类风湿因子亚型、抗CCP和抗RA33联合检测在早期类风湿关节炎诊断中的应用价值

任春锋

(郑州大学第一附属医院 检验科,河南 郑州 450000)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的系统性自身免疫性疾病,以对称性、多关节、慢性增生滑膜炎为主要临床特征,反复发作导致患病关节和其附近组织呈现进行性破坏,常致受损关节出现畸形和功能障碍,并且可以引起心、肾、眼、呼吸系统、血液系统等靶器官及系统损伤,已经逐渐成为国内人群劳动力丧失和致残的主要原因之一[1]。近年来研究发现,除类风湿因子(rheumatoid factor,RF)外,其他指标检测在RA诊断中也具有较好的灵敏度及特异性,如抗CCP抗体、抗RA33抗体、抗角蛋白抗体等血清学指标的变化与RA患者的病情发展有一定关系,临床上可考虑根据这些血清学指标的变化对RA进行早期诊断[2]。本研究旨在探讨血清RF(包括IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF)、抗CCP、抗RA33联合检测在早期RA诊断中的意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择2021年6月1日至2022年5月31日郑州大学第一附属医院东院区收治的可疑RA、年龄≥16岁的患者血清,进行RF亚型(包括IgG- RF、IgA-RF、IgM-RF)、抗CCP、抗RA33水平检测,通过查阅病例、结合临床表现及X线等其他检查结果诊断疾病,根据临床诊断结果分为RA组(135例)和非RA组(1 556例)。RA组:男34例,女101例;年龄17～87(59.73±12.79)岁。非RA组:男572例,女984例;年龄17～96(53.96±15.12)岁。RA组纳入标准:年龄≥16岁;临床资料完整;诊断符合2010年美国风湿病学会和欧洲抗风湿病联盟RA分类标准[3]。RA组和非RA排除标准:系统性红斑狼疮等其他自身免疫性疾病;严重肝、肾功能不全;恶性肿瘤;重症感染。RA组与非RA组年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 检测方法

清晨空腹状态下抽取所有受试者肘静脉血4 mL用于检测,放到室温中静置后,以3 500 r·min-1离心10 min后将上清液取出,立即检测或置于-20 ℃冰箱保存集中检测。所有检测项目均采用酶联免疫吸附试验,仪器为Thermo Multiskan FC酶标仪。RF检测试剂盒由雅仕通诊断有限两合公司提供,用于定量检测人血清中的RF IgG、IgA、IgM抗体含量。抗CCP检测试剂盒由依诺瓦诊断公司提供。抗RA33抗体检测试剂盒由德国胡曼生化诊断有限责任公司提供。IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF的参考区间为0～15 U·mL-1,抗CCP参考区间为0～20 U·mL-1,抗RA33参考区间为0～25 U·mL-1。所有操作均严格按照试剂和设备说明书进行。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 RF、抗CCP、抗RA33检测结果

RA组IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF、抗CCP、抗RA33水平均高于非RA组(P<0.001),见表1。

表1 IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF、抗CCP、抗RA33检测结果[M(P25,P75),U·mL-1]

2.2 各检验指标诊断效能

单项检测指标中,抗CCP诊断灵敏度最高,IgG-RF特异性最高,抗CCP约登指数(即诊断正确指数)最高。如果以联合检测中所有项目均阳性为判断标准,诊断特异性明显升高,阳性预测值也比较高,但诊断灵敏度和约登指数降低;若以联合检测中只要有阳性为判断标准,虽然诊断特异性降低,但灵敏度和约登指数增加。联合检测中,诊断灵敏度最高的是RF亚型/抗CCP/抗RA33,其次是RF亚型/抗CCP;诊断特异性最高的是RF亚型+抗CCP+抗RA33,其次是RF亚型+抗RA33;诊断约登指数最高的是RF亚型/抗CCP/抗RA33,其次是RF亚型/抗CCP。见表2。

表2 各检验指标诊断效能分析

2.3 非RA患者RF、抗CCP和抗RA33出现阳性的原因分析

本研究收集到的1 555例非RA样本中有322例检测到IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF、抗CCP或抗RA33阳性,其在多种非自身免疫性疾病中出现。见表3。

