[摘 要]目的 探究复方中药消毒剂消毒藻酸盐印模的应用价值。方法 用制备好的个别托盘制取藻酸盐印模,将印模分别放入浓度为108个/ml的金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的菌悬液中浸泡染菌,再将染菌后的藻酸盐印模分别浸泡于浓度0.25%、0.50%的亿人安消毒液、2000 mg/L的84消毒液中,分别浸泡3、5、10、15 min。将消毒后的印模放入100 ml的0.90%生理盐水中浸泡3 min后取出,用倾注培养法对活菌培养,并进行活菌计数。结果 3种消毒液在作用10 min与15 min时对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率为100.00%;在3 min与5 min时两种浓度的亿人安消毒液的灭菌率为97.62%~98.61%,84消毒液的灭菌率为99.43%~99.64%。结论 0.25%浓度以上的亿人安消毒液浸泡藻酸盐印模10分钟以上对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率达到100.00%。
[关键词] 亿人安消毒液;藻酸盐印模材料;浸泡消毒
[中图分类号] R783 [文献标识码] A [文章编号] 1004-4949(2024)11-0071-04
基金项目:遵义市红花岗区科技计划项目(编号:遵红科合社字〔2022〕07号)
Application Value on Alginate Impression Materials of Compound Traditional Chinese Medicine Disinfectant
TANG Qiu-yu1, ZHANG Zhong-rui1, JIANG Hai-tao2
(1.Honghuagang District Stomatological Hospital, Zunyi 563000, Guizhou, China;
2.Department of Oral and Maxillofacial Trauma and Orthognathic Surgery, Affiliated Stomatological Hospital of Zunyi Medical University, Zunyi 563000, Guizhou, China)
[Abstract]Objective To explore the application value of alginate impression materials of compound traditional chinese medicine disinfectant. Methods The alginate impression materials were prepared with the prepared individual trays. The impressions were immersed in the bacterial suspension of Staphylococcus aureus, Candida albicans, and Escherichia coli at a concentration of 108/ml, and then the infected alginate impressions were immersed in 0.25%, 0.50% Yirenan disinfectant and 2000 mg/L 84 disinfectant for 3, 5, 10, and 15 minutes, respectively. The sterilized impressions were immersed in 100 ml of 0.90% normal saline for 3 minutes and then removed. The live bacteria were cultured by pour culture method and counted. Results The sterilization rate of three disinfectants on Staphylococcus aureus, Candida albicans and Escherichia coli was 100.00% at 10 minutes and 15 minutes. At 3 minutes and 5 minutes, the sterilization rate of two concentrations of Yirenan disinfectant was 97.62%~98.61 %, and the sterilization rate of 84 disinfectant was 99.43%~99.64%. Conclusion The sterilization rate of Staphylococcus aureus, Candida albicans and Escherichia coli reached 100.00% when the alginate impression materials was soaked in 0.25% concentration of Yirenan disinfectant for more than 10 minutes.
