不同饵料对克氏原螯虾亲虾繁育性能的影响

黄彬胜 王大鹏 唐章生 高雪梅 李 青 卢智发 项桂德 陆专灵　

不同饵料对克氏原螯虾亲虾繁育性能的影响

黄彬胜1,2王大鹏1,2唐章生1,2高雪梅1,2李 青1,2卢智发1,2项桂德1,2陆专灵1,2

（1.广西壮族自治区水产科学研究院，广西 南宁 530021；2.广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，广西 南宁 530021）

开展了鱼肉（YR）、猪肝（ZG）、黄豆（HD）和饲料（SL）四种不同饵料对克氏原螯虾养殖水体、抱卵率及卵巢发育指数的试验研究，比较分析了在YR中添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亚硒酸钠维生素E（0.02%）对克氏原螯虾抱卵率及抱卵时间影响。试验结果显示：YR、ZG组的氨氮值显著高于HD、SL组，溶解氧显著低于HD、SL组（＜0.05）；YR组卵巢发育指数显著高于HD、SL组（＜0.05）；YR组抱卵率最高（58.33%），SL组抱卵率最低（11.11%），YR和ZG组的抱卵率显著高于HD和SL组（＜0.05）；YR中添加dl-α-生育酚乙酸酯或亚硒酸钠维生素E和对照组相比显著提高抱卵率并且短抱卵时间（＜0.05）。YR添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亚硒酸钠维生素E（0.02%），能促进克氏原螯虾雌虾的卵巢生殖发育，提高抱卵率，缩短抱卵时间。

克氏原螯虾；饵料；抱卵率；水质；卵巢发育指数

引言

克氏原螯虾（Procambarus clarkii），属于节肢动物门，螯虾科，原螯虾属，原产于墨西哥北部和美国南部，俗称淡水小龙虾[1]，具有环境适应力强、杂食性、生长快、成熟早、繁殖力高、耐低温低氧和病害少等特点，是产业扶贫和乡村振兴的主推品种。克氏原螯虾营养丰富、肉质鲜嫩、味道鲜美，成为目前市场上畅销的水产品。近年来，我国克氏原螯虾的市场需求量逐步提升，养殖面积不断增加，养殖模式呈多样化，其中由于克氏原螯虾稻田综合种养模式简单、基础设施易改造、可操作性强等特点，我国多数省份都在大面积推广。

在自然条件下，克氏原螯虾出苗时间集中在11月至次年4月，广西因气候优势主推冬闲田养殖模式，秋冬季小龙虾苗种供应紧张，是制约产业发展的主要问题之一。目前，克氏原螯虾的工厂化繁育，一般从9月开始选种交配，10月抱卵，11月孵化，冬前即进入稚苗培育阶段[2]，如能够提早在秋季大量培育出克氏原螯虾苗种，广西则可以利用地域优势在春节前后大量上市商品虾，将会产生极大的经济效益。因此，开展克氏原螯虾繁育性能的研究是行业密切关注的焦点，本研究通过开展鱼肉（YR）、猪肝（ZG）、黄豆（HD）和饲料（SL）四种基础饵料对克氏原螯虾生殖及水质氨氮的试验研究，以及添加dl-α-生育酚乙酸酯或亚硒酸钠维生素E对克氏原螯虾抱卵率和抱卵时间的影响的试验研究，为克氏原螯虾室内亲虾培育期的饵料选择提供科学数据，为克氏原螯虾早苗繁育提供科学借鉴。

1 材料与方法

1.1 材料

试验地点为广西北海市合浦县公馆镇合浦冠新农业科技有限公司铁山稻虾养殖基地，基础饵料投饲试验时间从2020年8月29日开始至2020年10月24日结束，共55天；促性腺发育添加剂试验时间从2020年8月29日开始，至2020年10月14日结束，共45天。

