浅谈猪伪狂犬病及其防治策略

杨虹，丁尚成，苟于奎，白智轲

（1.城口县农业综合行政执法支队 重庆 405900；2.城口县周溪乡农业服务中心 重庆 405900；3.城口县双河乡农业服务中心. 重庆 405900；4.城口县动物疫病预防控制中心 重庆 405900）

伪狂犬病（PR）是由伪狂犬病毒（PRV）感染，引起的多种家畜和野生动物共患的一种急性、热性传染病。猪科以外如牛、羊、犬、猫等家养动物和野生动物感染后引起发热、奇痒和脑脊髓炎，都以死亡结局，临床以极度瘙痒为特征，故称“疯痒症”。猪呈暴发性流行，妊娠母猪出现流产、死胎，公猪不育，新生仔猪发生呕吐、颤抖、共济失调、瘫痪、抽搐等神经症状，造成大量死亡；育肥猪出现发热和呼吸道症状，耐过后形成潜伏感染，终身排毒。本病是危害养猪业的重大传染病之一，在我国被列为二类动物疫病。

1 病原

伪狂犬病毒又称传染性延髓麻痹病毒、奇痒症病毒、奥耶斯基氏病病毒，在分类上属于疱疹病毒目、疱疹病毒科、甲型疱疹病毒亚科、水痘病毒属、猪疱疹病毒Ⅰ型，PRV 呈球形或椭球形，位于细胞核内未成熟的病毒粒子直径110～150 nm；位于细胞质内成熟的病毒粒子直径约150～180 nm，核衣壳呈20 面体对称，直径110 nm，由162 个中空的壳粒组成，壳粒包括150 个六邻体和12 个5邻体。衣壳内为核芯基因组，衣壳外为双层结构的脂蛋白囊膜，其表面有长约8～10 nm 呈放射状排列的糖蛋白纤突。核衣壳和囊膜之间，充满呈无定形物质状态的被膜蛋白，称为“壳皮”。

基因组为线状双股DNA，长约143 kb，平均G+C 含量高达74%，包含70 个阅读框(OFF)，可编码70～100 种蛋白质，成熟的病毒粒子含有50 种蛋白质。PRV 基因组DNA 由独特长区段UL、独特短区段US 及其两侧的末端重复序列(TRS)和内部重复序列(IRS)组成。US 两端的重复序列可以发生重组，与UL 的方向可以相同，也可以相反，因而PRV 基因组存在两种异构体。糖蛋白gE 对PRV侵入神经系统起关键性作用，去除gE，则PRV 不能侵入神经系统，是最重要非必需糖蛋白，其次是gI，此特点常被用来制作基因缺失疫苗。PRV 只有一个血清型，各毒株间有一定差异，分为四种类型：基因Ⅰ型、基因Ⅱ型、基因Ⅲ型和基因Ⅳ型，欧美国家毒株主要为Ⅰ型，多数亚洲国家毒株为Ⅱ型，丹麦、瑞典等北欧国家毒株为Ⅲ型，泰国毒株为Ⅱ型和Ⅳ型，比利时、美国、日本、德国、荷兰毒株为Ⅰ型和Ⅱ型，基因Ⅰ型和基因Ⅱ型的核苷酸差异达2.93%。我国毒株为基因Ⅱ型，而Bartha 疫苗毒株为基因Ⅰ型，这就解释了我国很多猪场尽管注射了Bartha 疫苗，但PR 仍然有较高发病率。

PRV 能在多种组织细胞内增殖，如兔肾和猪肾细胞、牛睾丸细胞、鸡胚成纤维细胞等原代细胞以及PK-15（猪肾细胞）、Vero（非洲绿猴肾细胞）和BHK-21（仓鼠肾细胞）等传代细胞。细胞病变（CPE）一般出现在攻毒后24～72 h，起初分散而后逐步扩大，最后全部细胞溶解脱落形成多核巨细胞。用苏木-伊红染色病变细胞，可见到核内嗜酸性包涵体。用鸡胚作绒毛尿囊膜接种、卵黄囊和尿囊腔接种，可造成鸡胚死亡。

