陈大兴
(首都医科大学中心实验室,北京 100069)
JEM-2100透射电镜由日本电子株式会社制造,放大倍数可达数百万倍,是观察微观结构的常用设备,我校于2010年购买了一台。经过对仪器10多年的使用,发现拍摄清晰的照片需要对像散认真调整,使其尽量减少对照片的影响。像散是由透镜磁场的非旋转对称引起的像差,由于发光物点不在光学系统的光轴上,它所发出的光束与光轴有一倾斜角。该光束经透镜折射后,光束不能聚焦于一点,成像不清晰,故产生像散。由于像散是难以消除的,只能尽量减少,而且像散调节需要按照一定的步骤和要求进行,本文总结对像散调节的基本方法和要求进行了总结。
将电镜倍数设为40K,调节BRIGHTNESS 旋钮使电子束缩小到尽可能小。按下面板上的F4 键(DEFLECTIOR GUN),SPOT SIZE 设为1,即TEM1-3,调整SHIFT(X,Y)将电子束移动到荧光屏中心。再按下F1(BRIGHT TILT),SPOT SIZE 设为5,即TEM5-3,调整面板上的SHIFT(X,Y),将电子束移到中心。反复调整,使TEM1-3 和TEM5-3 的电子束都在荧光屏中心,完成TEM1-3 和TEM5-3 的合轴。在合轴后效果不好的情况下,可先进行TEM1-3 和TEM2-3合轴,然后再做TEM1-3 和TEM5-3合轴,spot1 的对中是通过电子枪的平移调整,而spot2的对中则是通过平移电子束来调整(如图1所示)。
图1 操作面板
同样将将电镜倍数设为40K,打开 Alignment Panel for Maintenance 窗口(如图2所示),利用BRIGHTNESS旋钮调节聚焦电子束,点击TILT 按钮,利用 SHIFT(X,Y)旋钮将电子束移到中心。做X 方向的联动比调整:点击Compensator中的Tilt和Wobbler中的TiltX,此后电子束来回晃动,调整面板DEF(X),使晃动最小,用SHIFT(X)将电子束调回中心,点击 TiltX 关闭,用同样的方法做 Y 方向的联动比调整。如果一次调整不能使晃动最小,还需要多进行几次联动比调整。
图2 联动比调整窗口
放大倍数放在40K以上,最好是在拍照时所使用的放大倍数。找到目标物并放大,将目标物移动到荧光屏中心,同时电子束也移到荧光屏中心,电子束散开,略小于荧光屏。按下 HT WOBB 按钮,再按下BRIGHT TILT,调整 DEF(X,Y),使目标物与中心黑点位置相对应,不向左摆动也不向右摆动,与荧光屏中心黑点同心圆收缩,调整完毕后关闭按钮(如图1所示)[1,2]。
插入聚光镜光阑,电镜放大到40K,顺时针旋转聚光镜光阑,光阑有3个旋钮。其中两个旋钮在正面,一个在侧面。正面的两个旋钮中,较大的一个为聚光镜光阑选择旋钮,其上有白色小点和黑色小点。黑色小点与镜筒上的黑色小点相对时,光阑已退出光路。在白色小点与镜筒上的黑色小点相对时,顺时针旋转,白点由大变小表示光阑由大变小。在此旋钮上靠外有一个小一点的旋纽,该旋钮可左右移动电子束在荧光屏上的位置,侧面的旋钮负责前后的移动。若插入较小光阑,在荧光屏上未发现电子束时,可先将光阑退出光路,发现电子束后,再加入大光阑直至所需光阑(图3所示)。
图3 聚光镜光阑
调节BRIGHTNESS 旋钮,顺时针转动,使电子束缩小到尽可能小,调节SHIFT 旋钮使电子束位于中心,然后将电子束散开,调节BRIGHTNESS旋钮,使电子束与荧光屏同心收缩。聚光镜有像散的表现是光束为调节BRIGHTNESS旋钮后,电子束形状变为椭圆并产生明显的正交现象,此时按下COND STIG按钮,调整DEF(X,Y)使光束变圆,消除聚光镜像散(图4所示)。
图4 聚光镜像散调整
插入物镜光阑,电镜放大到40K,物镜光阑与聚光镜光阑相似,因此插入所需光阑与聚光镜光阑相似(如图3所示)。在MAG 模式下,调节 BRIGHTNESS旋钮使电子束近荧光屏大小。切换到DIFF模式下,调节 DIFF FOCUS 旋钮获得透射斑。如不在中心,可以按下 PLA 按钮,利用 DEF(X)和 DEF (Y)把衍射光斑移到中心位置,移到中心后,关闭 PLA 按钮。
MAG 模式下,放大倍数放置在 10K,选择一个合适的区域,例如铜网的非晶碳膜区域,调节BRIGHTNESS 旋钮优化图像亮度。按下 BRIGHT TILT 按钮,用 Shift (X,Y)将电子束调到中心。利用OBJ FOCUS 旋钮调节图像,图像包含过焦、欠焦、正焦3种状态,按下 OBJ STIG 按钮,调节 OBJ FOCUS旋钮使菲涅尔条纹出现。如果有像散,菲涅尔条纹是不对称的,调节 DEF(X,Y)使菲涅尔条纹对称。菲涅耳条纹是由于两只波的干涉产生的,理论基础就是惠更斯-菲涅耳原理。菲涅耳条纹的宽度,与物镜的聚焦状态有关。欠焦时,菲涅耳条纹为亮线,随着离焦量的降低菲涅耳条纹会变宽;正焦时,菲涅耳条纹消失;过焦时,菲涅耳条纹为黑线,随着离焦量的增加菲涅耳条纹会变宽。调节菲涅尔条纹对称应该在过焦时调节,因为此时的菲涅尔条纹更宽,更容易调节(如图5所示)。
图5 低倍下物镜消像散
只有在低倍下物镜消像散完成后才可以进行高倍下物镜消像散,此时选择在MAG 模式下,放大倍数放置在至少 100K,选择一个合适的样品区域,把样品放在中央。这时可以利用FFT消像散。操作步骤是:左手按住键盘Alt键,右手按住鼠标左键下拉出现方框,然后点击菜单栏Process,选择其中Live中的FFT选项,此时按下OBJ STIG按钮,调整DEF(X,Y)图像清晰。在调整过程中发现FFT图像由双曲线形变成椭圆形,最后变成圆形,此时发现实时观察图像由在同样的放大倍数下,图像由模糊变清楚,图像边缘逐渐锐利,图片质量明显提高,像散逐渐消除(如图6所示)[3-5]。
图6 高倍下物镜FFT消像散
消像散需要按照一定的方法和步骤进行。首先进行准备工作,进行光路合轴,然后进行TILT 联动比调整,最后对电压中心进行调整。然后对聚光镜进行消像散,插入聚光镜及调节光路,调整至光束变圆,消除聚光镜像散。最后对物镜消像散,插入物镜及调节光路后,先进行低倍下物镜消像散,目标是菲涅尔条纹对称。调节完低倍后可以进行高倍调节,使用FFT消像散,直到FFT图像变成圆形。总之,电镜像散调节是一个复杂的过程,需要耐心按步骤操作,这样才能拍出满意的照片。