[Key words] Yirenan disinfectant; Alginate impression materials; Immersion disinfection
制取印模是一般口腔修复治疗的必备步骤,也是保证修复质量的重要步骤。口腔修复治疗中引起病毒与细菌交叉感染的大多数原因是口腔印模污染,美国牙科协会建议[1],除了用流水冲洗外,还需要用消毒剂对口腔印模进行二次消毒。疾病预防控制中心认为,每一个刚从口腔中制取的印模都应该进行有效的消毒处理。但是目前始终没有一个明确的方法,来满足口腔印模消毒的标准。制取印模常用的是藻酸盐印模材料,现如今,国内外常用的印模消毒方法是喷涂消毒法及浸泡消毒液。与喷涂消毒法相比,浸泡消毒是一种更可靠、更有效的消毒方法。此方法能让印模和托盘的每个部位充分和消毒液接触,并通过消毒液的不同浓度和不同浸泡时间来达到灭菌的效果。基于此,本研究选用亿人安消毒液与84消毒液对藻酸盐印模材料浸泡消毒,对比复方中药消毒液与化学消毒液对印模消毒的效果,旨在寻找临床上更加有效及安全的藻酸盐印模材料消毒方法,现报道如下。
1.1 试验材料 亿人安消毒液(安徽亿人安有限公司,皖卫消证字2011第0173号,规格:500 ml);84消毒液(夏津津商生物科技有限公司,鲁卫消证2021第1301号,规格:500 ml);藻酸盐印模材料(天津登士柏有限公司)。
1.2 试验用菌 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌,均源自中国菌种保藏中心。
1.3 方法
1.3.1制菌悬液 在净化工作台上将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌接种在基础的斜面培养基上,把白色念珠菌接种在沙保罗斜面培养基上,培养24 h后观察菌落培养情况;将1 ml生理盐水加入长满菌落的斜面培养基内,用接种环轻轻刮下细菌,并用生理盐水冲洗斜面,将冲洗下的细菌移到试管内;在比浊仪管中加入2 ml的生理盐水和0.1 ml的菌液,用比浊仪测浓度,根据测试的麦氏浓度将3种细菌分别配成浓度为108个/ml的300 ml菌悬液,菌悬液现配现用。
1.3.2分组 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌分为3个大组,再将0.25%亿人安消毒剂、0.50%亿人安消毒剂、84消毒剂分为3组,其中84消毒液组为阳性对照组;根据浸泡消毒时间不同(分别浸泡3、5、10、15 min)分为4小组,共有 36组,每组有10个印模,共360个印模。再取30个印模分别在3种菌液中染菌,每种细菌各10个印模,用于计算出未消毒印模表面的菌量。
1.3.3制取印模 橡皮碗和调拌刀灭菌后备用,根据水粉比例2∶1,调和30 s,把调和好的藻酸盐印模材料装入已灭菌后托盘内,等待3 min后取出印模。
1.3.4染菌、消毒及培养 将取好的印模分别放入配制好的白色念珠菌菌悬液、大肠杆菌菌悬液、金黄色葡萄球菌菌悬液中浸泡3 min,再将浸泡了菌液的印模分别放入0.25%亿人安消毒液、0.50%亿人安消毒液、2000 mg/L 84消毒液中,分别浸泡3、5、10、15 min;将消毒后的印模放入装有100 ml的0.90%生理盐水中浸泡3 min后取出,将浸泡印模后的生理盐水用移液器吹打20下,使生理盐水中的细菌分布均匀;取1 ml的液体移入培养皿中,再取温度在45°左右的培养基15 ml到培养皿中混合后等待凝固,再将培养皿放在电热培养箱中培养24 h后进行活菌计数;而消毒前印模的回收菌量是通过3种细菌各10个印模只染菌后直接进行倾注培养法培养细菌,再进行活菌计数。根据不同的细菌、消毒液和消毒时间分组,计算灭菌率。灭菌率=(消毒前印模回收菌量-消毒后印模回收菌量)/消毒前印模回收菌量×100%。
1.4 统计学方法 应用SPSS 17.0统计学软件对数据进行统计和分析,运用χ2检验分析灭菌效果的数据,检验水准为双侧α=0.05。
2.1 消毒液对细菌作用3 min时的灭菌效果 0.25%亿人安和0.50%亿人安对金黄葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率为97.62%~98.24%,2000 mg/L 84的灭菌率为99.43%~99.61%,见表1。
2.2 消毒液对细菌作用5 min时的灭菌效果 0.25%亿人安和0.50%亿人安对金黄葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率为98.31%~98.61%,2000 mg/L 84的灭菌率为99.61%~99.64%。
2.3 消毒液对细菌作用10 min时的灭菌效果 3种不同消毒液对金黄葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率均为100.00%,见表2。
