猪圆环病毒2型-猪肺炎支原体二联灭活疫苗（圆支优）临床免疫效力试验和最佳免疫日龄探索

摘要：[目的] 为客观、科学地评价圆支优（猪圆环病毒2型-猪支原体肺炎二联灭活疫苗）的免疫效力，并探索最佳免疫日龄。[方法] 本试验选取圆支优分别免疫7、14和21日龄仔猪各221头、216头和209头，同类商品疫苗分别免疫7、14和21日龄仔猪各217头、211头和202头，空白对照组为205头仔猪，不免疫2种疾病的相关疫苗。各组于相同条件下隔离饲养，观察并统计免疫应激反应、猪群健康度、生产性能指标等进行临床免疫效力评价。各组随机选择40头猪，于40、60、100日龄采集全血和喉拭子分别用于猪圆环病毒和猪肺炎支原体的病原检测，并统计猪圆环病毒感染和猪肺炎支原体排菌情况以进行实验室评价。[结果] 圆支优免疫后无任何应激反应，同类商品疫苗7、14日龄免疫后分别有部分猪只出现应激现象；圆支优7、14和21日龄免疫组的成活率分别为88.24%、89.35%和88.52%，均高于同类商品疫苗（分别为87.56%、87.68%和88.12%），2组均远高于空白对照组（81.46%）；圆支优7、14日龄免疫组的呼吸道疾病发生率分别为2.71%和2.31%，均低于同类商品疫苗（分别为4.61%和3.79%），21日龄免疫组为3.83%，略高于同类商品疫苗（3.47%），2组均远低于空白对照组（15.61%）；圆支优组和同类商品疫苗组的平均日增重分别为0.47 kg/头和0.46 kg/头，均高于空白对照组（0.43 kg/头），料肉比分别为1.76和1.82，2组差异较为显著，均远低于空白对照组（1.93）；圆支优7、14日龄免疫组至试验结束2种病原检测结果均为阴性，21日龄免疫组至60日龄时，2种病原检测结果均为阴性，但100日龄检测时分别有2头猪圆环病毒阳性和1头猪肺炎支原体阳性，阳性率分别为5%和2.5%；同类商品疫苗7、14和21日龄免疫组至60日龄时2种病原检测结果均为阴性，至100日龄检测时各组分别有4、7、6头为猪圆环病毒阳性和2、2、3头为猪肺炎支原体阳性，阳性率分别为10%、17.5%、15%和5%、5%、7.5%；空白对照组于40、60和100日龄检测时，分别有9、6、4头为猪圆环病毒阳性以及6、7、10头为猪肺炎支原体阳性，阳性率分别为22.5%、15%、10%和15%、17.5%、10%。[结论] 与同类商品疫苗相比，7～14日龄免疫圆支优，可更安全、有效和持久的预防猪圆环病毒和猪肺炎支原体感染，显著提高猪群的健康度和生产性能指标，同时有效降低劳动强度、注射应激以及非瘟等直接接触性疾病的感染几率，是目前养猪生产中防控2种疾病的优选疫苗。

关键词：圆支优；同类商品疫苗；临床免疫效力；最佳免疫日龄

猪圆环病毒（PCV）有PCV-1、PCV-2、PCV-3和PCV-4型等4个血清型，其中以PCV-2临床危害最为严重，可造成感染猪的严重免疫抑制，易继发或并发其他病原体，使病情进一步加剧和复杂化，给养猪业造成严重的经济损失[1]。猪肺炎支原体（M.hyo）可使支气管中纤毛凝结成束、脱落，丧失摆动功能，从而导致支原体肺炎，继而引发一系列复杂的呼吸系统疾病，严重影响患猪饲料转化率及生长发育，堪称猪场利润的隐形杀手。目前，疫苗免疫是防控上述2种疾病最经济和最有效的手段[2-3]。鉴于生产实践中2种疾病混合感染率较高，疫苗接种时间也较为接近，免疫持续期均要求持久，因此，猪圆环病毒2型-猪支原体肺炎二联灭活疫苗（以下简称圆支二联疫苗）不仅可互助增效，还可有效降低劳动强度、注射应激以及非瘟等直接接触性疾病的感染几率，因此，为越来越多的猪场所关注和选用。本研究旨在对免疫不同圆支二联疫苗的猪群进行跟踪，通过临床生产和实验室检测数据来评估疫苗免疫效果，为临床选择疫苗提供参考，同时验证不同免疫日龄的免疫效力评估，以探索最佳免疫日龄，为其临床科学应用提供指导依据。

