饲料糖脂比对凡纳滨对虾的生长性能、淀粉酶活性和血清生化指标的影响

■ 朱学芝 姚春凤 王 昊 胡 蝶 刘丽燕 郑石轩

（广东粤海饲料集团股份有限公司，广东湛江，524017）

凡纳滨对虾是世界上产量最大的对虾品种，也是我国重要的水产养殖品种之一，在对虾配合饲料中碳水化合物相较于蛋白、脂肪是廉价能量来源，是对虾配合饲料原料的首要选择[1]。面粉和玉米淀粉是对虾饲料中常用的碳水化合物，且玉米淀粉由支链淀粉和直链淀粉两种高分子组成，在对虾饲料中玉米淀粉较其他糖源在饲料加工过程中有明显的优势[2]。对虾饲料中主要能源是脂肪，Akiyama 等[3]研究发现，凡纳滨对虾商业饲料中脂肪的推荐量为6.0%～7.5%，最高水平为10%，饲料中过多的脂肪会影响对虾的正常生长。

饲料中非蛋白能量不充足时，蛋白质为能量代谢满足机体的需求[4-5]。高效能量饲料包括充足的非蛋白能量（脂肪和碳水化合物），能够使蛋白质更多地用于机体的生长，而非蛋白能量用于机体的能量消耗[6-7]。大多数学者研究发现，对虾饲料中的脂肪对蛋白质的沉积率没有太大影响[8-9]，而碳水化合物（如淀粉），作为非蛋白能源对蛋白却有一定的节约作用[10-11]。仅有少量文献报道淡水的罗氏沼虾的最适碳水化合物脂肪比为4∶1[12]，而马氏沼虾最适碳水化合物脂肪比为3∶1[13]。

本试验探究盐度30 mg/kg 时，饲料中糖和脂肪的比例对凡纳滨对虾生长、生理生化指标、体成分的影响，全面分析糖脂的比例对凡纳滨对虾的生长作用，以期丰富凡纳滨对虾养殖的实用资料，并为凡纳滨对虾饲料研制和饲料配方优化提供科学的参考依据。

1 材料和方法

1.1 试验饲料

以鱼粉、豆粕为主要蛋白源，鱼油、磷脂为脂肪源，面粉、玉米淀粉为碳水化合物源配制6 个等氮等能饲料，蛋白质水平为41%，糖脂比分别为4.01∶1、3.29∶1、2.78∶1、2.21∶1、1.75∶1、1.42∶1，饲料配方见表1。用双螺杆压条机挤压出直径分别为1.0 mm和1.5 mm 两种粒径的饲料。90 ℃熟化30 min，然后取出饲料，放置阴凉处晾干。晾干后的饲料粉碎成约3 mm 长的颗粒，用封口塑料袋封袋，贮存于-20 ℃的冰柜中待用。

1.2 对虾养殖与环境管理

试验在广东湛江粤海饲料实验基地进行。试验虾来自广东粤海育苗场，平均初始体重为0.81 g，海水盐度为30 mg/kg。试验共6 个处理，每个处理设3 个重复。每天4 次投喂，按体重6%～8%投饵。饲养期间，水温（26.5±2.0） ℃，连续充氧，溶氧为6 mg/L 以上，pH为7.8～8.5，氨氮含量小于1 mg/L。

1.3 样品采集与分析

试验结束前24 h停止投料，计数并称重。试验结束后，从每桶中随机取8 尾虾用于体成分分析；随机取10 尾虾称重后，分离肝胰腺，即刻冻存。饲料和对虾常规分析全部采用AOAC 的方法[14]。将样品于105 ℃烘至恒重测定水分含量；粗蛋白含量采用半微量凯氏定氮法（总氮×6.25）；粗脂肪含量采用索氏抽提法（以石油醚为提取液）；将样品在马福炉中灼烧（550 ℃）24 h 测定灰分含量；淀粉为国标方法检测（GB/T 20194—2018）。成活率（%）=100×试验末虾尾数/试验初虾尾数特定生长率（SGR，%/d）=100×ln 末均重-ln 初均重/试验天数

