中药复方制剂对鸡腺胃炎的治疗效果评价及机制研究

韩振兴，任庆贤，孙书旺，牛红日，铁小东

（石家庄牧安生物科技有限公司，河北石家庄 050000）

1 前言

近年来，鸡腺胃炎在我国多个地区流行，给养鸡业造成严重损失。发生腺胃炎的鸡只症状为采食量减少，生长发育缓慢，粪便中有未消化的饲料等，剖检可见腺胃肿胀，严重时腺胃浆膜出现白色坏死，胃壁增厚，腺胃乳头肿胀出血，腺胃黏膜呈现糜烂性溃疡等。多种因素可以导致鸡腺胃炎，主要包括非传染性因素和传染性因素，前者主要包括霉菌毒素致病、生物胺致病、硫酸铜致病和饲养环境应激导致的发病等因素；后者则包括传染性支气管炎病毒、禽网状内皮增殖症病毒、圆圈病毒III 型等，此外还包括与鸡腺胃炎密切相关的沙门氏菌、大肠杆菌和梭状芽孢杆菌等。

针对鸡腺胃炎通常采用抗病毒药物与阿莫西林、青霉素等抗微生物药物联合用药的治疗方案。然而，抗微生物药物的使用容易导致细菌耐药性的产生，给动物疾病治疗以及公共卫生造成威胁。传统中药具有天然性、功能多样性以及经济环保等优势，研究表明，某些中药复方对可改善腺胃炎鸡只的肌胃、腺胃的形态，提高了血清中的免疫球蛋白的含量，还能提高肉鸡生产性能等；使用板清颗粒等药物对腺胃炎具有一定的治疗效果。以上研究提示，中药可成为治疗鸡腺胃炎的潜在治疗方案。

本研究采用脂多糖作为刺激物构建鸡腺胃炎模型，评价中药复方对鸡腺胃炎的治疗效果，筛选具有良好治疗效果的中药组方，为鸡腺胃炎的防治提供理论依据。

2 试验方法

2.1 中药组方药液的制备

中药组方包括半夏、大黄、龙胆、木香、枳实等五味中药。将上述中药采用水提法工艺制备提取液，按照比例称取定量的中药，加入蒸馏水浸泡煎煮2 次。第一次加入8 倍量蒸馏水浸泡1小时后，煎煮1 小时，滤过保留滤渣；第二次向滤渣中加入6 倍量的蒸馏水，煎煮0.5 小时，过滤去除滤渣。合并两次滤液后，使用旋转蒸发仪将药液浓缩至1 克/毫升。

2.2 鸡腺胃炎模型的建立

本研究采用100 只1 日龄海兰褐雏鸡作为试验对象，购买于北京梅里亚维通实验动物技术有限公司，试验过程中，SPF 雏鸡的饲养管理严格按照实验动物用途与福利指南进行。

100 只健康海兰褐鸡饲养至5 日龄，随机分为5 个试验组，每组20 只，分别为空白对照组、模型组（5 微克/只LPS）、低剂量组（5 微克/只LPS+1 毫升/千克中药复方制剂）、中剂量组（5 微克/只LPS+4 毫升/千克中药复方制剂）和高剂量组（5 微克/只LPS+8 毫升/千克中药复方制剂）。连续给药5 天采用灌胃给予中药复方制剂，停药观察5 天，将鸡进行安乐死并收集腺胃等组织并检测相关指标。

2.3 鸡采食量和体重的测定

观察并记录鸡只的采食量和体重等指标，分别在1、5、10 和15 日龄每组随机取5 只鸡空腹12 小时后称重，并记录日供料量和剩余料量。

2.4 腺胃指数和肌胃指数的测定

试验结束后取鸡的肌胃和腺胃，计算脏器系数。计算公式：脏器系数（%）=脏器质量（克）/体重（克）。

2.5 腺胃中前列腺素E2（PGE2）的检测

定量称取腺胃组织，制备10%组织匀浆，离心取上清液，根据说明书采用PGE2 测试盒（南京建成生物工程研究所，南京） 测定腺胃中的PGE2，酶标仪测定OD450nm 值。

2.6 腺胃中总超氧化物歧化酶（SOD）检测

定量称取腺胃组织，制备10%组织匀浆，离心取上清液，根据说明书采用SOD 测试盒（南京建成生物工程研究所，南京） 测定腺胃中的SOD，酶标仪测定OD450nm 值。