1 材料和方法

1.1 疫苗

圆支二联疫苗（商品名：圆支优）由北京华夏兴洋生物科技有限公司提供，同类商品疫苗购自国内某生物制品公司。

1.2 试剂和仪器

猪圆环病毒2型和猪支原体肺炎的荧光定量PCR检测试剂盒以及荧光定量PCR仪均由河南农业大学动物疫病诊断中心提供。

1.3 实验动物

圆支优试验组7、14和21日龄仔猪分别为221头、216头和209头，同类商品疫苗组7、14和21日龄仔猪分别为217头、211头和202头，空白对照组205头仔猪，共计1 481头，均由河南省某养殖集团公司提供。

1.4 试验设计和免疫

详见表1。

1.5 临床生产数据统计

各组于相同条件下隔离饲养。试验前称量平均初始重，免疫后观察、统计仔猪6小时内的各种应激反应。整个试验期间每日仔细观察、记录猪群状态及各种生产指标，试验结束后全面评估猪群健康状况并计算平均日增重及料肉比。

1.6 实验室检测

各组随机选择40头猪，分别于40、60、100日龄采集全血和喉拭子，送至河南农业大学动物疫病检测中心开展猪圆环病毒和猪肺炎支原体的病原检测，统计猪圆环病毒感染和猪肺炎支原体排菌情况。

1.7 分析与总结

对圆支优进行临床免疫效果评估，并验证不同免疫日龄的免疫效力，从而探索最佳免疫日龄。

2 结果

2.1 临床生产数据统计

第一，免疫应激结果。结果见表2。圆支优组7、14和21日龄免疫后均无任何应激反应；同类商品疫苗组于7、14日龄免疫后各有2、1头试验猪出现呕吐和卧地不起，应激比例分别为0.92%和0.47%。空白对照组无异常。

第二，猪群健康度。结果见表3。圆支优7、14和21日龄免疫组分别成活195头、193头和185头，成活率分别为88.24%、89.35%和88.52%；同类商品疫苗7、14和21日龄免疫组分别成活190头、185头和178头，成活率分别为87.56%、87.68%和88.12%；空白对照组成活167头，成活率为81.46%；结果显示，圆支优组成活率明显高于同类商品疫苗组，二者均远高于空白对照组。圆支优7、14和21日龄免疫组分别有6、5和8头发生呼吸道疾病，疾病发生率分别为2.71%、2.31%和3.83%；同类商品疫苗7、14和21日龄免疫组分别有10、8和7头发生呼吸道疾病，疾病发生率分别为4.61%、3.79%和3.47%；空白对照组有32头发生呼吸道疾病，疾病发生率为15.61%。结果显示，圆支优组7日龄和14日龄呼吸道疾病发生率明显低于同类商品疫苗组，21日龄免疫组略高于同类商品疫苗组，但二者均远低于空白对照组。

第三，生产性能指标结果。结果见表4。圆支优组和同类商品疫苗组的平均日增重分别为0.47 kg/头和0.46 kg/头，2组差异不显著，均高于空白对照组（0.43 kg/头）；圆支优组和同类商品疫苗组的料肉比分别为1.76和1.82，2组差异较为显著，均远低于空白对照组（1.93）。

2.2 实验室检测结果

结果见表5和表6。圆支优7、14日龄免疫组至试验结束猪圆环病毒阳性和猪肺炎支原体的病原检测结果均为阴性，21日龄免疫组至60日龄时，2种病原检测结果均为阴性，但100日龄检测时分别有2头猪圆环病毒阳性和1头猪肺炎支原体阳性，阳性率分别为5%和2.5%；同类商品疫苗7、14和21日龄免疫组至60日龄时2种病原检测结果均为阴性，至100日龄检测时各组分别有4、7、6头为猪圆环病毒阳性和2、2、3头为猪肺炎支原体阳性，阳性率分别为10%、17.5%、15%和5%、5%、7.5%；空白对照组于40、60和100日龄检测时，分别有9、6、4头为猪圆环病毒阳性以及6、7、10头为猪肺炎支原体阳性，阳性率分别为22.5%、15%、10%和15%、17.5%、25%。结果显示，与空白对照组相比，接种圆支二联疫苗，均在60日龄内有效抵抗感染猪圆环病毒阳性和猪肺炎支原体感染；与同类商品疫苗相比，圆支优免疫效果更好，保护期更长，尤其是7、14日龄免疫组至100日龄时仍未感染2种病原，免疫效果极佳，而21日龄免疫组则存在极个别感染。

