大豆异黄酮对脂肪肝模型大鼠体内氧化应激水平的影响

李良昌 周宪春 延光海 崔春吉 金东洙

[摘要] 目的 探讨大豆异黄酮对非酒精性脂肪肝病模型大鼠抗氧化能力的影响。方法 将50只SD大鼠随机分成5组:正常组,模型组,大豆异黄酮低剂量组,大豆异黄酮中剂量组,大豆异黄酮高剂量组;除正常组外,其余各组以高脂饮食诱导建立大鼠脂肪肝模型,测定肝组织中MDA、SOD和T-AOC水平,对肝脏进行病理学检查,观察大豆异黄酮对该模型的影响。结果 大豆异黄酮可降低脂肪肝大鼠MDA,提高SOD和T-AOC水平,并能明显改善模型动物肝组织的病理损伤。结论 大豆异黄酮提高非酒精性脂肪肝病大鼠的抗氧化能力,利于脂肪肝的治疗。

[关键词] 非酒精性脂肪肝病;抗氧化;大鼠

[中图分类号] R575[文献标识码] A[文章编号] 1004-8650(2009)05-01-02

Efects of Soybean Isoflavones on the Antioxidant Activity of Fatty Liver Model in Rats

Liangchang-Li1, Xianchun-Zhou2, Guanghai-Yan2﹡, Cuichun-Ji2,Dongzhu-Jin1

(1.Yanbian University college of basic medicine;2 .Department of Gastroenterology, the Affiliated Hospital of Yanbian University Yanji 133000, Jilin Province, China)

[Abstract] Objective To evaluate the protective efects of Soybean Isoflavones on the antioxidant activity of nonalcoholic fatty liver diseases in rats. Methods 50 SD rats were randomly divided into 5 groups: nomal control group, model group, low dose of Soybean Isoflavones treatment group, intermediate dose of Soybean Isoflavones treatment group and high dose of Soybean Isoflavones treatment group. The fatty liver model of rats were induced by oral administration with high fat diet. Live tissue in animal was extracted to tested the MDA、SOD and T-AOC, Histopathologic examination of the liver tissues was also performed. Results Soybean Isoflavones was found to reduce the level of MDA and increase SOD and T-AOC levels in the liver tissues of fatty liver model, Soybean Isoflavones also markedly ameliorated the pathological injury in the liver tissue. Conclusion Soybean Isoflavones can exert a significant protective effect on nonalcoholic fatty liver diseases in rats by icrease their ability of antioxidant activity.

[Key words] nonalcoholic fatty liver diseases; antioxidant; rat

近年来非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver diseases,NAFLD)发病率呈逐年上升的趋势。NAFLD的发病机制较复杂,有广泛的因素参与,迄今尚未完全阐明,其中氧化应激相关性损害是其重要的病理环节。大豆异黄酮(Soybean Isoflavones,SI)具有很强的抗氧化活性,如清除超氧阴离子、羟自由基和过氧自由基或单线态氧[1]。本研究旨在观察大豆异黄酮对大鼠高脂饮食性脂肪肝模型的抗氧化作用。

1材料与方法

1.1实验动物

成年SD大鼠,雌雄各半,体重180-200g 由延边大学医学部实验动物中心提供。

1.2试剂和仪器

大豆异黄酮系天然提取物,由成都牧甫生物科技有公司提供。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒购于南京建成试剂公司。752型紫外光栅分光光度计为上海第三分析仪器厂产品;236HK台式冷冻离心机为德国HERMLE产品;德国Sartarius的BP211D电子天平。

1.3实验方法

1.3.1 动物处理SD大鼠50只,随机分为五组,每组大鼠10只,正常组:大鼠喂饲基础饲料;高脂模型组:大鼠喂饲高脂饲料(88%基础饲料,10%猪油,2%胆固醇);SI低剂量组:大鼠喂饲高脂饲料+SI(30mg/kg/d);SI中剂量组:大鼠喂饲高脂饲料+SI(100mg/kg/d);SI高剂量组:大鼠喂饲高脂饲料+SI(300mg/kg/d),大鼠连续喂养6周。

1.3.2 标本采集及处理用5%戊巴比妥钠麻醉后处死动物,立刻剖开腹腔,暴露肝脏,观察肝脏颜色及质地,取肝右叶同部位组织1.0g,4℃研磨制备成肝组织匀浆,按试剂盒方法测定肝组织中SOD、MDA和T-AOC。

1.4统计学处理

采用SPSS11.5软件包,进行多组数据计量资料单因素方差分析(ONE-WAY ANOVA),以均数±标准差(±s)表示;等级资料用Ridit分析,均以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1肝脏肉眼观察

麻醉后打开动物腹腔,观察实验动物肝脏,发现正常组大鼠肝脏肉眼观察呈鲜红色,边缘锐利,表面光滑,质地柔软,无异常变化;模型组大鼠肝脏呈黄褐色,边缘圆钝,包膜紧张,表面不光滑,可见局灶性黄白色斑点,质地较软,肝脏体积明显增大;SI高剂量组大鼠肝脏颜色淡红,边缘锐利,表面光滑,质地柔软,稍有肿大;SI中剂量组大鼠肝脏颜色变暗,边缘稍钝,表面不平,质地柔软,有肿大;SI低剂量组大鼠肝脏颜色微黄,边缘钝,肝脏表面呈沙粒样改变,质地较软,体积增大。

2.2大豆异黄酮对NAFLD大鼠肝组织MDA、SOD和T-AOC水平的影响。

模型组肝组织内MDA明显高于正常组(P<0.01),而SOD和T-AOC则明显低于正常组(P<0.01),应用SI低剂量治疗对MDA、SOD和T-AOC水平没有明显影响(P>0.05),应用SI中、高剂量治疗均能影响肝组织MDA、SOD和T-AOC水平(P<0.05,P<0.05)见表1。

3讨论

肝脏是脂质代谢的重要器官,肝脂肪变性可在短期内发展为不可逆的肝损害,预后不容乐观[2]。研究对脂肪肝有效的药物已经成为目前的热点。脂质过氧化在NAFLD中广泛存在,氧化应激在NAFLD发病机制中的作用不可忽视。即肝中氧化抗氧化平衡失调,可能是其重要机制[3]。本试验通过建立大鼠高脂饮食性脂肪肝模型观察大豆异黄酮的作用,结果显示SI高、中剂量可降低模型组肝组织内MDA浓度,提高SOD和T-AOC水平,改善肝组织病理变化。我们的研究结果表明大豆异黄酮能明显提高NAFLD模型大鼠体内的抗氧化能力,并在治疗脂肪肝过程中发挥一定的作用。

参考文献:

[1] 李燕.大豆异黄酮的抗氧化作用及其防治疾病作用[J].国外医学卫生学分册,2001,28(2):100-103.

[2] Bacon BR,Farachvash MJ,Janney CG,el a1.Nonalcoholic steatoheatitis:an expanded clinical entity (see comments)[J].Gastroenterology,1994,107(4): 1103-1109.

[3] Koruk M,Taysi S,Savas MC,et a1.Oxidative stress and enzymatic antioxidant status in Patients with nonalcoholic steatohepatitis.Ann ClinLab Sci,2004,34(1):57-62.

(收稿日期2009-4-21)