3 讨论

调查显示,我国RA患者从出现典型的多关节肿痛及晨僵等症状至确诊为RA的中位时间长达6个月,25%的RA患者经1 a以上才能确诊[4]。诊断时机将直接影响患者的治疗效果与预后,早期诊断需根据患者的临床表现,结合实验室和影像学检查结果。2010年美国风湿病学会和欧洲抗风湿病联盟RA分类标准中,确诊RA的血清学指标包含抗CCP抗体与RF两项检测。RF是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体,无种属特异性,可分为IgM、IgG、IgA等,其中IgM最为常见,也是常规检测的类型,可见于70%的RA患者血清中,灵敏度较高但特异性较差[5]。RF-IgG与RF-IgA在RA患者血清中含量变化存在一定规律,即RF-IgG、RF-IgA的出现经常是伴随RF-IgM含量的升高,RF-IgG和RF-IgA阳性则与患者受累关节个数、骨质破坏严重程度具有显著相关性[2]。

抗CCP抗体是以人工合成的环瓜氨酸肽为抗原的自身抗体,抗CCP抗体对RA的诊断具有较高的特异性,可以在RA早期或者还未出现临床症状时就可以检出,而且其与病情的严重程度和活动性相关[6]。抗RA33抗体是一种自身抗体,是诊断RA较为特异的抗体[7]。研究发现,抗RA33稳定性较高,其含量与RA病情严重程度无关,对RA诊断具有一定的意义,但特异性较高,灵敏度较差[1]。

本研究结果显示,在RA诊断单项指标中,灵敏度最高的指标是抗CCP,其次是IgM-RF;特异性最高的是IgG-RF,其次是IgA-RF,诊断正确指数最高的两项指标是抗CCP和IgM-RF。RF亚型三项联合检测可以进一步提高诊断灵敏度和正确指数。这也说明了抗CCP和RF亚型在RA诊断中具有重要价值,这与相关文献[8-9]数据一致。抗RA33检测RA的灵敏度为25.85%,似乎并不是很好的检测指标,但在实际工作中发现有一些确诊RA病例,只有抗RA33阳性,但IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF和抗CCP均阴性。同时,抗RA33在RA组阳性率高于非RA组,说明抗RA33诊断RA还是有一定价值的。

以联合检测指标中只要有阳性为判断标准,RF亚型和抗CCP联合检测的诊断灵敏度、诊断约登指数高于其他单项检测,也高于RF亚型和抗RA33、抗CCP和抗RA33两种联合检测。以联合检测指标中只要有阳性为判断标准,RF亚型、抗CCP、抗RA33联合检测诊断灵敏度、诊断约登指数均高于其他任一类型联合检测和单项检测。以联合检测指标均阳性为判断标准,RF亚型、抗CCP、抗RA33联合检测的诊断特异性最高。因此,RF亚型、抗CCP、抗RA33联合检测是一项最有诊断价值的检验组合,特别是可以提高诊断灵敏度,避免漏诊。

为了排除自身免疫性疾病、肿瘤等对结果的干扰,本研究把自身免疫性疾病设置为筛选病例的排除标准。结果表明,一些非自身免疫性疾病2型糖尿病、高血压、骨质疏松、其他骨关节疾病(包括椎间盘突出、关节炎)、肺部疾病(包括间质性肺炎、慢性支气管炎、支气管扩张、肺气肿等)、肝肾疾病(包括肝肾功能损伤、肾病综合征、肾功能不全、肾结石)、甲状腺疾病、心脑疾病(如冠心病、心律失常、心功能不全、脑梗死、脑出血、脑膜炎等)、感染等也可以检测出这些指标阳性。

4 小结

RF亚型(包括IgG-RF、IgA-RF、IgM-RF)、抗CCP和抗RA33等检测指标对RA诊断具有一定价值,抗RA33虽然灵敏度和特异性均不及抗CCP和RF亚型,但在临床诊断时为避免漏诊,建议做为补充指标用于RA诊断。RF亚型、抗CCP和抗RA33联合检测的灵敏度、特异性和诊断约登指数均较高。这些指标除了在RA患者可以检测出阳性外,在其他自身免疫性疾病和非自身免疫性疾病中均可以检测到,因此临床工作中一定要把握好临床诊断标准,避免只要是见到阳性结果就诊断RA的低级错误出现。本研究不足之处为工作条件限制收集到的RA样本量偏小,只选取了酶联免疫吸附试验检测RF亚型、抗CCP、抗RA33进行RA早期诊断的研究,存在一定局限性,有必要在以后工作中探讨这些标志物与疾病严重程度的关系,寻求其他诊断RA更好的标志物。