3 讨论

本研究中，整个试验周期内各组试验猪被分别饲养于完全独立的不同猪舍内，试验过程严格按照猪场正常养殖流程进行，未发生重大烈性传染性疾病，因此，可最大程度排除其他因素对本研究结果的干扰。

近年来圆支二联疫苗逐渐得到市场认可，但免疫效果和安全性严重参差不齐。当前生产实践中以“猪群健康度+生产性能指标+抗原检测”相结合作为主导来进行2种疫苗的免疫效果评估[4-5]。本试验选用的圆支优免疫猪只后，成活率明显高于同类商品疫苗，免疫保护期则更为持久，呼吸道疾病发生率和料肉比则明显低于同类商品疫苗，效果显著。另外，在疫苗评估过程中，同样需要关注安全性，圆支优在不同日龄接种后无任何免疫应激，安全性很高，而同类商品疫苗7、14日龄接种后均有部分猪只出现应激现象。

通常情况下，猪肺炎支原体感染可加重猪圆环病毒相关的肺部及淋巴结病变，增加PMWS的发病概率，而猪圆环病毒感染则不会加重猪肺炎支原体鼻腔排毒及其引起的肺部病变，因此在联合免疫时，应首先重点关注猪肺炎支原体的免疫效力和免疫日龄。猪肺炎支原体的母源抗体仅能保护10日龄内仔猪，而感染最早可发生于2～3周龄仔猪，加之灭活苗免疫2周后才可发挥保护作用，因此免疫日龄应越早越好，本研究结果有力地证实了这一观点。7、14日龄组免疫圆支优至试验结束均未感染猪肺炎支原体，21日龄免疫组至60日龄时检测结果仍为阴性，但100日龄时已有个别猪只感染，同类商品疫苗7、14日龄组仅能保护至60日龄，21日龄免疫组的感染率则上升至3倍。猪圆环病毒抗原检测结果与猪肺炎支原体抗原检测结果基本一致。因此，生产实践中圆支优的免疫时间应以7～14日龄最为合适，尽量不要选择21日龄时免疫，易造成极个别猪只免疫效果不佳。

综上，圆支优7～14日龄免疫时，可有效预防猪肺炎支原体和猪圆环病毒感染，并可有效降低劳动强度、注射应激以及非瘟等直接接触性疾病的感染概率，是目前养猪生产中防控2种疾病的优选疫苗。■

参考文献：

[1] 翟少伦，娄亚坤，杜丽银，等.猪圆环病毒2型和3型双重荧光PCR检测方法建立及应用[J].中国动物保健，2021，23（03）：101-102.

[2] 高一鸣.广西某公司种猪场猪肺炎支原体流行病学调查及免疫效果评估[D].武汉：华中农业大学，2023.

[3] 邓清文，秦乐娟，胡泽奇，等.五种常用猪2型圆环病毒疫苗的效果比较与分析[J].湖南畜牧兽医，2023（01）：25-28.

[4] 吴丽艳，覃旺，王勤华，等.不同猪圆环病毒疫苗临床免疫效果的比较[J].中国猪业，2020，15 （05）：73-77.

[5] 肖婷，陈忠伟，蒋家霞，等.不同猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效果评价及比较[J].中国动物检疫，2021，38 （12）：109-115.

收稿日期：2024-11-22

作者简介：常洪涛（1978.7.17—），男，博士，副教授。研究方向：猪病快速诊断技术及新型疫苗研发。

通讯作者：刘慧敏（1984.2.6—），女，博士，副教授。研究方向：免疫与代谢、病毒与宿主相互作用的机制研究。