摘 要:酸枣仁是苁蓉补肾丸、人参归脾丸、补脑丸等几十种中成药的重要原料,随着酸枣的市场需求量逐年攀升其收购价也逐年上涨。但酸枣多野生,资源有限,甘肃庆阳地区出现“抢青”采摘、毁柱采摘等现象,不利于酸枣资源的可持续发展。为了分析采摘时间对酸枣仁品质的影响,于2023年9月8日至10月20日收集了甘肃庆阳产区不同采摘时间的酸枣仁,检测了其中油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖成分的含量。结果表明,“抢青”采摘导致酸枣仁油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖成分的含量都严重偏低,酸枣仁品质下降,10月初甘肃庆阳产区的酸枣仁功效成分含量基本稳定,建议庆阳地区对酸枣采收时间进行干预,将酸枣采收时间控制在10月左右。
关键词:酸枣仁;采摘时间;油脂;总黄酮;总皂苷;粗多糖
Effect of Picking Time on Quality of Ziziphus jujuba var. spinosa in Qingyang Production Area of Gansu Province
ZHANG Runhong1, XIAO Jing2, WANG Guangju1
(1. Lanzhou Petrochemical University of Vocational Technology, Lanzhou 730060, China;
2. Agricultural Technology Extension Center of Qingcheng County, Qingcheng 745100, China)
Abstract: The seed of Ziziphus jujuba var. spinosa is cistanche kidney pills, ginseng spleen pills, brain pills and other dozens of Chinese medicine important raw materials, with the increase of Ziziphus jujuba var. spinosa market demand year by year, the purchase price also rose year by year. But Ziziphus jujuba var. spinosa are more wild, resources are limited, the “earlier-plucking” and destroy the pillar picking appeared in Qingyang area of Gansu province is not conducive to the sustainable development of Ziziphus jujuba var. spinosa resources. In order to analyze the effect of picking time on the quality of the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa, the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa from Qingyang production area of Gansu province at different picking times were collected from September 8 to October 20, 2023, and the contents of oil, total flavonoids, total saponins and crude polysaccharides were detected. The results showed that “earlier-plucking” lead to the content of oil, total flavonoids, total saponins, crude polysaccharide in the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa seriously low, the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa quality decline. Effective component content is basically stable at Qingyang production area of Gansu province in early October, suggested that Qingyang area should intervene the picking time at October.