PRV 对外界环境抵抗力较强，44 ℃5 h 不能被完全灭活，55 ℃50 min、80 ℃3 min、100 ℃瞬间被灭活。在污染的猪舍内可以存活1 个月以上，在肉中可存活5 周以上。在低温潮湿环境，pH 6～8 时最为稳定；在干燥阳光直射条件下，病毒很快失活。5%石炭酸经2 min 灭活，0.5%～1%氢氧化钠迅速使其灭活。由于病毒具有囊膜，对乙醚、氯仿等脂溶剂以及甲醛敏感。

2 流行病学

1）易感动物：家养动物如猪、山羊、绵羊、牛、猫、犬等，经济动物如狐狸、水貂、雪貂等，野生动物主要是野猪、鹿、熊、野鼠和豺等，马属动物和鸟类不会自然感染，人工感染需要大剂量的病毒并且感染途径必须是脑内注射。除猪和野猪外，其他动物感染都以死亡为结局。

2）传染源：病猪、带毒猪以及带毒鼠类是猪场的传染源，野猪是野生动物的自然传染源，也是PRV 潜在的贮存宿主和家猪的传染源。

3）传播途径：①通过鼻黏膜、自然交配、哺乳和相互啃咬等呼吸道、生殖道和皮肤黏膜途径，直接接触传播；②通过食入被病猪鼻咽分泌物污染的饲料和饮水，通过消化道途径及人工授精间接接触传播；③母猪妊娠后感染，通过胎盘屏障垂直传播感染胎儿。

4）发病季节：无严格的季节性，一年四季均可发病，但以冬、春寒冷季节最为多见。因为低温有利于病毒的存活，增加感染宿主的概率。

5）流行特点：各种年龄的猪均可感染，但年龄越小，其发病率和死亡率越高；耐过的成年猪及种猪则形成隐性感染，终身通过鼻咽分泌物、乳汁、精液和阴道排毒，不能从粪尿排毒，成为长期的传染源。

3 致病机理

PRV 侵入鼻黏膜、口腔、咽部后，通过囊膜糖蛋白gC、gD、gE 和侵入部位上皮细胞表面硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的相互作用，吸附于其表面；然后在囊膜糖蛋白gB、gD、gH、gL 的参与下，病毒囊膜与细胞膜融合，核衣壳穿入细胞膜在细胞质内通过微管靠近核孔，将DNA 注入细胞核内进行首轮复制。

病毒DNA 在细胞核内通过级联方式，转录并翻译出即刻早期蛋白，再转录出早期蛋白和晚期蛋白。早期蛋白继续参与病毒的复制，晚期蛋白则成为衣壳蛋白对新复制的病毒DNA 进行组装，在核膜处进行初级包装，然后在胞浆内再进行二级包装，子代病毒粒子以出芽的方式释放到三叉神经节、嗅球和扁桃体等部位处于潜伏状态。潜伏的病毒有两种去路：①经嗅神经、三叉神经和舌咽神经的神经鞘，快速到达脑和脊髓内进行第二轮复制，形成化脓灶；②病毒通过血液循环到达全身各部位，但在血液中呈间歇性出现，滴度较低，因而血液检测不出病毒时，不能排除PRV 感染的可能。

4 临床症状

潜伏期一般为2～6 d，仔猪年龄越小，潜伏期越短，最短的为36 h，成年猪最长的可达11 d。

1）哺乳仔猪的症状：刚出生的仔猪第1 天精神尚好，第2 天开始发病，精神高度萎靡，被毛凌乱，拒绝吮乳，排黄色的稀薄粪便，少数呕吐。共济失调或原地转圈、角弓反张、癫痫样抽搐、发出唧唧的鼠叫声，倒地侧卧，四肢呈划水样运动，最终昏迷衰竭，一般在72 h 以内整窝死亡。15 日龄以内的仔猪，死亡率可达100%。

