冠状动脉慢血流患者血清Salusin-α、Salusin-β表达水平及预测价值

王宇,赵平,贾正培,陈华

冠状动脉慢血流 (coronary slow flow, CSF)是冠状动脉未见明显狭窄,但血流灌注缓慢,血流灌注不足以满足心肌氧需求的非阻塞性疾病,表现为胸痛、焦虑等,可发生急性冠脉综合征及猝死等[1-2]。寻找能够早期评估CSF的血清标志物,对临床诊治具有重要意义。Salusin-α是由人类扭转应力障碍基因TOR2A编码产生的选择性剪切产物,具有降低血压、减慢心率及调节脂质代谢的作用[3]。研究表明,Salusin-α能够改善颈动脉血管内皮功能障碍,抑制动脉粥样硬化的形成,是潜在的CSF的血清标志物[4]。Salusin-β与Salusin-α具有相同的前体,由血管内皮细胞、神经系统等产生,能促进血管内皮细胞炎性反应、加重氧化应激、增加炎性细胞和内皮细胞之间的黏附能力,促进冠心病等心血管疾病的发生[5-6]。现分析CSF患者血清Salusin-α、 Salusin-β表达水平及两者对CSF的预测价值,报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年6月—2022年6月内蒙古自治区人民医院心内科行冠状动脉造影(coronary angiography,CAG)检查的患者108例。根据心肌梗死溶栓试验(thrombolysis in myocardial infarction, TIMI)血流分级[7]分为CSF组66例(至少1支血管TIMI血流≤2级),非CSF组42例(TIMI 3级)。CSF组吸烟史比例、血尿酸高于非CSF组,血白蛋白低于非CSF组(P均<0.05),其他资料比较差异无统计学意义(P均>0.05),见表1。本研究经医院伦理委员会审核批准通过(20190413),患者或家属知情同意并签署知情同意书。

表1 非CSF组和CSF组患者临床资料比较

1.2 病例选择标准 (1)纳入标准:①年龄>18～80岁;②就诊前患者有反复胸闷、胸痛等心肌缺血症状;

③均接受CAG检查证实冠状动脉无明显狭窄或狭窄程度≤40%;④能够配合相关检查和治疗。(2)排除标准:①冠状动脉栓子、冠状动脉痉挛、冠状动脉扩张及溶栓治疗术后或冠状动脉支架植入术后;②合并心脏瓣膜病、先天性心脏病、心肌病、心力衰竭;③存在严重的肝肾功能不全、感染、自身免疫性疾病及恶性肿瘤;④存在持续性心房颤动、植入永久性起搏器患者;⑤对造影剂过敏或应用外源性血管收缩药物。

1.3 观测指标与方法

1.3.1 临床资料收集:性别、年龄、身高、体质量指数,既往有无吸烟史、高血压史、糖尿病史,血压等;实验室检查:血白蛋白、血尿酸、血尿素氮、血肌酐、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。

1.3.2 血清Salusin-α、Salusin-β检测:留取患者住院后次日晨起空腹8 h以上的肘静脉血5 ml,室温静置1 h后,离心留取血清进行后续检测。以酶联免疫吸附法检测血清Salusin-α、Salusin-β水平。Salusin-α ELISA试剂盒购自上海一研生物科技公司,货号EY-01H1494。Salusin-β ELISA试剂盒购自上海瑞番生物科技公司,货号RF1041。操作过程按照说明书要求进行。

1.3.3 CAG检查及血流速度评估:CAG采用标准Judkins技术,由2位心内科医生利用大C臂血管数字减影造影机(购自荷兰飞利浦公司,型号Philips Integris allura 12 monoplane)进行操作:经桡动脉或股动脉途径,以碘化醇为造影剂,15帧/s速度绘制图像;应用TIMI血流帧数评估冠状动脉血流速度,记录造影剂从充盈近端靶冠状动脉的全部直径到冠状动脉末梢特定解剖位置的帧数,左前降支(LAD)、左回旋支(LCX)、右冠状动脉(RCA)的特定解剖位置分别为心尖分叉处、分支的最远分叉处及左心室后支的第一个分支处。计算3支靶冠状动脉的平均TIMI帧数。

1.4 统计学方法 应用SPSS 26.0软件处理数据。正态分布的计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用独立样本t检验;计数资料以频数或率(%)表示,组间比较采用卡方检验;Pearson相关分析血清Salusin-α、Salusin-β与临床参数的相关性;多因素Logistic回归分析CSF发生的影响因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Salusin-α、Salusin-β及联合对CSF的预测价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组血清Salusin-α、Salusin-β比较 CSF组血清Salusin-α水平低于非CSF组,而血清Salusin-β水平高于非CSF组,差异均有统计学意义(P<0.01),见表2。

