羊布鲁氏菌病原分离诊断和综合防治措施

文│杨正帅 （山东省临沂市罗庄区动物疫病预防控制中心）

我国作为养殖大国，绵羊、山羊等养殖数量较大，国家统计局统计数据显示，2022年我国养羊业不断发展，不仅为消费者提供了优质的羊肉及相关产品，而且也是农牧民的主要经济来源之一，为国家乡村振兴产业的发展奉献了力量。但随着养羊业的发展，导致羊只患布鲁氏菌病的风险增大。因此，在使用科学准确的诊断方式诊断羊布鲁氏菌病的基础上，寻求有效的治疗方法和科学的防控措施十分必要。

布鲁氏菌病是养殖业中较为常见的人畜共患性传染病之一，不仅会对牛羊畜禽的生产和健康造成威胁，还会威胁消费者的生命安全，因此，做好羊布鲁氏菌病的诊断和防控工作具有重要意义。本文从羊布鲁氏菌病病原的分离诊断、养殖实践中的治疗及综合防控措施3个方面进行阐述，以期能为广大养殖户健康养羊提供参考和借鉴，保证羊只的健康及消费者的生命安全。

一、羊布鲁氏杆菌概述

布鲁氏杆菌属于革兰氏阴性，能感染哺乳动物，不会产生芽孢的小杆菌，主要包括马、狗、林鼠、绵羊等6个类型，其中羊、牛、猪最为常见且也能感染人。羊布鲁氏杆菌可感染不同品种、不同年龄阶段、不同性别的羊，尤其是在母羊中发病率更高。患病羊主要表现为多汗、发烧、关节肿痛、乏力、精神萎靡，妊娠母羊表现为流产、死胎且阴道红肿伴随子宫内膜炎、乳房炎，甚至不孕等疾病，分泌水样乳汁且凝结成块，公羊表现为睾丸炎、附睾炎等，此病成为地方流行性疾病，且一年四季均可发病。

二、诊断方法

1.病原分离培养。此方法是诊断布鲁氏菌病的金标准，但也存在操作复杂、实验室要求较高、易被污染、检测时间较长等问题。其原理是通过采集患病羊的血液、骨髓、其他体液等在培养基中进行培养，从而分离得到布鲁氏杆菌。用一次性采血器采集患病羊颈部血液，并将其在无菌条件下注入双相血培养基冷藏，接着在生物安全等级为3级及以上的实验室中培养，所需条件为37℃、浓度为10%的CO2培养箱，普通菌种3～4天即可生长出菌落。

2.血清学检测。常用的血清学检测包括酶联免疫吸附、虎红平板凝集、试管凝集试验等。

（1）酶联免疫吸附。此方法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短等优势。其原理主要是在ELISA板上包被菌体抗原，将处理过的血清滴入板中，若滴入的血清中含有布鲁氏杆菌的抗体，则会在板内形成抗原抗体的复合物，然后再加入酶标进行颜色反应；最后使用酶标仪检测出OD值从而计算出关于抗体的数量。

（2）虎红平板凝集。此方法具有操作简单、成本较低、可批量检测、准确度高的特点，但可能存在假阳性。其原理是当抗原与抗体结合后会形成凝集物，根据凝集程度进行判断。此方法一般作为初筛，若检测结果表现为阳性，再使用试管凝集试验进行二次检测，从而有效降低假阳性的发生率，保证检测结果的准确性。

（3）试管凝集试验。此方法为我国法定的检测布鲁氏菌病的方法，既可以定性也可以定量和半定量；其精确度高于虎红平板凝集试验，也具有稳定性强、敏感性高、特异性强的特点。其原理为颗粒抗原在适当电解质条件下可以与一定比例的抗体进行特异性结合，即发生凝集反应，当此反应在体外进行时所导致的凝集现象为试管凝集试验。

3.分子生物学诊断。常见的包括聚合酶链式反应（PCR）、环介导等温扩增技术等。

（1）聚合酶链式反应。此方法具有操作简单、灵敏度高、特异性强的特点，且随着技术手段的进步，又衍生出了荧光定量PCR、多重PCR技术等。其原理是在95℃高温下使双链DNA变性解螺旋为单链，然后在60℃条件下引物与单链DNA互补配对，接着在DNA聚合酶最适反应温度72℃条件下形成互补链，通过循环往复扩增出DNA分子。

（2）环介导等温扩增。此方法具有检测时间短、敏感性高、特异性强的特点，且检测结果具有可视化的特点。其原理是在65℃条件下DNA处于动态平衡，引物互补配对时另一条DNA链就会变成单链，通过利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域并在DNA聚合酶的作用下，以外侧引物区段的3’末端为起点，与模板DNA互补配对，启动链置换DNA合成。

