强直性脊柱炎患者炎性指标的临床意义

刘德军, 罗伟光

(河南省人民医院检验科 郑州大学人民医院,郑州 450003)

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种慢性炎性自身免疫性疾病,主要影响脊柱关节、骶髂关节及关节附件组织[1]。在病情持续发展的情况下,持续慢性炎症引起关节组织纤维化和钙化,进而导致关节强直及融合。AS的主要临床表现包括腰背痛和进行性脊柱僵硬,发病后期典型表现为骶髂关节破坏,脊柱呈“竹节样”改变[2-3]。AS发病隐匿,早期症状不典型,因此早期诊断对AS的治疗和预后具有重要意义。AS的病因复杂,目前有研究[4]表明,与遗传背景,免疫反应,微生物感染和内环境稳态都有密切的关系。主要的组织相容性复合体(MHC)I类等位基因人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)B27(HLA-B27)是最早报道与AS相关的等位基因,尽管发病机制尚不清楚,但HLA-B27与AS患病密切相关[5]。有研究[6]表明,90%～95%的AS患者HLA-B27为阳性。C反应蛋白(CRP)、抗链球菌溶血素O(ASO)、类风湿因子(RF)及红细胞沉降率(ESR)是临床常见的免疫炎症诊断指标。本研究回顾性分析AS患者的HLA-B27 核酸及炎症指标(CRP、ASO、RF及ESR)水平,探究其在AS早期诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.2 方法

1.2.1 HLA-B27核酸检测 一次性无菌EDTA抗凝管采集静脉血2 mL,使用默乐生物技术有限公司人类HLA-B27 核酸检测试剂盒进行外周血DNA提取及HLA-B27检测。扩增参数:95 ℃ 2 min,循环1 次;94 ℃ 10 s,59℃ 45 s,循环40次。结果使用ABI7500 型实时荧光定量PCR 仪进行定性分析,扩增曲线CT值<40为阳性,>40为阴性。

1.2.2 CRP、ASO、RF检测 所有研究对象均抽取空腹外周静脉血3 mL,分离血清后由罗氏诊断公司生产的CRP、ASO、RF定量试剂盒在COBAS C701 模块生化分析仪中进行检测,其参考范围分别为:ASO 17.2～243.7 IU·mL-1, RF 0～20 IU·mL-1, CRP 0～10 mg·L-1。

1.2.3 ESR检测 采集静脉血2 mL,注入枸橼酸钠抗凝红细胞沉降率(ESR)管,用于检测ESR 值,其参考范围为:50岁以下,女性0～34 mm·h-1,男性0～20 mm·h-1;50岁以上,女性0～40 mm·h-1,男性0～28 mm·h-1。

2 结果

表1 2组研究参与者HLA-B27阳性率比较(n)

2.2 2组研究参与者CRP、ASO、RF、 ESR水平比较 AS组CRP及ESR水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。2组研究参与者ASO和RF水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 2组研究参与者CRP、ASO、RF、ESR水平比较

2.3 HLA-B27、CRP和ESR在AS中的诊断价值分析 以AS作为阳性诊断绘制ROC曲线(图1-2)。HLA-B27对AS的诊断灵敏度为93.02%,特异度为94.45%,曲线下面积(AUC)为0.937(95%CI:0.890～0.985,P=0.006);CRP对AS的诊断cut off值为5.473 mg·L-1,其灵敏度为75.68%,特异度为83.34%,AUC为0.898(95%CI:0.849～0.948);ESR对AS的诊断cut off值为15.5 mm·h-1,其灵敏度为75.58%,特异度为98.01%,AUC为0.837(95%CI:0.772～0.903); 3者联合诊断AS的灵敏度为97.67%,特异度为94.46%,AUC为0.99(95%CI:0.978～1.000)。见表3。

图1 HLA-B27、CRP和ESR诊断AS的ROC曲线

图2 CRP、ESR和三者联合的ROC曲线坐标图

表3 HLA-B27、CRP和ESR在AS中的诊断价值分析

3 讨论

AS是一种由众多因素导致的自身免疫性疾病,主要以脊柱关节炎和骶髂关节炎为特征,可引起关节疼痛及僵硬,导致关节破坏和融合,严重者影响患者的生存质量[7],因此早期明确诊断具有重要意义。HLA-B27是一种I类MHC分子,在所有核细胞和血小板上均有表达,其功能是向细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表面的T细胞受体(TCR)呈递抗原表位,还能与自然杀伤细胞、粒细胞表面受体结合,参与多种炎症反应,是AS易感的重要基因[8]。以往研究[9]结果表明,HLA-B27在AS患者的阳性率大于90%,而在正常健康人群中的阳性率为3%～5%,是临床AS诊断的重要实验室指标。在本研究中,AS患者的HLA-B27阳性率为90.1%,正常人群中AS的阳性率为6%,与以往研究[10-11]报道结果一致。进一步分析发现,HLA-B27对AS的诊断灵敏度和特异度分别为93.02%和94.45%。虽然AS患者中HLA-B27的阳性率较高,但尚未作为AS诊断的标准,因此联合炎症指标有利于AS的准确诊断。

CRP是一种肝脏合成的非特异性急性时相反应蛋白,具有激活补体并促进细胞吞噬的功能。当机体出现组织损伤、病原菌感染或自身免疫性炎症时CRP会明显升高[12]。CRP的水平变化常常较症状提早出现,其水平升高则预示着机体存在炎症反应。在本研究中CRP在AS组的水平高于对照组,在cut off值为5.473 mg·L-1时,对AS的诊断效能最大,其敏感度和特异度分别为75.68%和83.34%。ESR的水平变化与炎症和组织损伤相关[13]。本研究结果表明,AS患者组中的ESR 水平高于对照组,在cut off值为15.5 mm·h-1时,对AS的诊断效能最大,其敏感度和特异度分别为75.58%和98.01%。以上研究结果表明,CRP 能反映AS 患者体内的炎症反应,与黄艺虹[14]研究结果相一致。AS患者中存在不同程度的炎症反应,CRP和ESR的水平能够反映机体中的炎症程度,因此可作为AS患者炎症反应的筛查指标。

HLA-B27是AS的易感基因,但是HLA-B27阳性人群不一定患病,CRP、ESR水平的变化可以作为炎症反应程度的指标, CRP、ESR 与HLA-B27联合检测对AS 的诊断效能更高,可以用于辅助AS的早期诊断,有益于AS的早期治疗。