饵料系数（FCR）=投入饲料量（g）/[末均重(g)-初均重（g）]

蛋白效率（PER）=体重增加量（g）/蛋白质摄入量（g）

1.3.1 肝胰腺消化酶及血淋巴生理生化指标的测定

饲养试验结束后，对虾饥饿24 h，用1 mL 的无菌注射器自对虾头胸甲后插入心窦抽取血淋巴，4 ℃静置过夜，然后4 ℃转速为5 000 r/min冷冻离心10 min，分离的血浆贮存于-70 ℃。肝胰腺中的蛋白酶、己糖激酶、淀粉酶（碘-淀粉比色法）、肝糖原含量使用南京建成生物工程研究所有限公司试剂盒测定,上述各测定方法均有改进。血氨（HAC）、血蛋白（HP）由中山大学医学院检验；血浆生化指标使用血液自动生化分析仪（Hitachi 7170； Hitachi， Tokyo， Japan）测定。

1.3.2 数据统计分析

数据以“平均值±标准误”表示，试验数据用SPSS 20进行处理，经单因子方差分析后，采用Duncan’s 进行比较检验均值的差异显著性。P＜0.05 为差异显著判断标准。

2 结果与分析

2.1 饲料糖脂比对凡纳滨对虾生长的影响

由表2 可知，投喂糖脂比为3.29∶1 的饲料组凡纳滨对虾成活率最高，显著高于糖脂比为2.21∶1、1.42∶1 的饲料组（P＜0.05）。投喂糖脂比为2.78∶1的饲料组对虾有最高的特定生长率，显著高于糖脂比为4.01∶1、3.29∶1的饲料组（P＜0.05）。

表2 饲料糖脂比对凡纳滨对虾生长的影响

2.2 饲料糖脂比对凡纳滨对虾淀粉酶、己糖激酶、肝糖原、血糖、血氨、血蛋白的影响

由表3可知，投喂糖脂比为4.01∶1的饲料组凡纳滨对虾淀粉酶活性最高，显著高于糖脂比为1.75∶1、1.42∶1的饲料组（P＜0.05）。投喂糖脂比为4.01∶1的饲料组凡纳滨对虾己糖激酶活性最高，显著高于其余各组。投喂糖脂比为3.29∶1的饲料组凡纳滨对虾肝糖原含量最高，显著高于糖脂比为1.42∶1的饲料组（P＜0.05）。

表3 饲料糖脂比对凡纳滨对虾肝胰腺中淀粉酶、己糖激酶、肝糖原的影响

由表4 可知，饲料中的糖脂比对血淋巴中的血氨影响不显著（P＞0.05）。投喂糖脂比为1.42∶1 的饲料组凡纳滨对虾血蛋白浓度最高，显著高于糖脂比为1.75∶1 的饲料组（P＜0.05）。投喂糖脂比为4.01∶1的饲料组凡纳滨对虾血糖含量最高，显著高于糖脂比为1.42∶1的饲料组（P＜0.05）。

表4 饲料糖脂比对凡纳滨对虾血淋巴中血氨、血蛋白和血糖的影响

2.3 饲料糖脂比对凡纳滨对虾胆固醇、三酰甘油及体成分的影响。

由表5 可知，投喂糖脂比为1.42∶1 的饲料组凡纳滨对虾胆固醇含量最高，显著高于糖脂比为4.01∶1、3.29∶1、2.78∶1、2.21∶1 的饲料组（P＜0.05）。投喂糖脂比为1.42∶1的饲料组凡纳滨对虾三酰甘油含量最高，显著高于糖脂比为4.01∶1和2.21∶1的饲料组（P＜0.05）。

表5 饲料糖脂比对凡纳滨对虾血淋巴中胆固醇和三酰甘油的影响

由表6 可知，饲料中的糖脂比对凡纳滨对虾水分、粗蛋白、粗灰分含量影响不显著(P＞0.05)。投喂糖脂比为1.42∶1 的饲料组凡纳滨对虾粗脂肪含量最高，显著高于糖脂比为4.01∶1、3.29∶1、2.78∶1的饲料组（P＜0.05）。

