LncRNA MYLK-AS1 调节miR-141-3p/STMN1 轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

【摘 要】目的：探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA，LncRNA）肌球蛋白轻链激酶反义RNA1（myosin light chain kinaseantisense RNA1，MYLK-AS1）调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1（stathmin 1，STMN1）轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法：将HGC27 细胞分为NC 组、si-NC 组、si-MYLK-AS1 组、si-MYLK-AS1+inhibitor NC 组、si-MYLK-AS1+miR-141-3pinhibitor组。双萤光素酶报告基因实验检测LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1的关系；qRT-PCR检测HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p表达；CCK-8法检测HGC27细胞增殖情况；流式细胞术检测HGC27细胞凋亡；使用Tran⁃swell实验评估了HGC27细胞的侵袭和迁移能力，并统计了穿透基质膜的细胞数量；同时采用Western blot技术检测了HGC27细胞中STMN1、E-cadherin、Vimentin 及N-cadherin 这几种蛋白表达量的变化。结果：HGC27 细胞中LncRNA MYLK-AS1、STMN1水平高于GES-1细胞（Plt;0.05），miR-141-3p水平低于GES-1细胞（Plt;0.05）。si-MYLK-AS1组HGC27细胞A450 nm值、迁移、侵袭细胞数量、LncRNA MYLK-AS1 表达量、STMN1、N-cadherin、Vimentin 蛋白水平低于NC 组、si-NC 组（Plt;0.05），HGC27细胞凋亡率、miR-141-3p表达量、E-cadherin蛋白水平高于NC组、si-NC组（Plt;0.05）；而miR-141-3p低表达减弱了沉默LncRNA MYLK-AS1抑制HGC27细胞发展的作用；LncRNA MYLK-AS1靶向调节miR-141-3p/STMN1轴。结论：LncRNAMYLK-AS1可能通过上调microRNA-141-3p的表达水平，间接导致STMN1基因表达受到抑制，这一过程可能对胃癌细胞的增殖、凋亡及侵袭特性产生明显影响。

【关键词】长链非编码RNA肌球蛋白轻链激酶反义RNA1；微小RNA-141-3p/微管不稳定蛋白1轴；胃癌；增殖；凋亡；侵袭

【中图分类号】R735.2 【文献标志码】A 【收稿日期】2023-06-27

胃癌是一种起源于胃黏膜上皮的消化道恶性肿瘤。截至2020年，新增病例超过100万例，死亡病例为76.9万例。在癌症中，胃癌发病率排名第5，死亡率排名第4[1]。胃癌早期没有明显症状，由于缺乏有效的早期诊断分子，大多数患者在诊断时已处于晚期[2]。尽管化疗可延长患者生存时间，但预后仍不容乐观。因此，迫切需要寻找有效的靶向分子，以改善患者预后。已有研究证实长链非编码RNA（long non coding RNA，lncRNA）可用作诊断和治疗胃癌的生物标志物[3]。有研究通过体内外实验发现，沉默LncRNA 肌球蛋白轻链激酶反义RNA1（myosinlightchainkinaseantisenseRNA1，MYLK-AS1）可以抑制胃癌小鼠肿瘤生长，抑制胃癌细胞迁移和侵袭[4]。Target Scan网站及双萤光素酶报告基因实验发现，LncRNA MYLK-AS1 可以靶向调节miR-141-3p/STMN1 轴。上调miR-1-141p 水平可以抑制胃癌细胞活力、迁移和侵袭[5]，而STMN1与胃癌患者化学抵抗和预后不良有关[6]。本研究对LncRNAMYLK-AS1是否可以通过调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1（stathmin1，STMN1）轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭产生影响，进行研究报道如下。