表2 非CSF组和CSF组患者血清Salusin-α、Salusin-β比较

2.2 2组CAG及血流速度比较 CSF组LAD帧数、LCX帧数、RCA帧数、平均帧数均明显高于非CSF组,差异有统计学意义(P均<0.01),见表3。

表3 非CSF组和CSF组患者CAG及血流速度比较

2.3 血清Salusin-α、Salusin-β与临床参数的相关性 Pearson相关分析显示,血清Salusin-α与血尿酸、LAD帧数、LCX帧数、RCA帧数、平均帧数呈显著负相关,与血白蛋白呈正相关(P均<0.01);血清Salusin-β与血尿酸、LAD帧数、LCX帧数、RCA帧数、平均帧数呈显著正相关,与血白蛋白呈显著负相关(P均<0.01),见表4。

表4 CSF组患者血清Salusin-α、Salusin-β与临床参数的相关性

2.4 影响CSF发生的多因素Logistic回归分析 以是否发生CSF为因变量(是=1,否=0),以上述结果中P<0.05项目为自变量,进行多因素Logistic回归分析,结果显示吸烟史、Salusin-β高是影响CSF发生的独立危险因素,血白蛋白高、Salusin-α高是独立保护因素(P<0.01),见表5。

表5 影响CSF发生的多因素Logistic回归分析

2.5 血清Salusin-α、Salusin-β及二者联合预测对CSF的价值 绘制血清Salusin-α、Salusin-β及二者联合预测CSF的ROC曲线,并计算曲线下面积(AUC),结果显示:血清Salusin-α、Salusin-β及二者联合预测CSF的AUC分别为0.840、0.782、0.896,二者联合优于各自单独预测效能(Z=4.561、4.103,P=0.005、<0.001),见表6、图1。

表6 血清Salusin-α、Salusin-β及二者联合预测CSF的价值

3 讨 论

CSF可引起室性心律失常、急性心肌梗死及心源性猝死,其CAG特征是无冠状动脉严重狭窄的情况下,冠状动脉内造影剂停滞、远端灌注延迟。CSF的发病与微血管和内皮功能障碍、炎性反应、弥漫性动脉粥样硬化及血小板聚集性增加等因素有关[8]。TIMI分级是临床行CAG中广泛使用的定性指标,但可能受到操作者主观因素及血管位置不同等因素的影响,临床上尚存在一定的不足[9]。深入研究CSF发病机制及影响CSF发生的危险因素,有利于CSF的筛查及临床早期干预。

Salusins是一类新的生物活性肽,包括28个氨基酸的Salusin-α和20个氨基酸的Salusin-β 2种形式,是由人类扭转应力障碍基因TOR2A表达后形成的选择性剪接产物,广泛表达于人体内分泌腺、骨髓及脑组织中,以自分泌或旁分泌的方式,广泛参与细胞有丝分裂、细胞内钙信号传导,具有促进下丘脑分泌血管加压素等生物学效应[10]。研究表明,Salusin-α参与脂质代谢调节,抑制巨噬细胞中胆固醇酯的积累,在动脉粥样硬化和心血管疾病中发挥重要保护作用[11]。本研究中,CSF患者血清Salusin-α降低,并与冠状动脉血流速度有关,提示Salusin-α的降低参与CSF的发生发展。这与既往学者在动物实验中观察结果一致[11],该研究表明,过表达Salusin-α能够抑制冠状动脉血管内皮细胞增殖,减轻内膜增厚程度,同时能够升高载脂蛋白C和载脂蛋白B的水平,改善冠状动脉血流灌注情况。分析其机制,Salusin-α可能通过减轻CSF患者动脉内膜厚度及斑块大小,抑制CSF疾病的发生发展。有学者报道,Salusin-α能够抑制巨噬细胞中酰基辅酶A的转录表达及生物活性,抑制巨噬细胞吞噬低密度脂蛋白,减少泡沫细胞形成,同时抑制血管内膜细胞的增殖和泡沫化,降低动脉内膜厚度[12]。尚有研究表明,Salusin-α能够通过抑制AKT/人哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的磷酸化激活,减少肿瘤坏死因子等促炎细胞因子产生,减轻冠状动脉的炎性反应,抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移,减少动脉粥样硬化斑块的面积[13]。本研究结果发现,Salusin-α是影响CSF发生的独立保护因素,表明Salusin-α是新的评估CSF的血清标志物。其原因可能是Salusin-α能够抑制冠状动脉血管内皮细胞的炎性反应,减少CSF的发生。研究表明,Salusin-α能够抑制人脐静脉内皮细胞核因子κB通路的激活,抑制白介素6、白介素8等促炎细胞因子的表达及促炎反应,当Salusin-α水平降低时冠状动脉炎性反应加重,血管内皮细胞损伤及凋亡增加,内皮下胶原沉积,形成冠状动脉微循环栓塞,导致CSF的发生[14]。