2）断奶仔猪的症状：精神倦怠，厌食、发热，体温高达41～42 ℃，流浆液性鼻涕、咳嗽、打喷嚏，阵发性、强直性痉挛，后肢不协调，如划船样运动或呈犬坐式，头颈部高度紧张，死亡率不超过5%。如并发多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、猪副嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等细菌感染时，则死亡率可达50%。

3）生长育肥猪的症状：轻度发热，体温在40～41 ℃左右，精神沉郁，食欲减退，打喷嚏，流黏性鼻涕，喘气，腹式呼吸，呈犬坐姿势。少数病例出现肌肉震颤甚至剧烈抽搐等神经症状，无继发感染时，死亡率不超过2%；如继发细菌感染，则死亡率可达10%。

4）成年猪的症状：母猪在怀孕期前30 d 内感染，胚胎可被吸收，母猪重新进入发情期，往往不易觉察，被认为是配种失败；在妊娠中、后期感染，表现为流产、木乃伊胎和死胎，流产母猪推迟发情时间，返情率高；临产前感染时，会产下虚弱仔猪，在出生后1 d 内死亡。种公猪感染后睾丸肿胀，后期萎缩，丧失种用价值。其他临床症状不典型，表现为咳嗽、发热但增温不高，食欲下降，少数病猪腹泻和呕吐。一般不发生死亡但可呈长期潜伏感染、带毒和排毒状态，是最危险的传染源。

5）其他动物的症状：牛、羊、兔的临床症状最为典型，主要表现为体表的任何部位，发生皮肤奇痒，病畜不停地啃咬或在墙壁、树桩上摩擦发痒处，致使局部皮肤发红、擦伤；后期体温升高，出现狂躁、磨牙、吼叫、痉挛、咽喉麻痹和呼吸困难等神经症状，在1～2 d 内死亡。也有发病后无奇痒症状的，但在数小时内死亡。

5 病理变化

1）仔猪：包括哺乳仔猪和断奶仔猪，脑膜充血、水肿，有出血点，脑脊液明显增多，鼻、咽、扁桃体黏膜广泛充血、出血，肺水肿、出血并有坏死点，肝脏和脾脏有散在的白色坏死灶。

2）流产母猪：可见子宫内膜炎，子宫壁增厚、水肿，阴道炎，坏疽性胎盘炎。肾脏表面有针尖大小的出血点，肺水肿、充血、出血，呈橡皮样，脑膜有弥散性出血点。

3）种公猪：输精管炎，睾丸鞘膜，睾丸白膜有坏死灶。

4）组织学病变：病猪脑和脊髓的灰质、白质发生非化脓性脑膜脑炎、神经节炎，神经细胞及神经胶质细胞坏死。脑膜和脊髓膜发生主要以单核细胞浸润的血管套而增厚。单核细胞有明显的核固缩和核碎裂。神经元、星型细胞、少突胶质细胞核内，可见到嗜酸性包涵体，除神经系统外，鼻黏膜、扁桃体、气管和支气管上皮细胞、结缔组织细胞，也可见到核内包涵体。

5）其他动物：牛、羊、兔等动物可见皮肤局部擦伤、裂口，皮下水肿，肺充血、水肿，心包积水，心外膜有出血点，大脑皮质和白质有化脓性坏死灶。

6 诊断

1）临床诊断：根据2 周龄以内的仔猪出现大批死亡，有共济失调、后肢震颤、角弓反张，倒地后四肢呈游泳状，发出老鼠般的唧唧叫声等临床症状，随着猪龄的增大，其死亡率显著降低等特征；结合橡皮样肺，肝和脾表面有灰白色坏死灶，脑膜充血、出血等解剖特征，即可初步怀疑诊断为PRV 感染。

