血清IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP在儿童IBD早期诊断及活动性评估中的应用研究

段亚群

炎症性肠病（IBD）是一种非特异性的慢性肠道炎性疾病，包括溃疡性结肠炎（UC）、克罗恩病（CD），近年儿童IBD 患病人数急剧增长[1-2]。UC 主要损害结肠和直肠，而CD 可损害从口腔到肛门间的任意胃肠道部位，以小肠末端与结肠较为多见[3-4]。IBD 患儿以腹痛、血便、腹泻等为主要临床表现，该病发病机制较为复杂，临床尚未完全明晰，通常认为与遗传、环境、感染等多种因素联系紧密。各种引发异常免疫反应的因素均可能造成疾病发生和急性活动，异常的免疫反应会导致免疫系统攻击消化道内的正常细胞，导致肠黏膜发生炎性改变，持续受损，且慢性炎症基础上可能合并急性炎症，故炎症反应在IBD 的发生、发展中扮演重要角色[5]。白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C 反应蛋白（CRP）均为临床常见的炎症因子，但临床关于其能否用于早期诊断IBD，并对其活动性进行评估尚未形成统一共识。基于此，本研究以2020 年2 月—2023 年2 月江西省儿童医院收治的108 例IBD 患儿为研究对象，分析IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 在此类患儿中的作用，信息如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2020 年2 月—2023 年2 月本院收治的108 例IBD 患儿（UC 57 例、CD 51 例）纳入观察组，另将同期于本院行体检的84 例健康儿童纳入对照组。纳入标准：观察组诊断符合文献[6]《儿童炎症性肠病诊断和治疗专家共识》中相关标准，伴有不同程度的腹泻、恶心等表现；具有较高的依从性。排除标准：认知障碍，难以进行正常交流；合并全身性感染；凝血功能、免疫系统异常；合并传染性疾病；严重心脑血管疾病；肝肾等脏器功能不全。本研究已报本院医学伦理委员会审核通过。患儿家属对本试验知晓，并自愿签订知情同意书。

1.2 方法

标本采集：采集所有受试者的晨起空腹静脉血3 mL 置于干燥EDTA 抗凝管中，轻轻摇晃抗凝管，静置20 min 后以3 000 r/min 的速率离心10 min，分离血清和血浆后分装于1 mL 的冷冻管，置于-4 ℃冰箱保存待检。检测方法：以酶联免疫吸附法测定IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP。

1.3 观察指标及判定标准

（1）对照组与观察组各项血清指标对比。对比两组IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 差 异。（2）UC活动组、UC 不活动组及对照组各项血清指标对比。依据小儿溃疡性结肠炎活动指数（PUCAI）将UC 患儿分为UC 活动组与UC 不活动组，其中不活动：评分＜10 分；轻度活动：评分≥10 分；中度活动：评分≥30 分；重度活动：评分≥65 分[7]。分析对比三组IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 差异。（3）CD 活动组、CD 不活动组及对照组各项血清指标对比。依据小儿克罗恩病活动指数（PCDAI）将CD 患儿分为CD 活动组与CD 不活动组，其中不活动：评分0～10 分；轻度活动：评分11～30 分；中度活动：评分31～60 分；重度活动：评分≥61 分[8]。对比三组IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 差异。（4）IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 在IBD 患儿中的诊断效能。绘制受试者操作特征（ROC）曲线，分析IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 单独和联合诊断IBD 患儿的临床价值。

1.4 统计学处理

选用SPSS 20.0 分析数据。计数资料以率（%）表示，以χ2检验；计量资料以（±s）表示，两组间比较以t 检验，多组间比较以方差分析，两两比较以LSD 检验；绘制ROC 曲线，分析IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 检测诊断IBD 的效能，以曲线下面积（AUC）评估：AUC≤0.5 表明无诊断价值；0.5＜AUC≤0.7 表明诊断价值较低；0.7＜AUC≤0.9 表明诊断价值中等；AUC＞0.9 表明诊断价值较高。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组和观察组一般资料对比

对照组男43 例，女41 例；年龄6～14 岁，平均（10.31±1.05）岁。观察组男61 例，女47 例；年龄6～15 岁，平均（10.36±1.01）岁。两组性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

2.2 对照组与观察组各项血清指标对比

观 察 组 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 对照组与观察组各项血清指标对比（±s）

组别 IL-2（pg/mL） IL-6（pg/mL） IL-8（pg/mL） TNF-α（ng/mL） CRP（mg/L）对照组（n=84） 1.20±0.57 105.69±13.21 35.46±6.89 0.46±0.05 3.21±0.57观察组（n=108） 6.00±1.43 272.00±20.53 93.00±10.37 2.60±0.46 10.74±1.69 t 值 29.010 68.029 46.069 48.019 43.274 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 UC 活动组、UC 不活动组及对照组各项血清指标对比

将UC 不活动患儿归为UC 不活动组，共35 例，将中度、重度活动患儿归为UC 活动组，共22 例。三组各血清指标比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）；UC 活 动 组 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 水平均高于UC 不活动组与对照组，且UC 不 活 动 组 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 UC活动组、UC不活动组及对照组各项血清指标对比（±s）