试验车间内设置有养殖塑料筐（长46 cm×宽34 cm×内高13 cm，有白色筐门，可打开方便投喂饵料和进行试验操作，靠近筐门内沿处呈现小斜坡，筐内有溢水口，水深最深为7 cm，浅水区水深2 cm）底部呈漏斗状可排干水，8个试验用的养殖筐叠架成1列。每个养殖筐上部接进水管，底部的排水口处接排水管，每排养殖筐用同一根进水管，同一根出水管，同一排养殖筐可同时进水、同时排水，筐与筐之间不会相互影响（图1）。试验车间内装有空调，可通过调节车间内气温，使水温维持(23±0.5) ℃，试验用的克氏原螯虾雌虾取自养殖基地稻虾田，存放于大水池暂养5天后，选择大小规格为(25±1) g，附肢完好，体格健康的雌虾放入养殖塑料筐中，每筐放6只，根据实验设置需要共投放试验虾252只。

图1 试验车间

1.2 方法

基础饵料投饲试验，共设置4个饵料组，每个饵料组设3个平行组，每组2个养殖筐共12只虾。四个饵料组分别为：鱼肉组（YR）、猪肝组（ZG）、黄豆组（HD）和饲料组（SL）。将新鲜罗非鱼肉、新鲜猪肝、黄豆（浸泡12 h以上）、人工配合饲料打碎成颗粒制作为试验饵料。日常管理：每天下午5时投喂饵料，记录投喂量，次日上午8时采用纳氏试剂光度法测定各筐水体氨氮值并记录，采用衡欣AZ86031水质检测仪检测水体的溶解氧，9时捞出残饵碎屑称重记录残饵重量，每日换水一次，换水量100%；每日观察记录雌虾吃食和抱卵情况，发现有抱卵，及时记录并捡出来单独饲养。试验结束后，用剪刀镊子取出各组未抱卵虾的卵巢并称重（湿重）。

促性腺发育添加剂试验，试验以鱼肉为基础饵料，设置3个实验组，分别为T1组（添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%））、T2组（添加亚硒酸钠VE（0.02%））、T3（对照组不添加），每组设3个平行组，每个平行组12只虾。将新鲜罗非鱼肉打碎制作成基础饵料，然后根据试验设置，按基础饵料重量的0.02%分别添加dl-α-生育酚乙酸酯、亚硒酸钠VE制作成实验组所需饵料。

1.3 试验指标的测定

卵巢发育指数＝雌虾卵巢湿重／雌虾体湿重×100％

抱卵率＝抱卵虾个数/雌虾个数×100％

1.4 数据处理

利用SPSS 22.0软件进行数据分析，采用单因素方差分析法One-Way ANOVA对试验数据进行方差分析，用多重比较LSD检验法，＜0.05表示差异显著，＞0.05表示差异不显著。

2 结果与讨论

2.1 各饵料组中克氏原螯虾抱卵虾个数、卵巢发育指数、氨氮、溶解氧的数值统计

在基础饵料投饲试验中，单个饵料组有2个养殖筐，每筐放置6只雌虾，共12只。试验期间，每日上午8时检测记录各组养殖筐中水体的氨氮、溶解氧，然后排干净每组筐内水体，后加入新的养殖用水（氨氮值＜0.02 mg/L，溶解氧＞7.60 mg/L），换水量100%。在试验进行34天后，开始有雌虾抱卵并转移出筐外养殖，为避免因筐内小龙虾数量不同而对氨氮、溶解氧数值产生额外影响，这两种水质指标只选用抱卵前（实验前33天）的数据进行分析处理。试验共进行55天，获得抱卵虾52只，抱卵虾数量、卵巢发育指数、氨氮、溶解氧平均值统计如表1所示。

表1 各饵料组抱卵虾数量、卵巢繁育指数、氨氮、溶解氧数值统计表

注Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为相同饵料平行组；投饲试验结束后，由于YR（Ⅲ）鱼肉组未抱卵雌虾最少（4只），因此各组随机抽选4只，称整只雌虾的湿重，单独取出卵巢称卵巢湿重（如图2），计算各组卵巢发育指数平均值。