Keywords: the seed of Ziziphus jujuba var. spinosa; picking time; oil; total flavonoids; total saponins; crude polysaccharides
酸枣,鼠李科枣属植物,是枣的变种。多野生,常为灌木,部分为小乔木。树势较强,枝、叶、花的形态与普通枣相似,但枝条节间较短,适应性较普通枣强。果皮常呈红色或紫红色,果肉较薄、疏松,味酸甜,营养价值高,可作为食品[1-2]。酸枣仁是酸枣的成熟干燥种仁,含有脂肪油、黄酮类、皂苷类、生物碱、粗多糖等多种化学成分。其中所含黄酮类成分具有明显的镇静催眠和抗氧化活性;所含皂苷类成分具有镇静、安神作用;所含粗多糖具有增强免疫功能和抗放射性损伤的作用;所含脂肪油无毒、无致突变作用,具有镇静安神、抗抑郁、抗肿瘤、降血脂、抗氧化等多重药理活性。酸枣仁常用于治疗失眠多梦、体弱盗汗等症,具有补肝宁心,敛汗安神之功效,是苁蓉补肾丸、人参归脾丸、补脑丸等几十种中成药的重要原料[3-6]。
庆阳市位于甘肃省东部,陕甘宁三省区的交汇处,兼有山川、平原,系黄河中下游黄土高原沟壑区,全市年平均气温7.4~9.4 ℃,全市年总降水量平均为410~640 mm,其地形、气候条件非常适合酸枣生长。近几年,中成药发展势头猛烈,酸枣仁作为多种中成药的原料,其市场需求量逐年攀升、收购价也逐年上涨。采摘售卖酸枣成为当地农民的收入来源之一,每年每户采摘酸枣的收入少则千元多则上万元,比较可观。但因酸枣属野生资源,归属权不明确,在高额利益的诱惑下,庆阳市辖区出现了“抢青”采摘、毁株采摘等掠夺式采收酸枣的现象,损坏、盗伐、滥伐酸枣树的问题非常严重,致使野生酸枣资源遭受了毁灭性破坏。研究团队根据以往经验分析,采摘时间的差异会影响酸枣仁的品质,“抢青”采摘可能会导致酸枣仁药效成分含量偏低,临床疗效减弱[7-8]。
本文以甘肃庆阳地区不同采摘时间的酸枣仁为研究对象,重点跟踪酸枣仁油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖成分的含量积累变化情况,确定甘肃庆阳产区酸枣的最佳采收时间。为当地政府合理规划酸枣采摘时间提供科学依据,助力庆阳市保护、发展和合理利用野生酸枣资源。
1 材料与方法
1.1 试剂
芦丁(芸香叶苷)对照品、酸枣仁皂苷A对照品、无水葡萄糖标准品均购于上海源叶生物科技有限公司,HPLC含量≥98%;NaOH、NaNO2、Al(NO3)3、HClO4、H2SO4、冰醋酸、无水乙醇、甲醇、苯酚、香草醛、石油醚,均为分析纯试剂。
1.2 仪器
分析天平(AB-204-N),瑞士Mettler Toledo公司;紫外可见分光光度计(UV-2700),日本岛津仪器有限公司;中药粉碎机(2500A),山东志高电器有限公司;电热鼓风烘箱(BPG-7082),合肥科晶材料技术有限公司;超纯水机(WP-UPT-20),四川沃特尔水处理设备有限公司;旋转蒸发仪(R-1001VN),郑州长城科工贸有限公司。
1.3 样品
不同采摘期的实验样品产地均为甘肃庆阳,共9个采样点,其中平原、山地阴坡、山地阳坡采样点各3个,每个采样点均选取生长茂盛、结果多的酸枣植株10株。采摘时间为2023年9月初至10月中旬,间隔1周采样1次,每次采样每株采摘果实60粒,合并5 400粒酸枣果实为1个样品。采摘的样品果实晾干去肉去壳后备用。
1.4 方法
1.4.1 样品预处理
将酸枣仁放入烘箱中在60 ℃下干燥6 h,粉碎,过40目筛,密封备用。
1.4.2 油脂提取方法
准确称取酸枣仁粉末10 g,用滤纸卷包裹严实以防外漏,随后置于索氏提取器中,加石油醚75 ℃回流脱脂3次,每次2 h。最后合并3次石油醚提取液,用旋转蒸发仪减压蒸馏得到油脂[9-10]。油脂含量计算方法为
式中:c油为酸枣仁油脂含量,mg·g-1;m油为提取油脂质量,g;m仁为酸枣仁粉末质量,g。
1.4.3 酸枣仁脱脂粉制备方法
将提取油脂后的酸枣仁粉渣挥干石油醚,置
50 ℃烘箱中干燥4 h,移至干燥器中冷却至室温,制得酸枣仁脱脂粉。
1.4.4 总黄酮、总皂苷、粗多糖提取方法
准确称取1 g酸枣仁的脱脂粉,置于100 mL圆底烧瓶中,加入60%乙醇溶液30 mL,70 ℃回流提取175 min。冷却后过滤提取液,弃残渣,滤液转移至100 mL容量瓶,用60%乙醇溶液定容,摇匀,作为供试品溶液。
1.4.5 总黄酮含量测定
以芦丁为对照品,采用紫外-可见分光光度法测定酸枣仁总黄酮的含量[11]。