1 材料与方法

1.1 主要材料

HGC27人胃癌细胞株是从赛百慷生物技术（上海）有限公司获得的，GES-1人胃黏膜上皮细胞是由上海致备生物科技有限公司提供的。此外，实验中使用的si-NC、si-MYLKAS1、inhibitor NC和miR-141-3p inhibitor等产品均购于上海生工生物科技有限公司。用于检测细胞增殖能力的CCK-8试剂盒，由无锡菩禾生物医药技术有限公司生产。实行双荧光素酶报告基因分析和细胞凋亡检测的试剂盒，包括膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭（annexin V-FITC/PI）双染试剂盒，是北京百奥莱博科技有限公司所供应的。针对STMN1、E钙黏蛋白（E-cadherin）、N 钙黏蛋白（N-cadherin）及波形蛋白（vimentin）的专用抗体，是由Abcam公司销售的。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及分组[7-8] 所有细胞种类在添加了1%的青霉素/链霉素和10%胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）的杜尔伯科改良伊格尔培养基（Dulbecco’s modified eagle medium，DMEM）里进行了培养。这些细胞在37 ℃、含有5% CO2的饱和湿度条件下的稳定温度培养箱中进行了培养。在6孔培养板上，每孔种植3×104个HGC27细胞。接下来，根据转染试剂盒的指导说明，分别将si-NC、si-MYLK-AS1、si-MYLK-AS1与inhibitor NC组合，以及si-MYLK-AS1与miR-141-3p inhibitor组合转染入HGC27细胞。这些处理分别标识为si-NC组、si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibitor NC组和si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor组。同时，设置一组未接受任何处理的HGC27细胞作为对照组，此组被称为NC组。转染完成后，所有细胞继续在培养条件下培养48 h。

1.2.2 LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1 关系 为了探究MYLK-AS1和STMN1基因与miR-141-3p的相互作用，首先构建MYLK-AS1 的野生型载体（MYLK-AS1-WT）及其突变型载体（MYLK-AS1-MUT），并将这2个质粒分别与mimic NC 或miR-141-3p mimic 共同转染至HGC27 细胞中，由此形成了4 个实验组：miR-NC+MYLK-AS1-WT 组、miR-141-3p mimic+MYLK-AS1-WT组、miR-NC+MYLK-AS1-MUT组及miR-141-3p mimic+MYLK-AS1-MUT组。同时，构建STMN1基因的野生型质粒（STMN1-WT）和突变型质粒（STMN1-MUT），同样将这2 类质粒各自与mimic NC或miR-141-3p mimic共转染至HGC27细胞内，从而设立了以下4 个对照组：miR-NC+STMN1-WT 组、miR-141-3p mimic+STMN1-WT 组、miR-NC+STMN1-MUT 组及miR-141-3p mimic+STMN1-MUT组。转染48 h后，对HGC27细胞中的荧光素酶活性变化进行评价分析[7-8]。

1.2.3 qRT-PCR 检测LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p 表达 采用Trizol试剂，依据产品说明书进行操作，从HGC27和GES-1 细胞样本中提取总RNA。挑选纯度和浓度接近2.0的样本，进而使用反转录试剂盒将其转化为cDNA，以分析LncRNA MYLK-AS1 和miR-141-3p 的表达。配置包含cDNA、引物、MIX的混合溶液20 μL，置于qRT-PCR仪扩增。qRT-PCR的条件如下：95 ℃持续10 min，40个循环（95 ℃持续15 s，60 ℃持续1 min）。采用GAPDH 和U6 作为参考基因，通过2−ΔΔCt 技术评估LncRNA MYLK-AS1与miR-141-3p的相对表达水平。引物如下。miR-141-3p，F：5’-GCGCGTAACACTGTCTGG-3’，R：5’-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3’；LncRNA MYLK-AS1，F：5’-TCTCCTTGTGCAAACCTCC-3’，R：5’-CCCACATTGAGCGAATGCC-3’；U6，F：5’-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3’，R：5’-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3’；GAPDH，F：5’-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3’，R：5’-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3’。

1.2.4 Western blot 检测STMN1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin 蛋白表达[7-8] 使用RIPA 裂解缓冲液对转染HGC27 细胞进行裂解后，样本在4 ℃下进行12 000 g 离心15 min。随后，BCA 蛋白质定量试剂盒用于测定总蛋白浓度。等量的蛋白样品通过10% SDS-PAGE进行分离，并转印至PVDF膜上，维持2 h。PVDF膜随后用5%脱脂牛奶封闭1 h，室温条件下。之后，膜在4 ℃条件下与以下初级抗体孵育过夜：E-cadherin（稀释比1∶2 000）、vimentin（稀释比1∶2 000）、N-cadherin（稀释比1∶1 000）、STMN1（稀释比1∶1 000）和GAPDH（稀释比1∶1 000）。次日，继续在室温下使膜与辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗孵育2 h。最后，添加ECL 试剂以实现目标条带的化学发光显色，应用Image J软件对目的条带的灰度值进行量化分析。