图2 解剖雌虾，取出整个卵巢组织

2.2 各饵料组中水质氨氮、溶解氧、抱卵率、卵巢发育指数方差分析

各饵料组养殖筐内不放置增氧设施，每日换水后各组养殖筐内水体的溶解氧＞7.60 mg/L，氨氮值＜0.02 mg/L，筐与筐之间水质指标不会相互影响。养殖筐内容积较小，水体少，溶解氧24 h最低值（0.28 mg/L）较低，但克氏原螯虾没有出现由于缺氧导致死亡的情况，其原因在于养殖筐中水位较浅，小龙虾可将头甲部露出水面，直接利用空气中的氧。经方差分析如表2，可知：YR、ZG两组的氨氮值显著高于HD、SL组（＜0.05），且YR、ZG两组的溶解氧显著低于HD、SL组（＜0.05）。说明一定时间内，投饲鱼肉或猪肝水质中氨氮值易升高，残饵及小龙虾饲用该类饵料后粪便分泌物等易消耗水体中溶解氧，会加速养殖水质的恶化；而投饲黄豆或饲料可以维持较好的水质。

表2 各饵料组氨氮、溶解氧、抱卵率、卵巢发育指数方差分析

注同行数据肩标不同字母a、b、c表示差异显著（＜0.05）；肩标相同字母表示差异不显著（＞0.05）。

同时表2显示，YR组的抱卵率（58.33%）远高于其他各组，SL组的抱卵率最低（11.11%），YR和ZG组对比HD组能显著提高抱卵率（＜0.05）；YR和ZG组对比SL组能显著提高抱卵率（＜0.05）；HD组对比SL组能显著提高抱卵率（＜0.05）；YR和ZG两组对抱卵率的影响相互对比差异不显著（＞0.05）。YR组卵巢发育指数显著高于HD组和SL组（＜0.05），而ZG组卵巢发育指数与其他各组差异不显著。

2.3 促性腺发育添加剂对克氏原螯虾抱卵率及抱卵时间的影响

以鱼肉为基础饵料，T1组［添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）］、T2组［添加亚硒酸钠VE（0.02%）］、T3（对照组不添加），试验共进行45天，收集到抱卵虾57只，组内抱卵率达到30%用时天数d最少为33天，各实验组数据记录如表3。

表3 添加剂试验各组收获抱卵虾数量及组内达到30%抱卵率的用时天数

注Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为相同添加剂平行组。

通过方差分析表4可知，鱼肉中添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亚硒酸钠VE（0.02%）在养殖繁育期，两种添加剂对比无添加剂组T3可显著增加克氏原螯虾群体抱卵比例（＜0.05），提高抱卵率；两种添加剂作用效果相互对比差异不显著（＞0.05）。预设试验组内克氏原螯虾群体到达30%抱卵率为时间节点，鱼肉中添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亚硒酸钠VE（0.02%）两个实验组的克氏原螯虾群体达到指定抱卵率所用天数显著少于对照组（＜0.05）；两种添加剂的作用效果相互比较差异不显著（＞0.05）。

表4 添加剂对抱卵率及抱卵时间的影响方差分析

注同行数据肩标不同字母a、b表示差异显著（＜0.05）；肩标相同字母表示差异不显著（＞0.05）。

2.4 讨论

自然条件下，克氏原螯虾杂食性，以食草和小型水生动物为主，本研究在饵料对比试验中发现，克氏原螯虾喜食鱼肉，且食鱼肉可加快其生殖发育。因此，人工养殖繁育期，可给克氏原螯虾投喂新鲜鱼肉，促进其性腺发育。在养殖生产过程中，养殖规模大，投喂量大，新鲜鱼肉难以满足需求，此时可选择投喂冰鲜饵料鱼，但由于这类冰鲜饵料鱼常带有致病菌，克氏原螯虾在摄食后易患病，如肠炎病及肝胆肿大等，因此在投喂此类冰鲜饵料鱼前，先进行消毒杀菌，可在解冻冰鲜鱼时选用水产专用消毒杀菌类药液进行杀菌处理。

在克氏原螯虾养殖过程中，投喂鱼肉易导致水质氨氮值升高，溶解氧易消耗，养殖水体易恶化，因此在养殖生产过程中需控制好鱼肉的投喂量。在研究冰鲜下杂鱼与配合饲料对大口黑鲈养殖水质指标的影响中，也发现冰鲜鱼对水质的氨氮、总氮、总磷等指标的影响比配合饲料大[3]。刘国兴等[4]认为养殖克氏原螯虾的水体水质指标（总氮、总磷、氨氮和亚硝酸盐氮）随放养密度增大而升高，因此在亲虾的室内培育过程中，应控制好养殖密度，通过多种方法调节好养殖水质各项指标，通过投喂鱼肉，加快克氏原螯虾的生殖发育。

