３个厂家４种口蹄疫疫苗对塔河马鹿免疫效果评价

摘要：为进一步做好塔河马鹿口蹄疫免疫工作，找到最佳免疫程序。采用３个厂家４种口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗和不同免疫程序对未免疫过的塔河马鹿进行免疫试验，采用液相阻断ELISA检测其免疫抗体。结果发现：使用Ｃ厂的口蹄疫O型、A型二价灭活高端疫苗免疫2次就可以使抗体效价达到合格；使用B、C厂的口蹄疫O型、A型二价灭活统采疫苗免疫3次可使抗体效价达到合格；Ａ厂的口蹄疫O型、A型二价灭活统采疫苗免疫３次不合格（除成年公鹿）。本试验为鹿场口蹄疫疫苗免疫程序的提供参考。

关键词：塔河马鹿；口蹄疫疫苗；免疫评估

塔河马鹿为世界上唯一栖息在荒漠中的马鹿亚种，分布在新疆塔里木河流域。新疆兵团第二师铁门关市为最大的养殖基地。2020年农业农村部规定马鹿为特种家畜，纳入家畜管理，需免疫口蹄疫疫苗。口蹄疫是当今世界上最为严重的家畜传染病之一，危害猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物[1]，该病传播迅速，发病率高，是世界动物卫生组织（WOAH）规定必须报告的传染病之一，为一类动物疫病。该病不但引起幼畜死亡，生产性能下降，而且严重影响家畜及畜产品流通和贸易活动。目前中国没有鹿专用的口蹄疫疫苗，故本试验选用牛羊的口蹄疫疫苗进行试验，通过对比分析3个厂家4种疫苗的抗体水平以及评价疫苗免疫效果，为鹿场口蹄疫疫苗免疫程序制定提供参考。

1 材料和方法

1.1 鹿的选择

母鹿共240头，其中2岁以上成年母鹿120头，70日龄左右雌性仔鹿120头。公鹿共240头，其中2岁以上成年公鹿120头，70日龄左右公仔鹿120头。以上鹿均健康且未免疫过口蹄疫疫苗。

1.2 主要试剂

疫苗：A、B、C 3个厂家生产的口蹄疫O型、A型二价灭活统采苗以及C厂的口蹄疫O型、A型二价灭活高端商品苗。

检测试剂：兰兽研O型口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测试剂盒检测。

1.3 试验方法

1）小群试验。采用吹管肌肉注射10%盐酸赛拉嗪注射液1 mL/只对70日龄左右的20只（公母各半）断奶仔鹿进行麻醉，肌肉注射1.5 mL口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗，肌肉注射3%盐酸苯噁唑注射液2 mL解除麻醉，观察应激反应情况；采用吹管肌肉注射10%盐酸赛拉嗪注射液5 mL/只对20头（公母各半）2岁以上成年鹿进行麻醉，肌肉注射2 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%盐酸苯噁唑注射液10 mL解除麻醉，观察应激反应情况。对出现应激反应的肌注肾上腺素或地塞米松急救。

2）正式实验。①仔鹿免疫和采样：吹管肌肉注射10%盐酸赛拉嗪注射液1 mL/只对70日龄左右断奶仔鹿进行麻醉，无菌颈静脉采血3 mL，肌肉注射1.5 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%盐酸苯噁唑注射液3 mL/只解除麻醉，观察鹿反应，分别于第1天采血检测O型口蹄疫抗体和第1次免疫、第31天采血检测和第2次免疫、第61天采血检测和第3次免疫、第241天采血检测。血样室温静置2 h后，离心收集血清；②成年鹿免疫和采样：采用吹管肌肉注射10%盐酸赛拉嗪注射液5 mL/只对成年鹿进行麻醉，无菌颈静脉采血3 mL，肌肉注射2 mL口蹄疫疫苗，肌肉注射3%盐酸苯噁唑注射液10 mL/只解除麻醉，观察鹿反应，分别于第1天采血检测O型口蹄疫抗体和第1次免疫、第31天采血检测和第2次免疫、第61天采血检测和第3次免疫、第241天采血检测。血样室温静置2 h后，离心收集血清。

