规模牛场牛病毒性腹泻-黏膜病流行病学调查

邓毅民，蔺文龙，林为民*，黄新，史文军

1.新疆生产建设兵团第八师143团农业发展服务中心，新疆石河子 832000；

2.新疆生产建设兵团第八师畜牧兽医工作站，新疆石河子 832000；

3.新疆农垦科学院，新疆石河子 832000

新疆师市养殖奶牛的历史可追溯至上世纪60年代，直至2009年未见关于牛病毒性腹泻（BVD）的相关报道；2002 年，师市分6 个批次从澳大利亚进口16 673 头荷斯坦黑白花奶牛，均由北京市进出口检疫检验局检疫合格（牛病毒性腹泻病毒等7 种病毒检测均为阴性），指定隔离场隔离45 d 后运回师市。截至目前，师市发展到1 700 头以上的奶牛场19 个；2016 年之后，有1 个牛场使用挪威红牛冻精×荷斯坦奶牛，培育出挪荷牛1 273 头；有2 个牛场使用弗莱维赫乳肉兼用牛冻精×荷斯坦奶牛，培育出弗荷牛1 452 头；分别与本场荷斯坦奶牛分群饲养。目前，师市饲养有荷斯坦奶牛、挪荷乳肉兼用牛和弗荷乳肉兼用牛等3个品系的产奶牛。

李佑民等[1]于1983 年首次在我国吉林省发现了输入性牛病毒性腹泻病例，并成功分离鉴定牛病毒性腹泻病毒（BVDV）毒株；2009 年，李娜等[2]首次在师市分离到BVDV。近几年，笔者在工作中也经常接到部分规模牛场3个品系的牛均发现“早产、流产、死胎和犊牛腹泻”等临床症状的报告，严重腹泻还能引起犊牛死亡[3-5]，给师市奶牛养殖造成重大危害。为掌握牛病毒性腹泻/黏膜病在师市的感染状况，以及不同品系间BVDV 感染是否存在差异，笔者所在课题组对师市范围的19 个未免疫BVDV 疫苗的牛场，采集不同生长阶段牛的血样，进行牛病毒性腹泻/黏膜病毒（BVD-MD）病原和抗体的检测，以期掌握BVDV 在师市牛场中的感染状况，为师市防控BVD提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 样品来源

以预期流行率抽样原则，3 个品系的犊牛、青年牛、后备牛和成母牛分别采用分阶段抽样原则。第一阶段，采取普查的方法，19 个规模牛场全部作为抽样单元；第二阶段，抽样场内按照95%置信水平(CI)、10%可接受误差、50%预期流行率进行抽样。共采集血清样品7 965 份，其中：荷牛血清5 952 份，弗荷牛1 037 份，挪荷牛976 份，血清－20 ℃保存备用，详见表1。样品的免疫情况：17 个牛场免疫疫苗，2个牛场未免疫疫苗。

表1 3个品系牛血清样品采集情况 份

1.2 检测试剂

牛病毒性腹泻（BVD）实时荧光RT-PCR 检测试剂盒（批号：BVDV20220802P），购于哈尔滨元亨生物药业有限公司；牛病毒性腹泻ELISA 检测试剂盒（批号：2109001），购于青岛瑞尔生物技术有限公司。

1.3 检测方法

试验由新疆农垦科学院兽医研究所进行BVDV 抗原、抗体的检测，BVDV 抗原、抗体检测均按照检测试剂盒说明书的操作方法和判断标准执行。

1.4 数据处理

对试验数据采用Excel 软件进行整理和制图，并将其按照不同年龄段、不同品系等进行统计，利用χ2检验法进行差异性比较。

2 结果与分析

2.1 BVDV抗原检测情况

由表2 可知：共检测血清样品7 965 头份，阳性样品检出137 头份，BVDV 阳性总检出率为1.72%。其中：荷成母牛血清样品检出率最高，为3.70%，弗荷犊牛血清样品检出率最低，为0.49%；3 个品系间牛血清样品总检出率差异不显著，说明不同品系牛之间不影响BVDV 的流行；3个品系青年牛、后备牛和成母牛BVDV 阳性率显著高于犊牛，这可能由于犊牛单独饲喂、与其他牛只接触机会少和生长时间短的原因，或者是成年牛在怀孕期间感染BVDV,导致该病毒在幼牛体内建立免疫耐受或者持续感染有关。

2.2 BVDV抗体检测情况

由表3 可知：共检测血清样品7 965 头份，抗体阳性样品检出5 272 头份，抗体阳性总检出率为66.19%。其中：荷成母牛血清样品抗体检出率最高，为89.66%，挪荷犊牛血清样品抗体检出率最低，为39.37%；3 个品系牛间血清样品抗体平均检出率差异不显著，也表明抗体阳性率高低不因品系不同而存在差异；3 个品系青年牛、后备牛和成母牛BVDV 抗体阳性率显著高于犊牛，这可能与犊牛单独饲喂、与其他牛只接触机会少和生活时间短有关。

表3 3个品系牛血清样品BVDV抗体检测结果统计

2.3 BVDV抗原/抗体场群阳性统计情况

检测19 个牛场的血清样品，13 个牛场BVDV抗原显示阳性，场群抗原阳性率为68.42%；BVDV抗原阳性最高的牛场检出率为2.44%，BVDV 抗原阳性最低的牛场检出率为0.37%。19个牛场BVDV抗体显示阳性，场群抗体阳性率为100%；BVDV 抗体阳性最高的牛场检出率为53.73%，BVDV 抗体阳性最低的牛场检出率为23.29%。

3 讨 论

Ran 等[6]调查发现，全世界牛血清流行率为11.1%～100%；李娜等[2]对新疆石河子地区BVDV 的分子流行病学调查结果显示，BVDV 抗原阳性率为39.06%；王晨豫等[7]调查结果显示，BVDV 抗原阳性率为1.63%；王龙等[8]调查结果显示，BVDV 抗原阳性率为3.71%；张宇名等[9]调查结果显示，BVDV 抗原阳性率为1.94%。本试验数据结果显示，师市BVDV 的血清抗原阳性率为1.72%，其中：荷牛抗原阳性率为1.73%，弗荷牛抗原阳性率为1.35%，挪荷牛抗原阳性率为2.05%；相较于新疆境内其他地区和山东部分地区，师市BVDV 的抗原阳性率暂处于较低水平，这与近3 年师市加强BVD“检疫–清除–检疫–清除”等净化措施的落实密切相关，需要在后面的工作中继续强化。