1.2.5 CCK-8法检测HGC27细胞增殖情况 在96孔板上，每孔接种4×103 个转染HGC27 细胞，并在培养48 h 后，在37 ℃下向每孔添加10 μL CCK-8试剂，孵化4 h。随后，使用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）仪器，测定450 nm波长下的吸光度（absorbance，A）值。

1.2.6 流式细胞术检测HGC27细胞凋亡 HGC27细胞在6孔板中以每孔4×105细胞的密度种植并培养。24 h培养后，收集浮游细胞，并将这些细胞暴露于含有各5 μL AnnexinV-FITC和PI的混合溶液中，避光孵育15 min。接着，利用流式细胞分析仪准确评估HGC27细胞的凋亡比例[7-8]。

1.2.7 Transwell试验测定HGC27细胞迁移和侵袭[7-8] 检测迁移和侵袭性能时，使用了Matrigel基质涂层的Transwell室（用于侵袭性评估）和未经Matrigel基质覆盖的Transwell室（用于迁移性评估）。对已转染的HGC27细胞进行收集，并将其重新溶解于不含血清的DMEM培养基中。将5×104个/mLHGC27细胞接种在上室，将含有20%FBS的DMEM培养基作为化学引诱剂添加到Transwell下室。将细胞培养24 h后，用棉签去除聚碳酸酯膜上表面的细胞，在Transwell室内，迁移和侵袭的细胞用4%的多聚甲醛进行固定后，再用0.05%的结晶紫溶液进行染色。接下来，在显微镜下捕获图像，并从中随机选择5个有代表性的区域，以便对这些区域内的侵袭或迁移细胞进行计数。

1.3 统计学方法

利用SPSS 25.0对全部数据进行了统计学处理。在经过正态性及方差齐性验证之后，符合要求的计量资料以均数±标准差（x±s）表示。2组之间的比较，采用独立样本t 检验方法；多组数据的比较时，首选单因素方差分析。为进一步明确各组之间的差异，使用SNK-q 检验进行两两比较。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 LncRNA MYLK-AS1靶向调控miR-141-3p/STMN1轴

使用TargetScan 预测工具分析显示，LncRNA MYLKAS1与miR-141-3p，以及miR-141-3p与STMN1之间存在潜在的相互作用结合位点。在HGC27 细胞中，miR-141-3pmimic+MYLK-AS1-WT组显示出的荧光素酶活性明显低于miR-NC+MYLK-AS1-WT组的活性（[ 0.37±0.03） vs.（ 1.06±0.14）]，有明显差异（q=14.852，Plt;0.001）。另一方面，miR-141-3p mimic+MYLK-AS1-MUT 组共转染至HGC27 细胞时，所测定的荧光素酶活性为（1.04±0.12），与miR-NC+MYLK-AS1-MUT 组的活性（1.07±0.13）相比并无差异（q=0.656，P=0.968）。

相似地，相较于miR-NC+STMN1-WT组的荧光素酶活性（1.06±0.13），miR-141-3p mimic+STMN1-WT 组HGC27细胞的荧光素酶活性降低至（0.44±0.05）（q=12.463，Plt;0.001）。然而，miR-141-3p mimic+STMN1-MUT组的荧光素酶活性（1.08±0.16）相较于miR-NC+STMN1-MUT组（1.05±0.12）并无差异（q=0.603，P=0.973），见图1。

2.2 LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1在细胞中的表达

相较于GES-1细胞，HGC27细胞内LncRNA MYLK-AS1和STMN1 的表达水平均有所上调（t=6.736、9.321，均P=0.000），而miR-141-3p的表达在HGC27细胞中则表现为下调（t=15.513，P=0.000），见图2、3。