分组：每组鹿30头，共16组，分别使用A、B、C厂家4种疫苗。

1.4 检测方法

按照试剂盒说明书对采集血清进行O型口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测。

判定标准：O型口蹄疫免疫抗体效价＞27为阳性，阳性率70%以上为合格。

1.5 数据处理：运用统计软件SPSS 19.0对数据进行分析。

2 结果

2.1 小群试验

1头仔鹿和1头成年鹿出现注射部位红肿情况，1天后消失。1头鹿仔鹿注射出现厌食、精神不振的情况，第2天恢复正常。其余未见不良反应。

2.2 O型口蹄疫抗体结果

免疫次数比较：第1次免疫后30天所有鹿抗体效价不合格（阳性率18.3%）；第2次免疫后30天抗体效价不合格（阳性率61.9%，显著高于第1次）；第3次免疫后抗体效价合格（阳性率81.0%，显著高于第1、2次）；241天后抗体效价不合格（阳性率66.9%）。雌性仔鹿第1次免疫后抗体效价阳性率12.5%和成年母鹿差异不显著；雌性仔鹿第2次免疫后抗体效价阳性率56.7%，显著低于成年母鹿65.8%；第3次免疫后均合格，效价阳性率差异不显著。公仔鹿第1次免疫后抗体效价阳性率22.5%和成年公鹿23.3%差异不显著；公仔鹿第2次免疫后抗体效价阳性率56.7%显著低于成年公鹿的68.3%；第3次免疫后均合格，效价阳性率差异不显著。

不同厂家比较：对雌性仔鹿和成年母鹿：第1次免疫3个厂家4种疫苗抗体效价均不合格；第2次免疫后只有C厂家高端苗抗体效价合格，分别达到76.7%和80.0%，均显著高于A、B、C厂家统采苗；3次免疫后A厂家疫苗抗体效价不合格，其他厂家均合格，抗体效价在70%以上；免疫第241天后B、C厂家抗体效价均合格。对公仔鹿和成年公鹿：第1次免疫3个厂家4种疫苗抗体效价均不合格；第2次免疫后只有C厂家高端抗体效价合格，达到73.3%、83.3%，公仔鹿C厂家高端苗显著高于A、C厂家统采苗，成年公鹿C厂家高端苗显著高于A、B、C厂家统采苗；第3次免疫后公仔鹿除A厂家疫苗抗体效价不合格外，其他所有疫苗抗体效价均合格且B、C厂家显著高于A厂家。详见表1。

3 讨论

1）本次实验使用口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗对塔河马鹿进行免疫，3只鹿出现应激状况，应激率0.75%，第2天均恢复正常，一方面疫苗本来就有应激，另一方面可能不是鹿专用疫苗。

2）塔河马鹿野性比较强，每次保定需要使用吹管肌肉注射麻药才能进行保定。本次实验使用疫苗免疫，仔鹿抗体阳性率显著低于成年鹿，可能由于麻醉对成年鹿应激较小，对仔鹿应激较大有关。

3）本实验疫苗免疫效果C厂家高端疫苗免疫2次就可以达到抗体效价合格，B、C厂家统采苗免疫3次以后抗体效价就合格，A厂家不合格（除成年公鹿），可能因为不是鹿专用疫苗，要多次免疫才合格，A厂家疫苗对塔河马鹿不敏感有关。

4）本次试验对塔河马鹿推荐使用口蹄疫O型、A型二价灭活高

端疫苗免疫2次或使用B、C厂家统采疫苗免疫3次。■

参考文献：

[1] 王雪伟，马亚宾，贾琳，等．犊牛口蹄疫O型灭活苗两种不同免疫程序的免疫效果比较[J].黑龙江畜牧兽医，2018（6）：160-163.

[2] 田来明，权心娇，李男，等.梅花鹿口蹄疫病及继发病症的综合防制措施[J].

吉林畜牧兽医，2021，42（16）：64-65.