2.4 消毒液对细菌作用15 min时的灭菌效果 3种不同消毒液对金黄葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率均为100.00%。
口腔科的临床治疗中广泛使用藻酸盐印模,印模消毒的要求是印模材料与消毒液充分接触,浸泡消毒操作简单并能满足上述要求。传染病防控中,利用消毒剂是去除或减少病原微生物的一种有效途径。市场上的消毒剂多为化学制剂,种类繁多,可能伴随不同的副作用,也可能对自然环境产生危害[2-4]。因此开发出安全、毒副作用小、环保的消毒产品已成为人们关注的焦点[5]。中药消毒剂的特点是天然、安全、不易产生耐药性。作为表面消毒剂,对物品低腐蚀、无损害、气味芳香,具有复方、协同、高效的特点[6,7]。亿人安消毒液是一种复方中药消毒剂,是从天然亳菊花、薄荷、千里光、金银花等中药材中提取出消毒成份,根据生物分子的选择性,通过集成膜分离纯化技术,再复配对氯间二甲苯酚(PCMX)4.50%~5.50%(W/V),精制而成的高效环保消毒液。亿人安消毒液是以杀菌范围广,可杀灭肠道致病菌、化脓性球菌、致病性酵母菌和感染常见细菌为主要特点。其中中药取材天然,现代药理研究表明[8-10],多种中药提取物具有显著的杀菌效果和抗病毒作用,并且不易产生耐药性,具有无毒、无腐蚀、无刺激、绿色环保等特点,而其中的PCMX是高效、安全、广谱的杀菌剂,对革兰氏阳性和阴性菌及霉菌具有极好的杀灭效果,其是通过使蛋白质变性达到杀菌效果,毒性较低[11]。以往常见的消毒剂如84消毒液、戊二醛等为化学性消毒剂,化学性消毒剂均有不足[2,12,13]。本研究根据酚类消毒剂卫生要求,再根据亿人安消毒液的使用说明选择了0.25%与0.50%浓度的亿人安消毒液作为试验消毒液以及4组作用的时间。
本研究中分别用0.25%亿人安消毒液、0.50%亿人安消毒液、2000 ml/L 84消毒液浸泡消毒3、5、10、15 min,从对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率可以看出,0.25%、0.50%亿人安消毒液浸泡10 min和15 min均有较好的灭菌效果,灭菌率均为100.00%。我国国家标准中对普通物体表面消毒剂的卫生要求,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的灭杀试验中的灭杀对数值≥5.00。欧洲标准EN1275指出,将杀灭率大于99.99%视为消毒合格。根据欧洲的消毒试验标准和我国国家标准中对普通物体表面消毒剂的卫生要求,3种菌种在0.25%亿人安消毒液,0.50%亿人安消毒液,2000 mg/L 84消毒液分别浸泡10、15 min,这6组的灭菌率均达到的100.00%,消毒合格;而0.25%亿人安消毒液和0.50%亿人安消毒液浸泡3 min,这两组的灭菌率均为97.62%~98.24%;0.25%亿人安消毒液和0.50%亿人安消毒液浸泡5 min,这两组的灭菌率分别为98.13%~98.61%;2000 mg/L 84消毒液浸泡3、5 min,这两组的灭菌率均为99.43%~99.64%,这6组消毒不合格。由于印模制取的量不多,所计算的均值有所影响。从统计学上来看,这12组间并没有统计学意义,因此可以认为均有灭菌效果。
分析结果,达到欧洲消毒试验标准和我国国家标准中对普通物体表面消毒剂的卫生要求的是,0.25%亿人安消毒液、0.50%亿人安消毒液、2000 mg/L 84消毒液浸泡消毒10 min和15 min。通过灭菌率可考虑消毒的时间和消毒液的浓度与灭菌效果的关系呈正相关,时间越长灭菌率越高,浓度越高灭菌率越高。
本研究结果显示,2000 mg/L 84消毒液与0.25%、0.50%亿人安消毒液在浸泡10 min以上时间的灭菌效果同样为100.00%,但由于84消毒液中的次氯酸钠见光易分解,受热易分解,性质不稳定,所以该消毒液应该放置在避光、低温的环境中[14]。而亿人安消毒剂化的主要成分PCMX的化学性质较为稳定[11],在安全性、腐蚀性和化学性质的稳定性看来亿人安消毒液较84消毒剂更优。
综上所述,0.25%浓度以上的亿人安消毒液浸泡藻酸盐印模10分钟以上对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌的灭菌率达到100.00%。此外,口腔中除了细菌外还可能有乙肝病毒、艾滋病毒、梅毒病毒等,本研究所用消毒方法虽然可达到抑菌效果,但在多种病原微生物的影响下的消毒效果仍需进一步的验证。
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收稿日期:2024-3-14 编辑:吴含