上调KLF11可改善结肠炎模型小鼠的肠道炎症：基于抑制JAK2/STAT3信号通路

摘要：目的分析Kruppel样转录因子11（KLF11）在克罗恩病（CD）肠黏膜组织中的表达情况，并探究其对CD样结肠炎的作用和机制。方法以本院收集的CD患者结肠标本为实验组（CD，n=12），CRC患者结肠标本为对照组（Control，n=12），分析KLF11在病变和正常结肠黏膜组织中的表达差异；构建TNBS诱导的小鼠模型，分析KLF11在小鼠结肠黏膜组织中的表达情况；利用腺相关病毒感染上调KLF11在小鼠中的表达，并观察其对小鼠CD样结肠炎的影响；通过慢病毒感染构建Caco-2细胞KLF11高表达稳定体系，并利用体内外免疫印迹实验探究KLF11 对JAK2/STAT3 信号通路蛋白的影响；采用信号通路激动剂处理KLF11 表达上调的小鼠，验证肠道炎症反应的相关机制。结果免疫荧光染色分析显示，病变肠黏膜组织中KLF11表达水平较低（Plt;0.05），而TNBS小鼠结肠标本KLF11表达水平同样较低（Plt;0.05）；通过腺相关病毒感染小鼠发现，上调KLF11能够改善TNBS小鼠肠炎症症状，并降低肠黏膜炎症因子的表达水平（Plt;0.05）；利用慢病毒感染Caco-2细胞，通过免疫印迹筛选KLF11稳定高表达的细胞株（Plt;0.05）；体内外免疫印迹实验均显示，上调KLF11 抑制了小鼠肠黏膜组织及Caco-2 细胞中p-JAK2 和p-STAT3的表达水平；经JAK2/STAT3激活剂香豆霉素A1（COU）干预后显示，上调KLF11未能改善小鼠肠道炎症，同时肠黏膜炎症因子表达水平增加（Plt;0.05）。结论KLF11在CD肠黏膜中低表达，上调KLF11能改善肠炎症状、减少炎症因子分泌，其可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路拮抗肠道炎症反应。

关键词：克罗恩病；Kruppel样转录因子11；肠道炎症；JAK2/STAT3

克罗恩病（CD）是一种多发于青壮年的炎症性肠病，该病具有致残性和不可治愈性的特点，故对社会具有高度危害性［1-3］。尽管近年来已经开发多种新型药物并应用于CD的临床治疗，但患者的手术率并没有明显下降［4， 5］。肠道炎症反应是影响CD疾病进程的关键因素，受多种信号通路协同调控［6， 7］。因此，深入探索这一领域有望为CD的临床治疗提供新的参考［8］。Kruppel样转录因子11（KLF11）是一种基因结构高度保守的锌指蛋白，广泛表达于哺乳动物体内［9， 10］。有研究已表明KLF11具有调控炎症反应的功能，并能通过抑制细胞炎性因子的分泌来改善腹主动脉瘤［11］、缺血性脑损伤［12， 13］和糖尿病［14］等疾病。然而，KLF11在CD中的表达情况及对肠道炎症的作用尚未见报道，其能否影响肠炎的进展以及可能的作用机制仍需深入研究。本研究将基于我院收治的CD 病例和构建的CD 动物模型，分析KLF11 在CD和正常结直肠黏膜组织中的表达差异。此外，将利用TNBS结肠炎小鼠验证KLF11改善CD样肠道炎症的作用，并通过免疫印迹实验进一步分析KLF11的潜在作用机制，以期揭示并丰富KLF11的生物学功能，并为CD的临床治疗提供新的线索。