全血和血清降钙素原检测方法的临床研究

卓惠燕,钟朋轩,李有强

(广州市番禺区妇幼保健院检验科,广东 广州 511400)

降钙素原(PCT)是由116个无激素活性氨基酸糖蛋白组成的降钙素前肽物质,其半衰期为25～30 h[1]。健康人体血浆PCT水平低于0.05 ng/mL。在受到严重寄生虫、细菌、真菌感染时,PCT水平可明显升高,若PCT>0.5 ng/mL则提示严重细菌感染[2]。PCT作为一种新的炎症指标已被广泛应用于感染性疾病的诊断、鉴别诊断、疗效监测等,并被国际脓毒症协会推荐为脓毒症的诊断和疗效评价指标[3]。

临床上主要用化学发光法、酶联免疫荧光法检测血清或血浆PCT水平[4]。检测血清PCT具有用血量大、需离心分离标本、检验周期较长等缺点,且婴幼儿患者静脉血采集难度较大。全血PCT检测可克服上述局限性。本研究探讨了采用酶联免疫荧光法检测血清PCT与采用免疫层析法检查全血PCT的临床价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 采集2022年1-3月本院住院患者的乙二胺四乙酸二钾抗凝全血(96份)及促凝血标本(96份)。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2方法 血液标本的采集参考美国临床实验室标准协会《诊断性静脉血液标本采集》[5],由专业抽血护士执行。将收集的促凝血标本以3 500 r/min离心5 min,获得血清标本。排除明显溶血、脂血和黄疸标本。血清PCT检测采用Biomerieux VIDAS30荧光免疫分析仪(酶联免疫荧光法),全血PCT检测采用i-ReaderS干式免疫分析仪(免疫层析法),i-ReaderS干式免疫分析仪由上海艾瑞德生物科技有限公司提供,试剂为仪器配套试剂,所有仪器在检测标本前均进行了仪器的校准和性能验证。

2 结 果

2.1血清和全血PCT检测结果比较 192份标本的检测结果覆盖了低值、中值、高值的范围。血清PCT水平为(5.88±0.89)ng/mL,全血PCT水平为(5.56±0.84)ng/mL,二者比较,差异无统计学意义(t=0.25,P>0.05)。

2.2血清和全血PCT检测结果的线性回归分析 以血清PCT检测数据作X轴,全血PCT检测数据作Y轴,构造的回归方程为Y=0.921X+0.163,二者具有良好的线性关系(r=0.974,P<0.05)。见图1。

图1 线性回归分析

2.3血清和全血PCT检测结果的一致性分析 血清与全血PCT检测结果平均差值为0.302,偏差处于临床可接受范围之内。差值95%置信区间(95%CI)为-3.589～4.193,4.16%的点落在95%一致性的界限之外,即数据基本落在95%CI内,提示二者一致性较好。见图2。

图2 Bland-Altman图

3 讨 论

当机体存在细菌感染时,肝脏巨噬细胞、甲状腺C细胞会合成与分泌PCT,使血液中PCT水平迅速升高,其水平可随感染程度的不同而相应升高或降低[6]。魏锋等[7]通过对76例脓毒血症和严重脓毒血症患者的病情和预后情况进行分析时发现,严重脓毒血症患者PCT水平远高于脓毒血症患者,提示随着病情严重程度的增加,脓毒血症患者血清PCT水平可逐渐升高。李龙珠等[8]研究表明,脓毒血症患者血清PCT水平高低与患者进一步发生心肌损伤的关系密切。因此,PCT可作为区别脓毒血症与非感染性原因引起的全身炎性反应的重要标志物,其在脓毒血症诊断、降低死亡率、缓解抗生素滥用等方面具有举足轻重的作用[9]。

目前,PCT的检测主要采用血浆和血清标本,这2种标本制备耗时较长,在标本量大时不利于降低检验科工作负荷,而且血清PCT检测费用相对于全血PCT检测费用高,在复查可疑结果时所带来的成本也会更高。随着临床检测技术的不断发展,全血PCT检测逐渐应用于临床,并且全血PCT相关检测仪器的精密度、准确度、线性范围、携带污染率等性能,以及与血清、血浆标本检测结果的相关性、一致性分析等研究显示,大部分全血PCT检测仪器均能达到实验室质量要求,同时满足临床需求[10-11]。张盼等[12]通过采集40例疑似感染患儿血清及末梢血标本,分别采用TZ-310型干式荧光免疫分析仪和量子点免疫荧光层析仪对标本PCT水平进行检测,结果显示,血清与末梢血PCT检测结果一致性、相关性良好。末梢血标本采血量少,检测简便,出结果快速,更适用于采血困难的婴幼儿患者。

本研究使用的i-ReaderS干式免疫分析仪,主要用于检测静脉血和末梢血C反应蛋白,也可用于检测静脉血和末梢血PCT。全血PCT检测耗时短,用量少,分析时间在15 min以内,可大大降低临床周转时间,提高报告发送速度,从而更快地发布危急值,提醒临床进行干预[13]。因此,全血PCT检测在妇幼专科医院中具有更好的应用前景。全血PCT的应用使联合检测PCT、C反应蛋白、血清淀粉样蛋白等炎症指标成为可能。联合检测炎症指标有利于指导临床抗生素的使用,能极大地提高细菌感染诊断的敏感性和特异性。贾文婷等[14]通过对51例细菌性感染新生儿及60例非细菌性感染新生儿进行全血PCT、超敏C反应蛋白水平检测时发现,PCT联合超敏C反应蛋白检测可进一步提高诊断细菌感染性疾病的准确性和特异性。

本研究结果显示,血清PCT水平略高于全血PCT水平,提示采用不同检测方法可使结果存在一定偏差,但偏差处于临床允许误差内。PCT主要存在于血清或血浆中,血液红细胞比容的大小影响了全血标本中血清或血浆PCT水平。血细胞比容大,则单位体积中参与反应的血清或血浆PCT相对减少,反之亦然[15-16],这也是导致全血PCT检测结果略低于血清PCT检测结果的原因之一。本研究结果显示,血清与全血PCT检测结果无显著差异,二者具有良好的线性关系(r=0.974,P<0.05)。提示血清PCT检测与全血PCT检测具有较好的相关性。在进行一致性检验时,本研究采用了Bland-Altman分析法。该方法综合了检测过程中的随机误差和系统误差,是评价一致性检验的较好方法。本研究结果显示,血清与全血PCT检测结果的绝大多数差值位于95%一致性界限内,偏差均值为0.302,处于临床上可接受范围,提示这2种检测结果具有一致性。这与SHENG等[17]研究结果相似,该研究指出全血PCT检测与常规血清和血浆PCT相比,未见显著不同结果,而且前者在儿科和其他临床科应用具有一定优势。

综上所述,采用免疫层析法检测全血PCT与采用酶联免疫荧光法检测血清PCT具有较好的一致性。对怀疑有血液感染且采血困难的婴幼儿患者、贫血患者等,采用全血PCT检测方法能更快、更好地判断病情。