(1)芦丁标准曲线的建立。精密称取10 mg恒重的芦丁对照品,用70%的乙醇溶液溶解并定容于50 mL容量瓶中,摇匀。精准移取芦丁对照品溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL及7.0 mL,分别置于25 mL容量瓶中,依次加入2.0 mL 5%的NaNO2溶液,摇匀后静置6 min,再加入2.0 mL 10%的Al(NO3)3溶液,混匀后静置6 min,再加入10.0 mL 5%的NaOH溶液,用70%的乙醇溶液定容,摇匀,显色15 min,与随行试剂空白于510 nm处测定溶液的吸光值。以溶液的吸光度(A1)为横坐标,芦丁的质量(m1,mg)为纵坐标绘制标准曲线,得到线性回归方程为m1=2.112 6A1+0.021 2,相关系数R2=0.999 9,芦丁标准曲线线性关系良好(图1)。
(2)总黄酮含量的测定方法。精准移取5 mL酸枣仁供试品溶液至25 mL容量瓶中,按照芦丁标准曲线建立的测量方法测定溶液的吸光度值,最后根据线性回归方程和稀释倍数计算各样品中总黄酮的含量。
1.4.6 总皂苷含量的测定
以酸枣仁皂苷A为对照品,采用紫外-可见分光光度法测定酸枣仁总皂苷的含量[12]。
(1)酸枣仁皂苷A标准曲线的建立。精密称取12 mg恒重的酸枣仁皂苷A对照品,甲醇超声溶解并定容于25 mL容量瓶中,摇匀。分别精准移取酸枣仁皂苷A对照品溶液100 μL、200 μL、300 μL、400 μL、500 μL、600 μL及700 μL于10 mL玻璃具塞试管中,45 ℃烘箱中将甲醇挥尽,依次精准加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL,密封,摇匀,置60 ℃水浴中加热20 min,随即置冰水浴中冷却2 min,再精准加入冰醋酸5.0 mL,摇匀,与随行试剂空白于480 nm波长处测其吸光度。以溶液的吸光度(A2)为横坐标,以酸枣仁皂苷A的质量(m2,mg)为纵坐标绘制标准曲线,得到线性回归方程为m2=0.431 2A2+0.007,相关系数R2=0.999 6,酸枣仁皂苷A标准曲线线性关系良好(图2)。
(2)总皂苷含量的测定方法。准确移取0.25 mL酸枣仁供试品溶液至10 mL具塞试管中,按照酸枣仁皂苷A标准曲线建立的测量方法测定溶液的吸光度值,最后根据线性回归方程和稀释倍数计算各样品中总皂苷的含量。
1.4.7 粗多糖含量的测定
采用紫外-可见分光光度法,以无水葡萄糖标准品为对照品,测定酸枣仁粗多糖的含量[13-16]。
(1)无水葡萄糖标准曲线的建立。精密称量无水葡萄糖标准品13 mg,蒸馏水溶解后定容于50 mL容量瓶中,摇匀。分别精准移取无水葡萄糖标准品溶液100 μL、200 μL、300 μL、400 μL、500 μL、600 μL及700 μL置于10 mL玻璃具塞试管中,精准补水至2.0 mL,继续精准加入1.0 mL 5%苯酚溶液,摇匀,迅速精准加入浓硫酸5 mL,摇匀,放置10 min,置于40 ℃水浴中保温15 min后用流水迅速冷却至室温,与随行试剂空白于490 nm波长处测其吸光度。以溶液的吸光度(A3)为横坐标,以无水葡萄糖的质量(m3,mg)为纵坐标绘制标准曲线,得到线性回归方程为m3=0.132 7A3+0.000 4,相关系数R2=0.999 4,无水葡萄糖标准曲线线性关系良好(图3)。
(2)粗多糖含量的测定方法。准确移取0.2 mL酸枣仁供试品溶液至10 mL具塞试管中,按照无水葡萄糖标准曲线建立的测量方法测定溶液的吸光度值,最后根据线性回归方程和稀释倍数计算各样品中粗多糖的含量。
2 结果与分析
经过测定,不同采摘时间酸枣仁中油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖含量的变化如图4所示。结果表明,不同采摘时间酸枣仁功效成分油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖的积累量不同,9月29日前变化较大,其含量整体随着时间的延后而逐渐增加,10月6日后稳定;即9月29日前是酸枣仁生长的关键时期,10月6日后酸枣仁发育成熟,甘肃庆阳地区产酸枣仁2023年的最佳采收时间是10月6日。据此,甘肃庆阳地区酸枣仁采收时间在10月上旬左右,具体应根据监测结果及时调整。
3 结论
经过对甘肃庆阳产区不同采摘时间酸枣仁中油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖成分的含量积累变化情况跟踪分析,“抢青”采摘会导致酸枣仁中油脂、总黄酮、总皂苷、粗多糖成分的含量偏低,10月初甘肃庆阳地区酸枣仁功效成分积累量趋于稳定。如果放任农民“抢青”的行为,不仅会破坏当地的生态环境,不利于持续创收,而且会严重影响酸枣仁的品质。为保证酸枣仁的品质,应严格管控酸枣采收时间,建议甘肃庆阳相关部门采取一定的干预措施,并在编制酸枣采收的技术规范和地方标准时将采收时间控制在10月左右。
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