碱水解法测定乳粉中脂肪能力验证的分析与研究

孙路明，邢雪岩，刘君，王璐，杨滨银

阿克苏地区疾病预防控制中心（阿克苏 843000）

能力验证是每个有资质实验室都必须面对的，能力验证考核的通过，即代表着实验室拥有出具合法有效检验检测报告的能力，又是对实验室运行质量控制体系建设和检测机构的一种认可。因此，能力验证对于每个检测机构都有着十分重要的意义。文章以顺利通过食品检测能力验证乳粉中的脂肪检测项目为基础，总结了以下实践经验。

1 考核前的准备工作

1.1 检测方法的确定

依据能力验证作业指导书，一般使用推荐方法开展实验，如果实验室条件不满足推荐方法，也可结合本实验室的条件选择适用的方法同时向考核单位报备。此次试验选用推荐方法GB 5009.6—2016第三法碱水解法测定乳及乳制品、婴幼儿配方食品中脂肪。

1.2 人员的准备

参加能力验证对人员有一定的要求，应该选择熟识该项目且经验丰富、具有上岗证的在编人员；实验人员的技术水平直接影响到检测结果的准确度。做能力验证实验应该至少有2人协同完成，了解实验操作的原理和注意事项；了解试剂的化学性质；实验人员要调整好心态，既不能敷衍了事，也不能过度紧张，认真、客观对待实验。实验的主要和关键步骤应由同一人操作，尤其是样品检测过程中的称量，加样、抽提等过程一定要同一个人操作，不要中途换人操作。

1.3 仪器和设备的准备

碱水解法测定乳粉中脂肪需要用到的仪器和设备必须经过严格的验证和校准且在检定效期内，确保实验数据的准确性和可靠性，为保证实验的顺利开展，前期一定做好仪器的维护和保养，确保仪器正常使用。在实验开始前可以提前做个预实验，提前了解实验过程的关键步骤，熟悉仪器的性能。此次实验需要准备万分之一分析天平、离心机、电热鼓风干燥箱、恒温水浴锅、干燥器、抽脂瓶等。实验中用到的各种容器需确保干净无污染，以免影响实验结果。

1.4 质控样品和试剂的准备

质控样品是一种已经确定了具有一个或多个足够均匀的特性值的物质，是开展分析实验的量具，它在整个实验过程的质量控制中起着不可或缺的作用。开展实验前需提前购买与考核样品品种一致、附有证书的质控——乳粉中的脂肪的标准样品，最好选择国家计量院生产的。此次实验选用LGC质量控制样品，批号202211-02，有效期到2023年12月31日，指示值18.5 g/100 g，质量控制范围17.4～19.6 g/100 g。其他试剂乙醚、石油醚、刚果红尽量使用高纯度的，降低对实验影响。

2 试验过程中的关键点

试验关键步骤要做到每一步有记录，每一个操作要有一致性。碱溶解过程：样品称取前要混合均匀，称好的奶粉转移时，尽量不要散落在抽脂瓶瓶壁上，如若有少量散落，可以少量多次用40～60 ℃的温水冲洗，总量不超过10 mL，加2 mL氨水充分混合后立即将抽脂瓶放入可以盖过样本混合液的水浴中，不时取出水平振荡抽脂瓶，竖直静置。抽提过程：乙醇应在碱溶解过程后加入，不可颠倒顺序，加入刚果红溶液，形成明显界限（如图1所示），水平振摇，避免液体太接近瓶颈发生溢撒。冷却后小心打开瓶塞，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈，萃取静置至少30 min，直到上层液澄清，并明显与水相分离。按标准要求再进行两次抽提，同时做空白实验。每次抽提严格按照标准上操作示意图位置进行（如图2所示）。碱水解法提取脂肪时如果出现乳化现象（如图3左图所示），一般发生在第二遍或第三遍，静置一段时间，先把没有乳化部分的有机溶剂提取至脂肪接收瓶中，然后在乳化层加入乙醇溶剂，乳化层会很快能够分离出水层和有机层。称量：提前恒重吸收瓶，并在吸收瓶中放入沸石防止爆沸，水浴上蒸发至干。

图1 加入刚果红溶液抽提后示意图

图2 抽提操作示意图

图3 未加刚果红抽提后示意图

3 结果提交前的注意事项

1) 利用好作业指导书。作业指导书中有详细的步骤和要求，越是关键时候越是需要细心、耐心，忙而不乱，规划好实验过程中各部分所需的时间。

2) 结合质控，对上报数据进行验证，好的质控结果可以让自己的检测结果有着明确的对照，根据质控更加准确地推导出考核样的准确值，选择最靠近的检测结果上报。

3) 根据上报截止日期，做好时间规划。实验时间和上报数据的时间要预留充分，必要时可加班完成，第一时间开展实验，同时建议至少做双平行以上的实验，有需要可重复进行。对纸质材料进行整理归档。规定时间内上报最准确的结果，寄出纸质材料。

4 结果与分析

文章采用碱水解法对能力验证样品中脂肪进行检测，检测能力评价结果见表1和表2。|Z|＜2.0能力验证试验取得了满意的结果，其中低值样品偏离度仅为0.21，说明采用以上实验方法概括的关键点对于整个实验起到了推动作用，本法有着较好的适用性、准确性；对于人员的控制见表1，人员A、B分别为参加培训且有上岗证和没经验的新进人员，数据显示人员A无论是精密度还是准确度都明显高于人员B，实验人员的技术水平直接影响实验结果的准确性，在整个实验过程中发挥着举足轻重的作用。参加考核能力验证的检测机构想要取得优秀的考核成绩不仅需要物资等各方面的准备，更需要积极培养专业技术人员。唯有重视实验工作，加强日常大练兵多动手，严格按照标准操作，做好质控等各项关键要素质量控制，才能在遇到实验室能力验证等各项考核的时候更加得心应手。

表1 考核样的结果

表2 考核样的检测能力评价结果

5 结论

文章总结概括了用碱水解法测定乳粉中脂肪，顺利通过食品检测能力验证所需要注意的考核前准备和实验操作中的关键步骤，为碱水解法测定乳粉中脂肪能力验证工作提供参考。