2.3 LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1蛋白在HGC27细胞中的表达

相较于NC 组和si-NC 组，si-MYLK-AS1 组中LncRNAMYLK-AS1及STMN1的表达水平均下调（q=34.721、18.924，36.168、19.840，均Plt;0.05），miR-141-3p 的表达量却上调（q=14.374、14.209，均Plt;0.05）；与MYLK-AS1+miR-141-3pinhibitor组相比较，si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibi⁃tor NC 组STMN1 水平下降（q=21.366、21.061，均Plt;0.05），miR-141-3p 表达量上升（q=13.878、14.374，均Plt;0.05），见图4、5。

2.4 沉默LncRNA MYLK-AS1或下调miR-141-3p对HGC27细胞增殖的影响

与NC 组和si-NC 组相比，si-MYLK-AS1 组在HGC27细胞的A450 nm 值观测到减少（q=18.152、17.859，均Plt;0.05）。进一步，与si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor 组进行比较时，si-MYLK-AS1 组和si-MYLK-AS1+inhibitor NC 组的A450 nm 值同样表现出下降（q=15.517、16.102，均Plt;0.05），见图6。

2.5 沉默LncRNA MYLK-AS1或下调miR-141-3p对HGC27细胞凋亡的影响

相较于si-MYLK-AS1 处理的组别，未处理的NC 组及si-NC 处理的HGC27 细胞组展现了更低的细胞凋亡率（q=42.675、42.836，均Plt;0.05）；与si-MYLK-AS1+miR-141-3pinhibitor组相比较，si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibi⁃tor NC 组HGC27 细胞凋亡率上升（q=33.004、33.907，均Plt;0.05），见图7、8。

2.6 沉默LncRNA MYLK-AS1或下调miR-141-3p对HGC27细胞侵袭、迁移及上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）相关蛋白的影响

在NC组和si-NC组中，相比于si-MYLK-AS1组，HGC27细胞的迁移和侵袭能力及N-cadherin和Vimentin蛋白的水平有所增加（q=14.726、10.898、25.852、17.000 和14.033、11.587、24.961、17.667，均Plt;0.05），而E-cadherin 蛋白水平则表现为下降（q=23.668、24.083，均Plt;0.05）。另一方面，与si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor组相比，si-MYLK-AS1组和si-MYLK-AS1+inhibitor NC组在HGC27细胞迁移和侵袭能力及N-cadherin 和Vimentin 蛋白水平上明显下降（q=6.207、4.061、14.263、14.667和7.656、3.546、15.601、16.000，Plt;0.05），而E-cadherin 蛋白水平则呈现上升趋势（q=17.024、17.440，均Plt;0.05），见图9～13。

3 讨论

近几年，胃癌发病率及死亡率在持续增长，研究报道称，胃癌患者死亡率高的主要原因是发生转移[9]。有大量研究报道称，lncRNA可以调控胃癌进展。例如，LINC01116可以促进胃癌细胞增殖，抑制胃癌细胞凋亡[10]。LncRNA MYLK-AS1是各种人类癌症中的癌基因，LncRNA MYLK-AS1沉默对肾母细胞瘤细胞体内致瘤能力起抑制作用[11]。LncRNAMYLK-AS1上调可以促进肝癌肿瘤进展和血管生成[12]。近期，还有研究发现，LncRNA MYLK-AS1沉默抑制胃癌细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭[4]。由此可见，LncRNA MYLK-AS1可能是胃癌分子诊断的潜在标志物。本项研究揭示了在HGC27细胞中，LncRNA MYLK-AS1的表达水平较高，暗示LncRNAMYLK-AS1有可能在胃癌的发展过程中起促进作用。进一步研究发现，当LncRNA MYLK-AS1被沉默之后，HGC27细胞的A450 nm 值降低，凋亡率提高，这表明通过抑制LncRNA MYLK-AS1的表达，可以抑制胃癌细胞的增殖并促进其凋亡，从而可能对胃癌的发展产生抑制作用。

在胃癌细胞的转移和侵袭过程中，EMT 被激活。在EMT中，上皮细胞失去其特有的上皮特性，例如E-cadherin的下调，而获得间质细胞的特征，表现为N-cadherin和Vimentin的上调，并激活一系列下游转录因子，如Snail、Slug、Twist等[13]。通过EMT过程，胃癌细胞获得了向周围基质迁移和侵入的能力，之后可以通过血液和淋巴管扩散到相邻组织[14]。