在动物饵料添加剂中，维生素E作为一种天然的生物抗氧化剂，可预防细胞膜和亚细胞膜中磷脂、胆固醇等多种不饱和脂肪酸的过氧化反应，从而影响动物的性腺成熟、产卵、胚胎发育和孵化等[5]；同时维生素E是一种脂溶性维生素，是4种形态生育酚和4种形态生育三烯酚的总称，能有效清除机体内产生的过多的自由基，降低因自由基过多而导致的氧化应激及疾病发生率，提高动物免疫力与生产性能，其中活性最高的是α-生育酚[6-10]。考虑到维生素E和α-生育酚都能影响克氏原螯虾抱卵，为对比两者对克氏原螯虾抱卵率的影响值，做了对比研究试验，实验结果显示，两种添加剂能促进克氏原螯虾生殖发育，促进产卵，这与前人的研究相符合。试验不足之处是试验过程没有对这两种添加剂设置用量梯度，直接选择用量为0.02%，主要是基于有研究表明基础饵料中添加VE的量为0.02%时，可提高单个克氏原螯虾的产卵量，同时提高抱卵雌虾的比例[11]。而关于dl-α-生育酚乙酸酯单独用于促进克氏原螯虾繁育生殖用量的研究较少，在用量梯度方面还要进一步研究。在两者用量相同，均为0.02%的情况下，可增加克氏原螯虾抱卵率同时缩短抱卵时间，两者使用的效果对比差异不显著。

3 结论

本研究开展了四种饵料对克氏原螯虾养殖水体的氨氮和溶解氧、卵巢发育及抱卵率的影响试验；同时开展dl-α-生育酚乙酸酯、亚硒酸钠维生素E两种促性腺发育添加剂对克氏原螯虾抱卵率以及抱卵时间的影响试验。实验共进行55天，试验结果表明，投饲鱼肉添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亚硒酸钠维生素E（0.02%）可以促进克氏原螯虾雌虾的卵巢生殖发育，缩短雌虾抱卵的时间同时提升群体抱卵率。该饵料制作成本低，容易获得，操作简单，在养殖繁育期可以推广应用，使出苗时间提前，解决部分地区苗种供应难的问题，为虾农创造更大的养殖收益。

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Effects of Different Baits on the Breeding Performance of Parent Procambarus Clarkii

The effects of fish (YR), pig liver (ZG), soybean (HD) and feed (SL) on water, ovulation rate and ovarian development index of Procambarus clarkii were studied. The effects of adding DL-α-tocopherol acetate (0.02%) or sodium selenite vitamin E (0.02%) to YR on ovulation rate and ovulation time of Procambarus clarkii were compared and analyzed. The results showed as follows: the ammonia nitrogen value in YR and ZG groups was significantly higher than that in HD and SL groups, and the dissolved oxygen was significantly lower than that in HD and SL groups (<0.05). The ovarian development index in YR group was significantly higher than that in HD and SL groups (<0.05). The ovulation rate of YR group was the highest (58.33%), and the ovulation rate of SL group was the lowest (11.11%) . The ovulation rate of YR and ZG groups was significantly higher than that of HD and SL groups (<0.05). The addition of DL-α-tocopherol acetate or sodium selenite vitamin E in YR significantly increased the ovulation rate and shorter ovulation time compared with the control group (<0.05). In conclusion, the addition of DL-α-tocopherol acetate (0.02%) or sodium selenite vitamin E (0.02%) in YR can promote the ovarian reproductive development, increase the rate of ovulation and shorten the time of ovulation in female Procambarus clarkii.

Procambarus clarkii; bait; ovulation rate; water quality; ovarian development index

S963

A

1008-1151(2023)09-0085-04

2022-12-20

广西创新驱动发展专项（桂科AA20302019-2）。

黄彬胜（1988－），男，广西壮族自治区水产科学研究院助理农艺师，从事水产苗种饵料培育技术研究工作。

陆专灵（1982－），男，广西壮族自治区水产科学研究院副研究员，博士，从事水产苗种繁育技术研究工作。