表2 UC活动组、UC不活动组及对照组各项血清指标对比（±s）

#与对照组相比，P＜0.05；*与UC 不活动组相比，P＜0.05。

组别 IL-2（pg/mL） IL-6（pg/mL） IL-8（pg/mL） TNF-α（ng/mL） CRP（mg/L）对照组（n=84） 1.20±0.57 105.69±13.21 35.46±6.89 0.46±0.05 3.21±0.57 UC 不活动组（n=35） 5.30±0.96# 204.61±15.26# 58.96±6.38# 1.89±0.26# 6.28±1.26#UC 活动组（n=22） 8.79±1.83#* 353.49±27.46#* 145.95±13.28#* 4.31±0.69#* 18.71±1.96#*F 值 628.727 2 038.922 1 656.683 1 483.795 1 788.446 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.4 CD 活动组、CD 不活动组及对照组各项血清指标对比

将CD 不活动患儿归为CD 不活动组，共35 例，将轻度、中度、重度活动患儿归为CD 活动组，共16 例。三组各血清指标比较，差异均有统计学意 义（P＜0.05）；CD 活 动 组 的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于CD 不活动组与对照组，且CD不活动组的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 CD活动组、CD不活动组及对照组各项血清指标对比（±s）

表3 CD活动组、CD不活动组及对照组各项血清指标对比（±s）

#与对照组相比，P＜0.05；*与CD 不活动组相比，P＜0.05。

组别 IL-2（pg/mL） IL-6（pg/mL） IL-8（pg/mL） TNF-α（ng/mL） CRP（mg/L）对照组（n=84） 1.20±0.57 105.69±13.21 35.46±6.89 0.46±0.05 3.21±0.57 CD 不活动组（n=35） 5.24±1.32# 250.80±10.93# 46.62±7.56# 1.55±0.36# 6.89±1.70#CD 活动组（n=16） 5.51±1.61#* 358.98±28.47#* 146.31±14.26#* 4.05±0.53#* 17.96±1.84#*F 值 285.277 2 463.036 1 228.359 1 346.619 1 113.387 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.5 IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 在IBD 患儿中的诊断效能

ROC 结 果 显 示：IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 联合检测诊断IBD 的AUC 高于单独检测，见表4、图1、图2。

图1 IL-2、IL-6、IL-8单独及联合检测诊断IBD患儿的ROC曲线图

图2 TNF-α、CRP单独检测诊断IBD患儿的ROC曲线图

表4 IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP在IBD患儿中的诊断效能

3 讨论

IBD 是一种严重威胁人们身心健康的慢性非特异性肠道炎性疾病，其病情易反复发作，且治疗难度大[9-10]。IBD 起病较为缓慢，炎症的严重程度与发病部位不同，临床表现亦存在较大的差异[11-12]。临床尚未明晰IBD 的发病机制，一般认为是由环境、遗传等因素共同造成免疫功能紊乱，并在多种炎症因子的作用下引起的肠道黏膜屏障损伤[13-15]。积极探寻IBD 的发病机制，施以个体化的治疗手段，对于改善患儿的预后意义重大。

IL-2 通常由T 细胞生成，具有活化T 细胞，诱导细胞因子产生，促进自然杀伤细胞增殖的作用，其在增强杀伤活性及产生细胞因子方面扮演重要角色[16-17]。IL-6 是细胞因子的核心成员，能够诱导辅助型T 细胞2 免疫反应，还能够促进炎症反应，被认为是炎症持续的标志[18]。IL-8 是趋化因子家族的细胞因子，主要由巨噬细胞产生，能够传递信息、激活和调节免疫细胞，还可介导T 细胞、B 细胞活化和增殖分化[19]。TNF-α 是一种涉及系统性炎症的细胞因子，属于引起急相反应的众多细胞因子中的一员，其主要由活化的单核细胞和巨噬细胞产生，是肠道上皮增殖和凋亡的主要促炎性细胞因子，可诱导结肠上皮细胞凋亡，加快UC 的发生[20-21]。CRP 为临床常见的非特异性炎性标志物，是一种在病原菌入侵机体时，由肝脏合成的用于保护身体的急性时相反应蛋白，其通过激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而发挥作用，当机体处在炎症反应状态时，CRP 的表达会显著上升[22-23]。本研究结果显示，观察组的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于对照组，提示在IBD 患儿机体内存在强烈的炎症反应，上述炎症因子呈异常高表达水平。本研究中，UC 活动组与CD 活动组的IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 均高于UC 不活动组与CD 不活动组及对照组，表明IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 能够有效评估IBD 患儿的活动性，患儿的病情越严重，其表达水平越高。本研究ROC 曲线结果显示，IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP 联合检测诊断IBD 的AUC 高于单独检测，表明上述炎症因子联合检测能够早期及时诊断出IBD，为临床提供可靠的参考。

综上所述，IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP在IBD 患儿机体内呈异常高表达，患儿病情越重，其水平越高，联合检测能够早期诊断出IBD，并评估患儿病情的活动性。