2）实验室诊断：在没有仔猪，只有育肥猪或种猪发病的情形下，临床作出诊断较为困难，必须进行实验室诊断。

①病毒的分离鉴定：取流产胎儿、患病动物的鼻咽分泌物、脑组织、扁桃体、肺脏组织等病料，经处理后接种易感细胞如：猪肾传代细胞（PK-15）、仓鼠肾传代细胞（BHK-21）、鸡胚成纤维细胞（CEF）等，在24～72 h 内，出现细胞变圆、拉网、脱落等典型的细胞病变（CPE），即可确诊为PRV 感染。若第一次接种无CPE，将病料反复冻融盲传3 代仍无CPE 时，则确诊为PRV 阴性。若处于潜伏感染的猪群，病料通过上述接种易感细胞无CPE 时，不能立即判断为PRV 阴性，需经大剂量地塞米松注射72 h 后，采集注射猪的鼻咽分泌物再行接种，于24～72 h 内仍无CPE 时，方能确诊为PRV阴性。因为类固醇糖皮质激素能诱导PRV 的激活与排毒，是PRV的激活剂。

②动物接种试验：无条件进行细胞培养时，将可疑感染PRV 的病料皮下注射家兔，在36 h 后观察，若在家兔接种部位发生瘙痒、啃咬等典型症状并于2～5 d 内死亡，则确诊为PRV 感染。

③PCR 检测：采用荧光PCR 技术，采集扁桃体、三叉神经节组织，无需糖皮质激素激活就可判定是否处于PRV 潜伏感染。采集病猪鼻咽分泌物，可判断是否排毒；采集死猪肾脏、脾脏病变组织，可对PRV 感染作出确诊。

④血清学诊断：采集病猪血清，用ELISA 方法检测，如gE 蛋白血清抗体阳性率为零，非gE 蛋白血清抗体阳性率高，其检测值离散度小，则判定为疫苗免疫达到保护效果，排除PRV 感染；如gE蛋白血清抗体阳性率高，则确诊为PRV 感染。

7 鉴别诊断

PR 与猪传染性胃肠炎、仔猪黄痢、猪流行性乙脑炎、猪细小病毒病等有许多共同之处，应当作鉴别诊断。

8 防治策略

不同层次的猪场或区域，根据自身的实际情况，可选择以下策略：

1）建立无PRV 养殖区域策略。适用于有山脉、河流、溪沟等天然隔离屏障的村落或与外界隔绝的山区，所处区域内有足够数量的种公猪，并且所有生猪没有PRV 携带者。在该区域内务必做到如下几点：①各养殖场、户的生猪实行圈养，不到野外放猪。圈舍有院墙与外界隔离，以防夜间野猪与家猪接触甚至交配。不到野外捕杀野猪自食或销售，更不能捕捉野猪幼崽与家猪一同饲养；②严格自繁自养，不到区域外购进种猪和商品生猪。不从外界购买猪肉及其下水，一律自给自足；③有从事动物诊疗、防疫、阉割的乡村兽医，不从域外聘请兽医人员入境并进行相关动物诊疗活动。

2）净化根除策略。适用于下列两种情形：①有PRV 零星感染，种猪gE 抗体阳性率不超过10%，生长育肥猪阳性率为阴性的区域或猪场。群体在没有免疫的基础上，进行全面血清学检测，淘汰gE抗体阳性个体。猪群连续2 次血清学检测，gE 抗体全为阴性时，即可判定为PRV 阴性猪群；②猪群PRV 阳性率较高，包括种猪、生长育肥猪都有感染，但其规模和范围仍然可控的猪场或区域，猪群可用gE 缺失疫苗如猪伪狂犬病Bartha-K61 株弱毒苗进行普免，种猪每隔4 个月免疫1 次，生长育肥猪免疫2 次，第一次在10～12 周龄进行，间隔4 周后免疫第二次。每半年进行一次血清学普查，连续3年。每次检测种猪gE 抗体阳性的全部淘汰，非gE 抗体阳性的留着种用；生长育肥猪gE 抗体阳性的与非gE 抗体阳性的猪群分开饲养，直到出栏。