表6 饲料糖脂比对凡纳滨对虾体成分的影响（%）

3 讨论

通过8周的养殖试验，对虾投喂糖脂比为2.78∶1的饲料组有较高的特定生长率，同时有较低的饵料系数和较高的蛋白效率。本试验得到的适宜糖脂比为2.78∶1，这和其他甲壳类动物研究的一致。饲料中碳水化合物与脂肪的比率为3∶1 时，能够节省饲料的蛋白促进对虾机体的生长[15]，在罗氏沼虾[12]、马氏沼虾[13]、斑节对虾（Penaeus monodon）[16]和南美蓝对虾（Litopenaeus stylirostis）生产中也有类似研究。糖脂比率的减小，表明了饲料中淀粉含量的降低和脂肪的升高，从本试验结果看出，凡纳滨对虾优先利用饲料中的淀粉。在本试验条件下，饲喂同一蛋白水平的等氮等能的饲料，凡纳滨对虾优先利用饲料中的淀粉作为能量。提示在对虾商业配方饲料中，配方蛋白一定的情况下，可适量增加配方中的淀粉含量，降低配方中的脂肪，可达到节约配方成本的作用。

淀粉酶活性和饲料中的淀粉水平有着十分紧密的关系，本试验结果显示，淀粉酶活性都随着饲料中淀粉水平的降低而降低，类似的研究见于美国龙虾(Homarus americanus)[17]、锯齿长臂虾(Palaemon serratus)[18]，南美蓝对虾（L.stylirostris）[19]饲料中淀粉经淀粉酶的消化，最终产物是葡萄糖[20-21]。Rosas等[22]研究表明，南美蓝对虾（L.stylirostris）葡萄糖和淀粉酶有一定的线性关系，饲料中的碳水化合物影响对虾血淋巴中的葡萄糖，葡萄糖的浓度和饲料中的碳水化合物水平呈正相关。

食物一旦进入内脏，在内腔消化吸收食糜并运送到消化腺内部的小管内，消化腺就开始积存肝糖原[23]。Rosas 等[22]发现南美蓝对虾（L.stylirostris）肝糖原的含量受饲料中的碳水化合物的影响，当饲料中碳水化合物水平达到21%～33%时，南美蓝对虾（L.stylirostris）储存肝糖原能力达到饱和，而当饲料中碳水化合物水平达到23%时，凡纳滨对虾储存肝糖原的能力达到饱和。本试验结果显示，肝糖原浓度有先升高后降低的趋势，都在饲料中淀粉含量为20.82%时达到最大值，超过此淀粉水平，肝糖原浓度反而降低，可能是饲料中淀粉含量为20.82%是凡纳滨对虾承受的最大阈值，与Rosas等[22]研究的结果一致。

己糖激酶是糖酵解第一个酶类，但磷酸化葡萄糖的能力很低，生物体能通过糖酵解获得部分能量，可以调节葡萄糖的代谢。本试验结果显示，血糖浓度和己糖激酶随着饲料糖脂比的降低而降低，这与饲料中的淀粉含量有直接关系[24]。饲料中的糖脂比对血淋巴中的血氨影响不显著，可能是饲料中蛋白稳定，饲料中的不同的糖脂水平对其影响不大。在本试验中，血淋巴中胆固醇和三酰甘油和虾体脂肪与对虾饲料脂肪水平有关，血淋巴中三酰甘油、总胆固醇和虾体脂肪有随饲料脂肪含量的升高而升高的趋势，可能是饲料中高脂肪水平影响了对虾正常的机体代谢，多余的脂肪被沉积在血淋巴、肝胰腺和肌肉[25]。结合生长性能和消化酶活性变化趋势来看，适宜糖脂比能增强肝脏分解脂肪的能力，但随着饲料糖脂比降低至一定限度，凡纳滨对虾对脂肪的分解能力达到最高值，从而导致营养物质利用率降低，生长性能下降。

4 结论

综上所述，饲料糖脂比对于凡纳滨对虾生长性能及相关酶活性具有显著的影响，当饲料中蛋白质水平在41%，凡纳滨对虾最适淀粉和脂肪需求分别为18.97%和6.83%，最适糖脂比为2.78∶1。