Salusin-β也是具有心血管和神经内分泌活性的多肽,但功能与Salusin-α相反,其能以旁分泌的方式刺激精氨酸加压素和催产素的释放升高血压,加快心率,促进心肌肥厚及心力衰竭的发生[15]。本研究中,CSF组患者血清Salusin-β升高,与3支冠状动脉血流帧数及平均帧数呈正相关,这与Akyüz等[16]学者观察结果一致,该研究发现血清Salusin-β升高能够增加心肌梗死患者溶栓后CSF的发生风险,但该研究纳入样本量较小,CSF组患者仅39例,结果可能存在一定的偏倚。本研究结果进一步提示Salusin-β参与CSF疾病的发生发展过程。分析其原因,Salusin-β以浓度依赖的方式增加血管平滑肌细胞和成纤维细胞内钙离子浓度,激活增殖相关信号通路的传导,诱导G1向S期转变,促进平滑肌细胞和成纤维细胞的增殖,引起CSF的发生[17]。另外,Salusin-β作为一种肽类激素,能促进白介素6、单核细胞趋化蛋白1及细胞间黏附分子1等炎性因子的释放,加重内皮细胞炎性反应,促进内皮细胞与单核巨噬细胞的黏附,导致血管内皮功能障碍及泡沫细胞形成[18]。本研究中,Salusin-β是影响CSF发生的独立危险因素,表明检测血清Salusin-β水平有助于评估CSF的发生。研究表明,Salusin-β激活可直接在转录水平上调内皮细胞内质网中酰基CoA胆固醇酰基转移酶-1表达,其能够促进游离胆固醇和长链脂酰CoA转化为胆固醇酯,促进泡沫细胞形成,加速动脉粥样硬化的发生[19]。另外,在高密度脂蛋白胆固醇受体缺陷的小鼠中,静脉输注Salusin-β能激活冠状动脉内皮细胞中核因子κB通路,增加动脉粥样硬化斑块中的低密度脂蛋白胆固醇水平和脂质负荷,加重动脉粥样硬化斑块的严重程度[20]。本研究中,血清Salusin-α、Salusin-β联合对CSF具有较高的预测价值,敏感度和特异度分别为0.853、0.786,表明血清Salusin-α、Salusin-β联合对CSF具有较高的预测效能,有助于临床早期诊治。

血白蛋白是炎性反应时负性急性期反应蛋白,具有抗氧化、抗动脉粥样硬化等多种生物学作用,在心血管系统中发挥保护效应。本研究显示,血白蛋白是影响CSF发生的独立保护因素。分析其原因,白蛋白能够清除游离的活性氧自由基和氮自由基,并作为脂肪酸的重要载体,发挥抗氧化和抗血栓的作用,能够减轻冠状动脉血管内皮功能障碍、炎性反应及动脉粥样硬化,减少CSF的发生。本研究中,既往合并吸烟史是影响CSF发生的独立危险因素。分析其机制,烟草烟雾中的尼古丁、一氧化氮及一氧化碳等物质能够引起血管内皮氧化应激及炎性反应损伤,血管内皮功能障碍,机体脂质代谢紊乱及血小板功能失调均会促进冠状动脉粥样硬化的进程,导致CSF的发生[21]。

综上所述, CSF患者血清Salusin-α降低,Salusin-β升高,血清Salusin-α、Salusin-β与3支冠状动脉血流帧数及平均帧数有关,有助于反映CSF病程严重程度。吸烟史、Salusin-β高是影响CSF发生的独立危险因素,血白蛋白高、Salusin-α高是影响CSF发生的独立保护因素。血清Salusin-α、Salusin-β联合检测对CSF的发生具有较高的诊断效能。本研究也存在局限,未能对治疗过程中血清Salusin-α、Salusin-β的动态变化进行监测,两者的动态变化能否有效反映CSF患者冠状动脉血流灌注的变化情况,均有待今后进行深入的基础和临床研究。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

王宇:设计研究方案,实施研究过程,论文撰写;赵平:提出研究思路,论文审核;贾正培:实施研究过程,资料搜集整理,论文修改;陈华:进行统计学分析