①估测法。估测法是直接观察显微镜视野中精子的稠密程度。精子布满整个视野,像云雾一样为高度密集,这种精液每毫升含有精子3亿个以上;精子在视野间有明显的空隙,相当于2个精子的长度,可以看清各个精子的活动情况,这种精液为中等密集,每毫升有精子1亿~2亿个;精子在视野中零星分布,空隙很大,超过2个精子长度,这种精液稀薄,每毫升精子在1亿个以下。估测法一般在平时采精时使用。如果精子要进行精选保存,最好用计数法对精子密度进行评定。②计数法。计数法是检查精子数量最准确的方法。取精液稀释液1毫升于试管内,用毛细吸管吸取0.01毫升精液于稀释液内混匀,然后用滴棒将稀释好的精液滴入血细胞计数板的计数池内,计数5个方格内的精子数,乘以10万即得每毫升精子总数。精子总数在2亿个以上为优,1亿至2亿个为合格。在进行人工授精时,所采用的精液其射精量应在2毫升左右,精子活力在0.7以上,精子密度要为每毫升1.5亿个以上。
5. 精子的形态。精子的形态是关系到精子质量的另一项重要指标。正常的精子呈比例匀称的蝌蚪状。畸形精子有头部过大、头部过小、头部残缺、尾部残缺、头部断折、双头双尾、尾部卷曲断折等多种形态,未成熟的精子也属畸形精子。正常情况下,精子畸形率一般不超过15%。精子形态检查方法:用清洁吸管吸取原精液一小滴于干净玻片一端,另取一载玻片如制作血片一样制成均匀的精液抹片。等抹片自然干燥后,用龙胆紫染色3分钟,冲去染料后,用滤纸吸干水分放在400倍或600倍显微镜下观察,计数500个精子,数出畸形精子,畸形率=畸形数/500×100%
三、精液的稀释
在人工输精时,都要进行精液稀释。稀释目的是为了扩大精液的容积,增强精子的活力,延长精子的寿命,便于精子的运输与保存。常用的精液稀释液主要有以下3种:
1. 5%葡萄糖卵黄稀释液。将医院输液用的10%葡萄糖溶液用注射用水稀释成5%的浓度,用注射器抽取1~3毫升新鲜的卵黄加入到5%的葡萄糖注射液中,然后加入青、链霉素各10万单位,摇匀即可。
2. 11%蔗糖卵黄稀释液。取蔗糖11克加蒸馏水80毫升,待溶解后加水至100毫升,过滤,密封,高压灭菌20分钟,待温度降至25℃时,用注射器抽取1~3毫升新鲜卵黄加入到11%蔗糖溶液内,再加青、链霉素各10万单位,摇匀即可。
3. 蔗糖、奶粉、磷酸盐稀释液。取磷酸二氢钠0.41克、磷酸氢二钠1.69克,溶于50毫升蒸馏水中。取蔗糖5.5克、牛奶2.5克放入磷酸盐溶液中,再加蒸馏水至100毫升。过滤后密封高压消毒20分钟,冷却后加入青、链霉素各10万单位,摇匀即可。
上述稀释液可在4℃下保存14天左右。稀释液最好现用现配,以免时间过久变质腐败。稀释液使用前都要在温水中预热到35℃。精液稀释时,取品质优良的精液1毫升和精液稀释液3~5毫升混匀即可。
四、输精
家兔人工授精应着重掌握什么时候输精和怎样输精两个要点。家兔属于交配刺激排卵型动物,雌兔在发情期间,只有经过公兔爬跨交配刺激后,其卵巢中的卵才会在10~12小时排出。若不进行交配刺激,卵巢中的卵便会在体内自行萎缩,退化吸收。因此,在给发情母兔输精前,必须先用结扎的公兔进行爬跨交配刺激或注射性激素促其卵巢排卵。具体操作方法是:当发情母兔正值旺情期时,将其放入已结扎的公兔的笼内,让公兔与其自然交配后取出,5~6个小时后进行输精。也可肌内注射促排3号,6个小时后输精。为了保证输精成功,可在第二天再重复输精1次。
1. 输精器的准备。规格为5毫升的注射器和150毫米长的女用尿管经消毒处理后,放在无菌盒中待用。输精前用注射器吸取2~3毫升精液稀释液,将输精管(导尿管)冲洗1~2次,然后将待输的精液吸入注射器内,套上输精管。为了防止精液在输精管中滞留,注射器在抽取精液前可先吸入1毫升的空气,输精时连同空气一同推入阴道内,这样输精管内的精液就可全部推入阴道。
2. 输精操作。先将母兔保定好,外阴用生理盐水冲洗干净。接着把母兔臀部抬高,输精者左手分开阴唇,右手持输精管缓缓插入阴道。当插入7~8厘米深时(家兔阴道长度一般在8~12厘米)将胶管来回抽动数次,刺激母兔,然后将精液注入。输精完毕,在母兔臀部拍几下,让母兔阴道收缩,这样可防止精液倒流。输精后要让母兔安静休息。
3. 注意事项。①在整个输精过程中,一定要严格消毒,无菌操作,防止感染。②在整个输精过程中,手法要轻,操作要干净利落。要保证输精器具内没有对精子有害的药物及液体,保证精液温度和输入过程尽量模仿自然交配过程。③输精的部位一定要准确无误,避免将输精管插入尿道口中。母兔的膀胱在阴道内5~6厘米深处的下方,在插输精管时要沿阴道壁的背侧面插入6~7厘米深,越过尿道口以后再往里插1~2厘米,如没有尿液流出证明已插入子宫,这时再输入精液。④输精完毕后,器具要及时清洗、消毒,防止液体在其内粘结,影响下次使用。⑤输精后要及时进行登记、备案。
五、精液的保存
精液经稀释处理后,可以存放在一恒定温度中。如现采现用,精液保存在30℃左右的环境中即可。若存放4~8小时,可在15~20℃的室温环境中保存。需长时间存放的,则须先缓慢降温,再放入冰箱(或冷藏杯等)内0~5℃保存,使用时再缓慢升温。据试验,只要保存得当,精子的存活时间可达200小时以上。
作者简介:渔讯,养兔技术指导专家,出版专著《新法养兔》(金盾出版社)。联系地址:北京市石景山碣石坪小区11楼2单元501B室,邮编:100043。