3）免疫策略。在广大的山区农村，由于近年来实现了水泥硬化路的村村通。因而无法杜绝散养户从外地购进生猪，也就无法实施净化和根除计划。采用常规免疫和免疫性治疗策略，较为现实。

①常规免疫。可选用TK、gG 双基因缺失的猪伪狂犬病活疫苗（HB-98 株）或gE 基因自然缺失的伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61 弱毒株）对猪群进行免疫注射。

猪伪狂犬病活疫苗（HB-98 株）。注射时用灭菌生理盐水稀释为1 头份/mL，猪不论大小，每次免疫均为1 mL：仔猪，无PRV 母源抗体时，出生后1 周内滴鼻或肌肉注射1 次，断奶后再注射1 次。有母源抗体的，45 日龄肌肉注射1 次；后备母猪，6 月龄左右肌肉注射1 次，间隔1 个月后加强免疫1 次，产前1 个月左右再免疫1次；经产母猪，每4 个月免疫1 次；种公猪，每年春、秋两季各免疫1次。

伪犬病活疫苗（Bartha-K61 弱毒株）。注射时用PBS 液稀释为1 头份/mL：仔猪，无PRV 母源抗体的，出生后7 日内肌肉注射1次，0.5 mL；断奶后再注射1 次，1.0 mL。有母源抗体的，28 日龄肌肉注射1 次，1.0 mL。断奶后再注射1 次，1.0 mL；妊娠母猪，分娩前21～28 日肌肉注射1 次，2.0 mL；种公猪，每年春季肌肉注射1次，2.0 mL；生长育肥猪，从未接种过上述PRV 疫苗的，补栏7 日后肌肉注射1 次，1.0 mL。在断奶后已接种上述PRV 疫苗的，可免于注射。

注意事项：在一个猪场，不能先后或同时使用上述两种疫苗，更不能将上述两种疫苗同时注射一头猪或混合注射于猪群，以免发生基因重组。

②免疫性治疗。在猪群发生本病时，可选择下列治疗措施：

哺乳仔猪：猪伪狂犬病活疫苗（HB-98 株），滴鼻，1 mL/头；同时颈部肌肉注射，1 mL/头；存活下来的仔猪，14 日后加强一次。另一侧颈部肌肉注射黄芪多糖注射液10 mL +青霉素钾160 IU，1 mL/头，一套可注射10 头仔猪，1 次/d，连续3 d，以增强免疫效果及控制细菌感染。

断奶仔猪：猪伪狂犬病活疫苗（HB-98 株）颈部肌肉注射，2 mL/头，14 日后加强一次。另外，按25 kg 体重计算，另侧颈部肌肉注射黄芪多糖注射液10 mL +青霉素钾160 IU 一套，1 次/d，连续3 d。

育肥猪：猪伪狂犬病活疫苗（HB-98 株）颈部肌肉注射，4 mL/头，14 日后加强一次。另外，按50 kg 体重计算，另侧颈部肌肉注射黄芪多糖注射液10 mL +青霉素钾160 IU 二套，1 次/d，连续3 d。

种猪：免于治疗，直接淘汰。

其他动物：牛羊等发生本病出现典型的奇痒症状时，可选用伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61 弱毒株）进行紧急注射，牛5.0 mL/头，羊3.0 mL/头。存活下来不死的，14 日后加强一次。

注意事项：在上述紧急救治的同时，绝对不能使用地塞米松，因为糖皮质激素是PRV 的激活剂，也是免疫抑制剂，注射后会加速病猪的死亡。

4）加强环境卫生策略。猪舍定期清理粪便，搞好猪场及其周围的环境卫生，做好猪舍、工具、排泄物等的消毒。同时开展灭鼠、灭蝇、灭蚊等工作，严格控制犬、猫、鸟类和其他禽类进入猪场，杜绝人员往来，工作人员做好自身的消毒和防护措施。■