注射用三磷酸胞苷二钠的处方设计及稳定性考察

周建华

摘 要 目的：研究注射用三磷酸胞苷二钠的生产处方并考察其稳定性。方法：采用单因素辅料筛选和对比试验法，对注射用三磷酸胞苷二钠的处方进行优化，并采用高效液相色谱法测定其含量并考察其稳定性。结果：注射用三磷酸胞苷二钠的处方为三磷酸胞苷二钠40 mg，甘露醇20 mg，甘氨酸20 mg，注射用水1 mL,冷冻干燥。结论：该处方设计合理，制剂稳定性好。

关键词 三磷酸胞苷二钠 筛选 对比试验法 稳定性

中图分类号：R97 文献标识码：B 文章编号：1006-1533(2008)05-0224-03

三磷酸胞苷二钠为腺苷酸类药物，可促进神经细胞内磷脂、核酸和蛋白质的合成代谢，调节神经细胞生物膜的合成，增强神经细胞抗损伤能力，营养神经细胞，延缓神经细胞凋亡。临床上主要用于治疗脑梗死、充血性心力衰竭、急性脑血管病、新生儿缺氧缺血性脑病和糖尿病周围神经病变等［1～3］。

由于三磷酸胞苷二钠对温度较敏感，在常温下易分解为二磷酸胞苷二钠和一磷酸胞苷二钠。为增强其稳定性，笔者将该品经过处方优化并制成冻干粉针剂，对注射用三磷酸胞苷二钠的处方工艺和稳定性进行了研究。お

1 仪器与试药

1.1 仪器

SPD-10Avp高效液相色谱仪(日本岛津公司)；pHSJ-3FpH计（上海精密科学仪器有限公司）；Lyo-1真空冷冻干燥机（上海东富龙科技有限公司）；SHH-250JS恒温恒湿箱（重庆市永生实验仪器厂）。

1.2 试药

三磷酸胞苷二钠（杭州美亚生物技术有限公司，批号：050402）；甘露醇（上海长征富民药业有限公司，批号：05082701）；右旋糖酐40(六安华源制药有限公司，批号：05083002)；甘氨酸（协和氨基酸有限公司，批号：K469194）；注射用三磷酸胞苷二钠（见工艺验证项下，批号：060301、060302、060303）。お

2 方法与结果

2.1 处方设计

2.1.1 溶剂的确定

根据三磷酸胞苷二钠易溶于水的特点，经过溶解试验，40 mg三磷酸胞苷二钠可在0.5 mL的注射用水中完全溶解，且放置数日不析出。因此，选择注射用水为本品的溶剂。

2.1.2 冻干体积的确定

为了保证主药的溶解且冻干易于成型，经试验，确定冻干体积为1 mL。

2.1.3赋形剂的筛选

合适的赋形剂可以使制剂易于冻干并能保持较好的外观性状。本实验选择甘露醇和右旋糖酐40分别制备样品，考察样品的干燥失重、外观性状、复溶性，从而筛选出最合适的赋形剂，结果见表1。

从表1可见，用甘露醇作赋形剂时，冻干品的干燥失重、外观性状及复溶性均优于右旋糖酐40。因此，选择甘露醇作为本品的赋形剂。

2.1.4 处方筛选

冻干制剂要求骨架成型且较牢固，外观光平细密，含水分低，复溶性好。在确定溶剂、冻干体积、赋型剂的基础上选用甘氨酸为稳定剂。处方组成见表2。

按上述处方组成配成药液，过滤，灌装于管制瓶中，每瓶1 mL，半加塞入冻干箱冻干。对制得的样品进行评价，考察外观性状、干燥失重、复溶性、澄清度、含量及有关物质，结果见表3。