鉴于抑制EMT对防止胃癌进展至关重要，本研究所揭示的结果表明，在沉默LncRNA MYLK-AS1后，HGC27胃癌细胞的迁移和侵袭潜能明显减弱，表现为迁移和侵袭细胞的数量减少，同时Ncadherin和Vimentin这2种间质标志蛋白的表达下调。另一方面，E-cadherin这一上皮标志蛋白的表达水平则得到了提升。据此可以推断，沉默LncRNAMYLK-AS1能够有效阻止胃上皮细胞向间质表型转变，从而有效限制胃癌细胞向周围组织的扩散和侵入，最终有助于抑制胃癌病情的恶化和发展。

生物信息学分析揭示了LncRNA MYLK-AS1与miR-141-3p 之间存在结合位点。此外，miR-141-3p在肺癌中的低表达已被证实具有临床意义。例如，Chen DL 等[15]的研究表明，降低miR-141-3p的表达可以促进胃癌的进展和化疗耐药性，指出了miR-141-3p 在肿瘤发展中的潜在作用。Zhou YC等[16]发现，miR-141-3p不仅可限制胃癌细胞迁移和侵袭，还抑制正常成纤维细胞向癌症相关成纤维细胞的转变。以上研究均表明上调miR-141-3p可以对胃癌的发展起到抑制作用。本研究所揭示的数据指出，miR-141-3p在HGC27细胞系中呈现低表达状态。在对miR-141-3p的功能抑制后，发现其削弱了LncRNA MYLK-AS1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制效应。这一现象暗示，LncRNAMYLK-AS1 可能借助上调miR-141-3p 的表达途径，来有效地阻抑胃癌的恶性进展。另外，通过生物信息学手段已确认miR-141-3p与STMN1基因存在相互作用的结合位点，这为进一步理解两者间的调控关系提供了依据。有研究报道称，STMN1的异常表达可能通过影响EMT促进肿瘤进展[17]。STMN1基因沉默可以抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭[18]。

研究揭示了STMN1在胃癌细胞中表达水平偏高，而在对HGC27细胞进行LncRNA MYLK-AS1沉默处理后，miR-141-3p表达量增加，同时STMN1蛋白水平下降。反之，如果miR-141-3p表达下调，则STMN1蛋白水平上升，上述实验结果揭示了这样一个机制可能性：即LncRNA MYLK-AS1可能通过介导miR-141-3p的上调作用，间接导致STMN1表达下调，这一系列连锁反应可能对HGC27细胞的增殖潜能、EMT进程及迁移和侵袭能力产生抑制效应，并且有利于促进此类细胞发生凋亡。此外，双荧光素酶实验进一步确认了LncRNA MYLK-AS1直接靶向调控miR-141-3p与STMN1之间的相互作用。

综上所述，通过沉默LncRNA MYLK-AS1，可能会导致miR-141-3p 的表达水平提升，进而抑制STMN1蛋白的表达。这一连串的分子事件有助于有效抑制HGC27胃癌细胞的增殖、阻断EMT进程，以及减少细胞的迁移和侵袭能力，同时促进细胞凋亡。鉴于这些发现，本课题组计划在未来的研究中使用小鼠模型进行体内实验，以进一步验证这些结果和探索LncRNA MYLK-AS1 在胃癌发展中的作用机制。