三、治疗方案

1.非妊娠的羊只可以使用青霉素＋链霉素以肌内注射的方式进行治疗。

2.妊娠母羊，若病情较轻可以肌内注射10～30毫克的孕酮进行治疗；病情严重的需要考虑使用药物进行催产和堕胎，同时使用浓度为0.1%的高锰酸钾溶液进行子宫清洗，直至阴道无分泌物流出。

四、综合防控措施

由于布鲁氏菌病属于人畜共患性传染病，一旦发病不仅会威胁羊只健康，若消费者接触了患病羊或食用带菌产品也可能会造成感染。因此，广大养殖户、政府部门在饲养过程中一定要加强布鲁氏菌病防控工作，降低此病的发生率，甚至达到完全净化。

1.政府方面。

（1）加强宣传。由于广大养殖户专业素养参差不齐，对布鲁氏菌病无清晰了解，因此，基层部门、防疫部门应做好布鲁氏菌病宣传工作，使其认识到此病的危害性，从思想上重视此病的防控。首先，可以成立专门的宣传队伍，定期为各地区养殖户进行关于布鲁氏菌病防控知识的讲解，并定期设置考核，检验养殖户的接受程度。然后可以充分利用新媒体，如抖音、快手、直播等，将关于布鲁氏菌病的相关知识制作成短视频，能多次播放，加深理解。

（2）加大检疫力度。在饲养过程中，广大养殖户可能存在侥幸心理，为了减少工作量，不定期进行布鲁氏菌病检疫工作，加大此病发生、传播的风险。因此，为了对广大养殖户起到督促作用，政府部门应加大检疫力度，并根据检测结果实行一定的奖惩制度。其具体工作主要体现在以下几个方面。

对辖区内的养殖场定期进行抽检，对有问题的羊及时进行淘汰或扑杀，并责令养殖场实施整改。

做好羊只屠宰前的产地检疫工作，制定完善的检疫流程，严格执行，对检疫合格的羊只才能运输到屠宰场，对检疫阳性的要进行无害化处理。

制定科学、严谨的羊只调运方案，对新引入的羊要具备完善的检疫证明，并做好引种前的检疫、引种后的隔离饲养等工作，避免在引种过程中造成疫病传播。

做好羊只屠宰检疫，实施定点屠宰、集中屠宰等，责令关停小作坊式的屠宰场，并对每只屠宰的羊只进行详细登记，注明来源，提升产品质量。

（3）增加经费投入。充足的经费投入是做好布鲁氏菌病防控工作的重要条件，因此政府部门要设置专项经费。其一，在经济条件允许的情况下，设置阳性羊只无害化处理的经费补贴，降低养殖户的损失。其二，设置相关保险服务和保险方案，一旦出现阳性羊只，在养殖户强制捕杀和无害化处理后进行补贴，防止养殖户出现私自售卖的情况。其三，为基层畜牧兽医工作站配备较为先进的布鲁氏菌病检测设备，并提高基层工作人员的薪资待遇，从而保证人员充足，并调动其工作积极性，提高此病的防治质量。

2.养殖户方面。

（1）定期消毒。完善、严格的消毒制度可以有效预防多种疾病的发生。首先，每天定时打扫圈舍，清除羊只粪、尿等排泄物，破坏适合病菌繁殖的环境。然后要定期消毒，在消毒前用水冲洗污物，之后选择不同的消毒方式进行消毒，如对于饲草料等使用深埋或焚烧的方式进行消毒，墙面、地面、围栏等使用2%的火碱溶液进行喷洒消毒，金属用具使用火焰燃烧的方法进行消毒。

（2）科学管理。首先，要坚持自繁自养，尽量不从其他区域引种，避免引种过程中造成布鲁氏菌病的传播；然后，设施齐全，配备良好的通风系统、饮水池、饲料槽、保温、风扇等设备，为羊只提供一个温湿度适宜、空气干净的圈舍；最后，科学饲喂，根据各阶段羊只的生长发育特点进行分群、分栏饲养，并为其提供搭配合理、营养物质全面、适口性良好的饲草料，并定期补充微量元素、维生素、矿物质等，提高羊只自身免疫力和抵抗力。

（3）防护到位。工作人员应做好自身防护，预防感染。进入养殖区需要穿戴专门的工作服、口罩、手套等，在需要治疗、接产时严禁直接用手接触，并做好消毒处理工作。工作过程中不小心受伤需要及时使用碘伏、酒精等进行多次深层消毒，避免病菌入侵。此外，流产胎儿、死亡羔羊等要收集到指定地点进行无害化处理，避免随意丢弃，且处理后需要对地面、圈舍进行消杀，避免造成布鲁氏菌病的传播。

五、结语

综上所述，羊布鲁氏菌病是一种人畜共患病，会对羊只、消费者的健康造成威胁。因此，养殖户需要掌握对布鲁氏杆菌的诊断方式，出现异常情况后及时判断并采取有效的治疗措施，通过政府部门和养殖户共同努力，从源头防止此病的发生，保证养羊业的安全性和稳定性。