从表3可见，各处方的外观性状无明显差异；随着甘露醇用量的增加，干燥失重逐渐降低；而随着甘氨酸用量的减少，含量逐渐降低。综合考虑，可选择处方D作为最优处方。

2.2 工艺验证

按上述最优处方称取处方量三磷酸胞苷二钠、甘氨酸及甘露醇，加入冷的注射用水中搅拌溶解，用2 mol/L 氢氧化纳调pH至5.5~6.5，用冷注射用水定容，用0.22 μm微孔滤膜无菌过滤，冻干，制备3批中试样品（批号：060301、060302、060303）。结果，所制备的3批样品的性状均为白色冻干块状物，干燥失重分别为3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%；含量分别为98.3%、101.6%和102.1%，含量在95 .0％～105.0％之间；有关物质分别为1.7%、1.5%和1.9%，均小于5.0％。

2.3 质量控制

2.3.1 干燥失重

取本品，以五氧化二磷为干燥剂，60 ℃减压干燥至恒重，失重不得超过7.0%［4］。3批样品干燥失重分别为3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%。

2.3.2 含量测定

总核苷酸：用分光光度法测定［4］，在280 nm波长处测定吸收度，按C9H14N3Na2O14P3的吸收系数为243计算。

三磷酸胞苷二钠的重量比：用高效液相色谱法测定［4］。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.2 mol/L 磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠35.8 g，磷酸二氢钾13.6 g，加水900 mL溶解，用1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.0，加入四丁基溴化铵1.61 g，加水至1 000 mL摇匀。甲醇∶水（95∶5）为流动相；柱温为35 ℃，检测波长为271 nm；理论板数按三磷酸胞苷二钠峰计算应大于1 500；各色谱峰的分离度应符合规定。出峰次序依次为一磷酸胞苷、二磷酸胞苷与三磷酸胞苷。三磷酸胞苷二钠含量（%）=总核苷酸×三磷酸胞苷二钠的重量比。结果，3批样品的含量分别为98.3%、101.6%和102.1%。

2.3.3 有关物质检查

按照含量测定项下三磷酸胞苷二钠的重量比的方法测定，有关物质不得超过5.0%。结果，3批样品的有关物质分别为1.7%、1.5%和1.9%。

2.4 稳定性研究［4］

根据三磷酸胞苷二钠对温度比较敏感的特点，将3批样品（批号：060301、060302、060303）按市售包装，在温度为（30±2）℃、相对湿度（65±5）％的加速试验条件下放置，分别于1、2、3、6个月取样分析各项指标，结果见表4。按市售包装，在温度为（25±2）℃、相对湿度（60±10)％的长期试验条件下放置，分别于3、6、9、12个月取样分析各项指标，结果见表5。

加速及长期试验结果表明，在温度为（30±2）℃、相对湿度（65±5）％加速试验条件下，干燥失重、含量、有关物质等各项指标均符合质量标准要求。在温度为（25±2）℃、相对湿度（60±10）％长期试验条件下，干燥失重、含量、有关物质等各项指标均符合质量标准要求。

3 结论

三磷酸胞苷二钠原料药在常温条件下具引湿性，易降解。通过制剂处方筛选，得到了一种能显著改善该品稳定性的处方工艺，使注射用三磷酸胞苷二钠的各项指标能达到质量标准要求。

采用高效液相色谱法能同时准确测定本品中三磷酸胞苷二钠的含量及有关物质，具有快速、重现性好、准确的优点。经6个月加速和12个月长期稳定性考察，本品性状、干燥失重、含量、有关物质等指标均无明显变化。说明本处方工艺合理，产品质量稳定。

参考文献

1 黄经璋,王嗣春,史孟松.三磷酸胞苷二钠治疗急性脑梗塞的临床疗效观察［J］.临床和实验医学杂志,2004,3(3):155－157.

2 冯永歌,刘建军,申敏，等.三磷酸胞苷二钠治疗新生儿缺氧缺血性脑病34例［J］.河南医科大学学报,2001,36(4):494－495.

3 武顺,孙中安,任冬梅.三磷酸胞苷治疗糖尿病周围神经病变的临床观察［J］.临床军医杂志,2003,31(6):30－31.

4 国家药典委员会编.中华人民共和国药典二部［M］.2005年版.北京:化学工业出版社,2005:附录176.

(收稿日期：2008-02-22)