血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21 对冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄的预测价值

彭红建 田香勤 贾国立

随着医学技术的进步，经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention，PCI）成为治疗冠心病（coronary heart disease，CHD）的主要非药物方法之一，PCI 可有效改善冠状动脉阻塞，恢复心肌血液流动挽救患者心肌组织损伤，但受患者自身因素、疾病病变程度等的影响，仍有术后支架内再狭窄（in-stent restenosis，ISR）问题的存在［1］。有文献报道［2］，CHD 患者行PCI 术治疗后术后支架内再狭窄（in-stent restenosis，ISR）的出现率为15%～30%，致使支架植入无效，对患者预后产生不良影响。因此，了解引起患者PCI 术后发生ISR 的影响因素，并寻找可以预测其发生的敏感指标，对于预防及尽早治疗ISR 具有积极作用。成纤维细胞生长因子21（fibroblast growth factors-21，FGF21）是一种内分泌因子，有研究指出［3］，其水平不断上升会对心血管系统产生影响，加重动脉粥样硬化进程。分泌型卷曲蛋白5（secreted frizzled related protein 5，Sfrp5）在脂肪组织中分泌产生，主要通过与无翅型MMTV 整合位点家族成员5A 结合发挥抑制炎症及动脉粥样硬化的作用［4］。微小RNA（microRNAs，miRNA）在心肌细胞发育、分化、凋亡、心脏重塑等过程中具有重要作用，miRNA-21 作为miRNA 家族的一员，已有研究证实［5］，其水平上升，可以加速心肌纤维化进程，加重患者心功能损伤程度。本研究通过检测CHD 患者术前血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 水平，探讨对患者PCI 术后ISR 发生的预测价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择商水县人民医院在2021 年1 月至2022年9 月间行PCI 手术治疗的CHD 患者218 例为CHD 组，选取同期非心血管疾病的住院患者97 例为对照组，CHD 组中，男122 例，女96 例，年龄平均（62.47±5.82）岁；对照组中，男54 例，女43 例，年龄平均（61.14±6.37）岁。纳入标准：①CHD 诊断符合《稳定性冠心病基层诊疗指南（2020 年）》［6］中相关标准；②符合手术指征，并首次进行PCI 手术治疗；③依从性好，配合随访；④所有受试对象均已签署知情同意书。排除标准：①临床基本资料不全；②合并感染性、血液系统或免疫系统疾病；③合并恶性肿瘤；④合并肝肾功能异常。本研究经过商水县人民医院医学委员伦理会审批后开展。

1.2 ISR 判定方法及CHD 患者分组

患者于术后6 个月后来院进行复查时，以冠脉造影术检查显示置入支架内或支架边缘远近端各5 mm 内管腔狭窄≥50%判定为ISR［7］。根据术后是否发生ISR 为分ISR 组（n=56）及无ISR 组（n=162）。

1.3 实验室指标检测方法

对照组在入院未接受治疗前，CHD 组在进行PCI 手术前采集空腹静脉血6 mL，离心（9 000 r/min，10 min，离心半径：12.8 cm）分离后，取上层血清，并置于-80℃的环境下储存待检。采用酶联免疫吸附法检测FGF21 及Sfrp5 水平，试剂盒分别由上海信裕生物科技有限公司及上海泽叶生物科技有限公司提供；采用ABI7500 型实时荧光定量PCR 检测仪检测miRNA-21 表达，U6 为内参，采用2-ΔΔCt法计算miRNA-21 的相对表达量；采用由上海非利加实业有限公司提供的CS-6400 型全自动生化分析仪检测血脂指标［总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）］。

1.4 统计学方法

运用SPSS 24.0 统计学软件进行数据分析。计量资料以（）表示，比较采用t检验；计数资料以n（%）表示，比较采用χ2检验；采用多因素Logistic 回归模型分析CHD 患者行PCI 手术后发生ISR 的影响因素；采用ROC 曲线分析FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 对CHD 患者行PCI 手术后发生ISR 的预测价值；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 比较

CHD 组FGF21、miRNA-21 均高于 对照组，Sfrp5 水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 水平比较（）Table 1 Comparison of serum FGF21，Sfrp5 and miRNA-21 levels between 2 groups（）

表1 两组血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 水平比较（）Table 1 Comparison of serum FGF21，Sfrp5 and miRNA-21 levels between 2 groups（）

2.2 CHD 患者行PCI 手术后影响ISR 发生的单因素分析

ISR 组低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、FGF21、miRNA-21 水平均高于无ISR 组，Sfrp5 水平低于无ISR 组，差异有统计学意义（P＜0.05），ISR 组吸烟、合并糖尿病比率高于无ISR 组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 CHD 患者行PCI 手术后影响ISR 发生的单因素分析［（），n（%）］Table 2 Univariate analysis of influencing factors of ISR after PCI in patients with CHD［（），n（%）］

表2 CHD 患者行PCI 手术后影响ISR 发生的单因素分析［（），n（%）］Table 2 Univariate analysis of influencing factors of ISR after PCI in patients with CHD［（），n（%）］