参考文献

[1] Sung H，Ferlay J，Siegel RL，et al. Global cancer statistics 2020：

GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 can⁃

cers in 185 countries[J]. CA Cancer J Clin，2021，71（3）：209-249．

[2] Tan ZY. Recent advances in the surgical treatment of advanced

gastric cancer：a review[J]. Med Sci Monit，2019，25：3537-3541．

[3] Yang YJ，Luo S，Wang LS. Effects of lncRNA-HEIH on prolifera⁃

tion，apoptosis and invasion of gastric cancer cells[J]. Eur Rev Med

Pharmacol Sci，2020，24（18）：9400-9407．

[4] Luo J，Xiang HF. LncRNA MYLK-AS1 acts as an oncogene by epi⁃

genetically silencing large tumor suppressor 2（LATS2） in gastric cancer

[J]. Bioengineered，2021，12（1）：3101-3112．

[5] Liu Y，Lin WJ，Dong YY，et al. Long noncoding RNA HCG18 upregulates

the expression of WIPF1 and YAP/TAZ by inhibiting miR-

141-3p in gastric cancer[J]. Cancer Med，2020，9（18）：6752-6765．

[6] Bai TY，Yokobori T，Altan B，et al. High STMN1 level is associ⁃

ated with chemo-resistance and poor prognosis in gastric cancer patients

[J]. Br J Cancer，2017，116（9）：1177-1185．

[7] 魏丕喜，邓 玉，任双双，等. lncRNA FGD5-AS1 调节miR-

129-5p/SOX4轴对子宫内膜癌细胞恶性生物行为的影响[J]. 中国优

生与遗传杂志，2023，31（12）：2413-2419．

Wei PX，Deng Y，Ren SS，et al. Impact of lncRNA FGD5-AS1 on the

malignant biological behavior of endometrial cancer cells via regulation

of miR-129-5p/SOX4 axis[J]. Chin J Birth Health Hered，2023，31

（12）：2413-2419．

[8] 王金礼，陈登峰. 沉默lncRNA MCF2L-AS1 通过miR-138-5p/

AnxA2 轴抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭[J]. 现代肿瘤医学，

2024，32（2）：240-248．

Wang JL，Chen DF. Silencing lncRNA MCF2L-AS1 inhibits prolifera⁃

tion，migration and invasion of breast cancer cells via miR-138-5p/

AnxA2 axis[J]. J Mod Oncol，2024，32（2）：240-248．

[9] Li Y，Yan XL，Shi JJ，et al. Aberrantly expressed miR-188-5p pro⁃

motes gastric cancer metastasis by activating Wnt/β-catenin signaling

[J]. BMC Cancer，2019，19（1）：505．

[10] Chen J，Yuan ZH，Hou XH，et al. LINC01116 promotes the prolif⁃

eration and inhibits the apoptosis of gastric cancer cells[J]. Eur Rev Med

Pharmacol Sci，2020，24（4）：1807-1814．

[11] Zhu SB，Zhang JQ，Gao XF，et al. Silencing of long noncoding

RNA MYLK-AS1 suppresses nephroblastoma via down-regulation of

CCNE1 through transcription factor TCF7L2[J]. J Cell Physiol，2021，

236（8）：5757-5770．

[12] Teng F，Zhang JX，Chang QM，et al. LncRNA MYLK-AS1 facili⁃

tates tumor progression and angiogenesis by targeting miR-424-5p/

E2F7 axis and activating VEGFR-2 signaling pathway in hepatocellular

carcinoma[J]. J Exp Clin Cancer Res，2020，39（1）：235．

[13] Liu MY，Zhang MK，Yin HS. Linc-ROR promotes invasion and

metastasis of gastric cancer by activating epithelial-mesenchymal transi⁃

tion[J]. Indian J Pathol Microbiol，2022，65（3）：545-550．

[14] Yonemura Y，Ishibashi H，Mizumoto A，et al. The development of

peritoneal metastasis from gastric cancer and rationale of treatment ac⁃

cording to the mechanism[J]. J Clin Med，2022，11（2）：458．

[15] Chen DL，Sheng H，Zhang DS，et al. The circular RNA circDLG1

promotes gastric cancer progression and anti-PD-1 resistance through

the regulation of CXCL12 by sponging miR-141-3p[J]. Mol Cancer，

2021，20（1）：166．

[16] Zhou YC，Zhong JH，Gong FS，et al. MiR-141-3p suppresses gas⁃

tric cancer induced transition of normal fibroblast and BMSC to cancerassociated

fibroblasts via targeting STAT4[J]. Exp Mol Pathol，2019，

107：85-94．

[17] Ke B，Guo XF，Li N，et al. Clinical significance of Stathmin1 ex⁃

pression and epithelial-mesenchymal transition in curatively resected

gastric cancer[J]. Mol Clin Oncol，2019，10（2）：214-222．

[18] Shu F，Zou XQ，Tuo H，et al. Stathmin gene silencing suppresses

proliferation，migration and invasion of gastric cancer cells via AKT/

sCLU and STAT3 signaling[J]. Int J Oncol，2019，54（3）：1086-1098．

（责任编辑：曾 玲）