2.7 试验数据分析

使用GraphPad Prism 5.0 软件进行数据处理和分析，P＜0.05 作为在统计学上具有显著性差异的标准。

3 结果

3.1 采食量和体重测定结果

给予LPS 刺激物1 天后，空白对照组的鸡只粪便排泄正常，呈现颗粒状，模型组的鸡只出现拉稀现象。

各试验组的鸡只生产性能表现出差异。试验第5 天，各组的增重没有明显差异。试验的第10 天空白对照组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组的平均日增重分别为6.6 克、2.05克、2.98 克、4.38 克和5.45 克，中药低剂量组、中药剂量组和中药高剂量组的日增重显著高于模型组 （P＜0.05）； 料肉比分别为2.3、5.04、3.79、2.95 和2.62，中药低剂量组、中药剂量组和中药高剂量组的料肉比显著低于模型组（P＜0.05）。试验的第15 天呈现相似的结果。

3.2 腺胃指数和肌胃指数的测定结果

停药5 天后，将鸡只处死后摘取腺胃和肌胃，计算不同组别的腺胃指数和肌胃指数。模型组的腺胃指数较空白对照组显著增大（0.81vs0.684，P＜0.01），同时，使用低剂量、中剂量和高剂量的中药复方治疗后腺胃指数分别为0.78、0.74 和0.72，与模型组相比较显著降低（P＜0.05），并随着剂量的增加腺胃指数减小。同时，肌胃指数也呈现相同的趋势。

3.3 鸡腺胃组织中的PGE2 水平测定结果

试验鸡只停药5 天后，模型组的腺胃组织中的PGE2 水平较空白对照组显著下降（P＜0.01），同时，使用低剂量中药复方、中剂量中药复方和高剂量中药复方治疗的各组鸡只腺胃组织中的PGE2 不断上升，分别为119.37±16.37 皮克/毫升、127.58±27.68 皮克/毫升和138.9±29.42 皮克/毫升。

3.4 鸡腺胃组织中SOD 活性测定结果

停药5 天后，模型组鸡只的腺胃组织中SOD 活性（218.59±14.57 U/mgprot）较空白对照组（406.34±21.72 U/mgprot）显著降低（P＜0.01），同时，给予低剂量中药复方、中剂量中药复方和高剂量中药复方治疗组的腺胃组织中SOD 活性分别为301.83±29.48 U/mgprot、321.55±24.16 U/mgprot 和358.16±26.41 U/mgprot，较模型组显著增加，且腺胃组织中SOD 活性随着中药复方制剂给药量的增加而增加。

4 讨论

鸡腺胃炎是一种常见的传染性疾病，给家禽养殖业造成严重威胁。腺胃是鸡体内重要的消化器官，能够分泌胃酸和胃蛋白酶，对食物中的蛋白质类物质的分解具有重要意义。当发生腺胃炎时，胃酸和胃蛋白酶的分泌受到影响，影响饲料消化及营养物质吸收，造成鸡群出现生长发育不良、饲料消化不良等疾病。

本试验采用半夏、大黄、龙胆、木香、枳实等五味中药进行组方，测定中药组方对LPS 诱导的鸡腺胃炎的治疗效果。半夏具有调节胃肠、化淤消滞和温胃利胆的作用，用于胃部疾病和痰热导致的胃脘部胀痛以及胃溃疡等。龙胆具有保肝、健胃和抗菌消炎的作用，主要用于治疗炎症、消化不良和胃部感染等。大黄能够促进胃肠蠕动，增加胃肠部黏膜的血液循环利于胃炎及胃溃疡的恢复。木香在抗炎、抗溃疡和减轻胃肠道平滑肌痉挛等方面发挥重要的作用，研究表明，木香可以调节和改善胃蛋白酶的分泌和活性，达到保护胃黏膜的作用。枳实是一味性温味辛的重要，具有消积导滞、化瘀散痞的功效，研究表明，枳实具有杀灭幽门螺旋杆菌的作用，进而改善胃肠道功能。

在本研究中，用LPS 处理鸡只后，腺胃肿大，腺胃指数显著增加，说明经LPS 刺激后鸡的腺胃受到损伤，发生腺胃炎。此外，模型组的腺胃组织中PGE2 和SOD 水平显著降低，说明腺胃炎的发生可能跟氧化应激相关。这与王酉馨的研究结果一致，因此，在治疗鸡腺胃炎时需要考虑消除氧化应激的因素，以便提高治疗鸡腺胃炎的效果。使用中药复方制剂治疗后，治疗组的临床症状和相关指标较模型组明显缓解，表明中药复方制剂对LPS 诱导的鸡腺胃炎具有治疗作用，并且随着中药复方制剂用量的增加而呈现出治疗效果增强的现象。此外，中药复方制剂组鸡只腺胃组织中的PGE2 和SOD 的水平和活性升高，表明中药复方制剂通过抗氧化活性进而发挥对胃损伤的保护作用。