2.3 CHD 患者行PCI 手术后影响ISR 发生的多因素Logistic 回归分析

结果显示，LDL-C、合并糖尿病、FGF21、Sfrp5、miRNA-21 是CHD 患者行PCI 手术后发生ISR 的影响因素（P＜0.05）。见表3。

表3 CHD 患者行PCI 手术后影响ISR 发生的多因素Logistic 回归分析Table 3 Multivariate Logistic regression analysis of ISR in CHD patients after PCI

2.4 FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 单独及联合检测对CHD 患者行PCI 手术后发生ISR 的预测价值

ROC 曲线结果显示，FGF21、Sfrp5、miRNA-21三者联合检测预测的AUC 为0.905，高于单一检测（P＜0.05）。见表4、图1。

图1 ROC 曲线Figure 1 ROC curve

表4 FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 单独及联合检测对CHD患者行PCI 手术后发生ISR 的预测价值Table 4 The predictive value of single and combined detection of FGF21，Sfrp5 and miRNA-21 for ISR after PCI in CHD patients

3 讨论

CHD 是一种常见的心血管疾病，其主要特点是冠状动脉供血不足导致心绞痛、心肌坏死等症状的发生［8］。PCI 是目前临床公认治疗CHD 的有效方式，具有微创性、恢复时间短、改善血液流通等优点，但PCI 治疗会对动脉壁造成损伤，致使内膜增生、炎症及形成血栓，从而引起血管壁血管重塑及形成新内膜，最终导致术后ISR 的发生，严重降低患者术后生存率［9］。目前临床上诊断ISR 的金标准为冠状动脉造影术，但其具有侵入性，且通过造影检查确诊ISR 时，患者已错失最佳治疗时机［10］。

FGF21 是FGF 内分泌亚家族的一员，主要在肝脏中分泌产生，能够通过调节脂质代谢、改善胰岛素敏感性以及减轻血管内皮炎症等方式，发挥对心血管系统的保护作用［11］。徐红新等［12］研究发现，CHD 患者FGF21 水平偏高，与本研究中的CHD 组FGF21 高于对照组结果一致。其原因可能为在CHD 疾病发展过程中，FGF21 水平作为血管损伤的一种代偿保护机制而上升。Sfrp5 是由白色脂肪产生的抗炎脂肪因子，其主要通过抑制Wnt5通路激活来减轻炎症及保护心脏损伤。本研究结果显示，CHD 组患者Sfrp5 水平低于对照组，与王康等［13］研究结果不尽相同。究其原因，低表达的Sfrp5 水平表明机体存在心血管系统的损伤，因此CHD 患者Sfrp5 水平表达低于健康人群。miRNA是一种微型非编码RNA 片段，参与多种生理病理过程。miRNA-21 是最早发现的miRNA 之一，参与内皮细胞分化、迁移及血管的生成。已有研究证实［14］，miRNA-21 水平在CHD 患者中呈现高表达状态，可以作为心肌损伤的生物标志物。本研究结果中，CHD 组miRNA-21 高于对照组，与上述研究结果相符。

本研究结果显示，LDL-C 及合并糖尿病亦是CHD 患者行PCI 手术后发生ISR 的影响因素，与崔新月等［15］研究结果相似。其原因可能为：LDL-C水平升高会导致血管内皮结构及功能破坏，引起炎症反应［16］；糖尿病患者可能存在炎症反应增强、胰岛素抵抗、血流动力学改变、病变复杂化以及病理生理反应异常，这些因素共同影响动脉内皮修复过程，导致ISR 风险增高。

ROC 曲线结果表明上述指标对于预测患者PCI 术后发生ISR 均有较好的应用价值。推测其原因为，FGF21 是一种具有胰岛素样功能的因子，可以通过激活激酶1/2 及蛋白激酶B 的信号通路，增加脂肪细胞对脂质的摄取和血液中葡萄糖的再利用，其在体内的水平越高说明机体的脂肪和糖代谢失调越严重［17］，高水平的FGF21 表明患者存在代谢紊乱现象，因而动脉粥样硬化及ISR 风险增加。Sfrp5 具有抑制Wnt 信号通路的功能，CHD 患者Sfrp5 水平降低表明Wnt 信号通路的活性增加，促进了异常血管内膜增生和炎症反应发生，因此患者发生ISR 风险增加。miRNA-21 可以通过靶向SPRY1 基因来调控血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的增殖和迁移，高水平的miRNA-21 表达可能反映患者存在VSMC 的异常活化，这是ISR 的主要病理过程［18］。同时，三者联合检测的AUC 为0.905，高于单一检测，说明三者联合检测可以相互补充，减少其他ISR 发生影响因素的干预，从而提高对ISR 的预测效能。

综上所述，血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21 在行PCI 手术后发生ISR 的CHD 患者中表达异常，联合检测三者水平对于预测CHD 患者PCI 术后发生ISR 具有较好的应用价值。临床可密切关注患者上述指标水平变化，以及时对ISR 的发生进行干预及治疗。