郭小江, 黄 璐, 陈元翠, 施云刚, 欧德渊*
(1. 贵州省草地技术试验推广站,贵州 贵阳 550025;2. 江安县农业农村局,四川 江安 644200;3. 贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳 550025)
随着工农业生产的快速发展,重金属污染已成为全世界日益关注的问题。环境中的重金属可通过食物链进入人体,给人类健康造成严重危害[1]。中药在防治多种疾病中发挥了重要作用,本研究采用配制的中药组方对鸡氯化汞中毒模型的红细胞、白细胞、血小板等血液指标进行分析,探讨中药防治鸡氯化汞中毒的可能性。
1.1.1 试验动物
100只平均体重(85±5)g、20日龄健康脱温铁脚麻公雏鸡,购于贵阳市花溪区某禽苗批发公司。
1.1.2 试验药物
(1)中药组方:黄芪、甘草、茯苓、白茅根、白术、山药、蒲公英,购自贵阳市花溪区中医院。配制方法:将中药饮片用粉碎机进行粉碎,过100目筛,按照“阶梯稀释法”1份药加同等量饲料混匀,然后再以混合物同等量饲料混匀,如此反复,直至完全混匀,以6 g/(只·d)剂量均匀混于饲料中备用。(2)氯化汞(HgCl2):购自铜仁银湖化工有限公司化学试剂厂(批号:121202)
从100只脱温鸡苗中选择健康、体重与个体差异不显著(P>0.05)雏鸡72只,随机平均分为3组(每组24只):空白组(仅饲喂基础日粮)、阳性组(饲喂基础日粮+氯化汞36 g/kg,作为中毒模型)、中药组(饲喂日基础日粮+氯化汞36 g/kg+中药)。各组自由饮水,分笼常规饲养,饲养管理方法相同,试验期共60 d。
分别于试验第20、40、60 d(前晚禁食12 h)每组随机选取8只鸡称重,采用颈动脉采血法采集血液1 mL,装入有抗凝剂的采血管,并做好记录。采血后6 h内用全自动血细胞分析仪(型号:PE-6800VET,深圳市普康电子有限公司)检测各组鸡血样中红细胞总数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞压积(HCT)、血小板总数(PLT)、白细胞总数(WBC)。
采用Excel软件对各试验数据进行初步统计,用SPSS 20.0软件(IBM SPSS Statistics 20.0)one-wayANOVA的F检验进行差异显著性分析,结果以“平均数±标准误”表示。
检测结果见表1。(1)红细胞总数:阳性组第20 d红细胞总数显著低于空白组(P<0.05),第40、60 d均极显著低于空白组(P<0.01),且阳性组第60 d 显著低于第20 d(P<0.05);中药组第40 d显著高于阳性组(P<0.05),第60 d极显著高于阳性组(P<0.01)。(2)血红蛋白浓度:与空白组比较,阳性组第20 d显著降低(P<0.05),第40、60 d均极显著降低(P<0.01),且阳性组第40、60 d均极显著低于第20 d(P<0.01);中药组第40 d显著高于阳性组(P<0.05),第60 d极显著高于阳性组(P<0.01)。(3)平均红细胞血红蛋白含量:阳性组第20 d显著低于空白组(P<0.05),第40、60 d均极显著低于空白组(P<0.01);中药组第40 d显著高于阳性组(P<0.05),略低于空白组(P>0.05),第60 d极显著高于阳性组(P<0.01)。(4)红细胞平均体积:阳性组第20、40 d显著低于空白组(P<0.05),第60 d极显著低于空白组(P<0.01),其中阳性组第40、60 d均极显著低于第20 d(P<0.01);中药组第40 d显著高于阳性组(P<0.05),第60 d极显著高于阳性组(P<0.05),且第40、60 d均极显著高于第20 d(P<0.01)。 (5)红细胞压积:与空白组比较,阳性组第20 d 显著降低(P<0.05),第40、60 d极显著降低(P<0.01),且阳性组第60 d显著低于第20 d(P<0.05);中药组第40 d显著高于阳性组(P<0.05),第60 d极显著高于阳性组(P<0.01),且中药组第60 d显著高于第20 d(P<0.05)。(6)血小板总数:阳性组第20 d显著低于空白组(P<0.05),第40、60 d均极显著低于空白组(P<0.01);中药组第40、60 d均略低于空白组(P>0.05),第40 d显著高于阳性组(P<0.05),第60 d极显著高于阳性组(P<0.01)。
由表2可见:第20、40、60 d,阳性组白细胞总数显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于空白组;第40、60 d,阳性组显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于第20 d;第40、60 d,中药组显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)低于阳性组。
表2 鸡血液白细胞总数检测结果 ×109/L
血液是动物机体循环系统的主要组成部分,对于维持机体的正常生理功能起着至关重要的作用。血液由血细胞和血浆组成,其中血细胞可分为红细胞、白细胞、血小板3大类,这些细胞数量和形态的变化可以直接反映血液的气体运输、免疫、凝血和造血功能[2],是重要的血液学检测指标。白细胞总数升高常表明有急性感染和炎症发生,而红细胞总数和血小板总数降低则提示贫血[3]。汞及其化合物是重要的环境有毒污染物,摄入不同形态的汞均会造成机体的损害,其中以无机汞的中毒更为显著,汞中毒会引起小细胞低色素性贫血[2,4]。有研究表明,饲喂茯苓、黄芪等组成的复方中药添加剂可显著升高动物红细胞、血小板的数量及血红蛋白含量,降低白细胞数量,进而改善造血功能[3~6];当归多糖、黄芪多糖联合用药可促进小鼠造血干细胞增殖[7];黄芪能显著提高鸡的各项免疫球蛋白含量、免疫器官指数,促进免疫器官生长发育,提高机体抵抗力[8]。本试验结果表明,阳性组红细胞总数、血红蛋白浓度、血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞压积等均显著降低,表明氯化汞中毒可导致鸡发生低色素性贫血,经过饲喂配制的中药组方预防后,这些指标均明显升高,并逐渐恢复至正常水平。氯化汞中毒鸡的血小板总数显著或极显著低于正常鸡,造成凝血功能降低,经饲喂中药组方后,血小板总数下降的情况得到显著缓解,表明该中药组方提高了氯化汞中毒鸡的凝血功能。此外,氯化汞中毒鸡的白细胞总数显著或极显著高于正常鸡,造成炎症反应,经过饲喂中药组方后,白细胞总数逐渐恢复至正常水平,可能是由于本中药组方中含有缓解炎症的成分(茯苓、蒲公英、黄芪、甘草)。
黄芪、甘草、茯苓、白茅根、白术、山药、蒲公英配制的中药组方可缓解氯化汞中毒鸡贫血,增强凝血功能,降低炎症反应,达到防治氯化汞中毒的作用。