上饶市献血人群戊型肝炎病毒感染情况调查

余司华 蔡县成 吕年德 何辉 刘芳菲 徐申 王茜

【摘要】  目的    了解上饶市献血人群戊型肝炎病毒（HEV）感染情况及分布特征。方法    留取上饶市中心血站2021年2月—2022年4月46 837例无偿献血者的血液样本，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HEV-IgM抗体，HEV-IgM阳性样本进行逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测HEV-RNA；采用整群抽样方法，从46 837例献血者中抽出8 449例留取样本進行HEV-IgG抗体检测。结果    本地区献血人群HEV-IgM和IgG阳性率分别为0.25%（117/46 837）、20.52%（1 734/8 449），检出HEV-RNA阳性1例，HEV-RNA总体阳性率为0.002%（1/46 837）。HEV-IgM阳性率在不同性别、血型、学历和献血次数间差异无统计学意义（P>0.05），随着年龄增长，阳性率显著升高（P<0.05）。HEV-IgG阳性率在不同性别和血型间差异无统计学意义（P>0.05）；随着年龄增长，献血次数的累积以及学历下降，阳性率均显著升高（P<0.05）。HEV-IgM阳性结果S/CO值大部分在1.00～3.00区间（87.18%）；HEV-IgG阳性结果S/CO值分布跨度较大，以6.01～53.00区间（47.58%）为主。结论    上饶市献血人群HEV感染率较低，但HEV经输血传播仍有一定风险，本次研究为血液筛查策略提供了数据支持。

【关键词】  献血人群；戊型肝炎病毒；IgM；IgG

Investigation on hepatitis E virus infection among blood donors in Shangrao city

Yu Sihua，Cai Xiancheng，Lv Niande，et al. The Center Blood Station of Shangrao City，Shangrao，Jiangxi  334000

【Abstract】  Objective    To understand the infection and distribution characteristics of hepatitis E virus（HEV）among blood donors in Shangrao City. Methods    The blood samples of 46，837 unpaid blood donors from February 2021 to April 2022 were collected.Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）was used to detect HEV-IgM antibodies，and HEV-IgM positive samples were subjected to reverse transcription polymerase chain analysis.Reaction（RT-PCR）was used to detect HEV RNA；using cluster sampling method，8449 samples were drawn from 46837 blood donors for HEV-IgG antibody detection. Results    The positive rates of HEV-IgM and IgG among blood donors in this area were 0.25%（117/46837）and 20.52%（1734/8449），respectively.One case was positive for HEV RNA，and the overall positive rate for HEV RNA was 0.002%（1/46837）.There was no significant difference in the positive rate of HEV-IgM among different genders，blood types，educational backgrounds and blood donation times（P>0.05）.The positive rate increased significantly with age（P<0.05）.There was no significant difference in the positive rate of HEV-IgG among different genders and blood types（P>0.05）；with the increase of age，the accumulation of blood donation times and the decrease of educational background，the positive rate increased significantly（P<0.05）.Most of the S/CO values of HEV-IgM positive results were in the range of 1.00 to 3.00 （87.18%）；the distribution of S/CO values of HEV-IgG positive results was large，mainly in the range of 6.01 to 53.00（47.58%）.Conclusion    The infection rate of HEV among blood donors in Shangrao City is low，but there is still a certain risk of HEV transmission through blood transfusion.This study provides data support for the blood screening strategy.

【Key Words】  Blood donors；Hepatitis E virus；IgM；IgG

中图分类号：R446.11        文献标识码：A        文章编号：1672-1721（2023）13-0119-04

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.13.037

戊型肝炎是由戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）感染引起的以肝脏实质细胞坏死为主的病毒性肝炎，主要发生于亚洲、南美洲、非洲等发展中国家，我国也是戊肝高流行区之一，自1982年印度出现水源污染导致急性肝炎暴发而被发现，至今已报道暴发流行不少于20次，最大一次流行是发生于1986—1988年新疆南部，近12万例感染者，死亡700多人。大部分戊肝感染者临床症状不明显，根据目前的献血者健康检查标准，献血前征询及体检难以甄别，孕妇、器官移植患者和免疫缺陷等患者都是主要的输血对象，且感染HEV会出现较严重情况，例如妊娠晚期孕妇输注HEV感染的血液会导致感染HEV，易发展为重症肝炎，从而导致肝功能衰竭，易发生母婴死亡，并且病毒可经垂直传播感染后代[1]，HEV经输血传播风险的研究与评估是有必要的。本次调查通过对上饶市献血人群HEV抗体筛查及核酸检测，了解HEV感染情况及分布特点，为保障输血安全研究提供依据。

1    资料与方法

1.1    标本来源    研究对象为上饶市中心血站2021年2月—2022年4月无偿献血者46 837例，男26 221例，女20 616例，男女比例1∶0.79，年龄18～60岁；留取静脉血5 mL，乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝，3 000 r/min离心15 min后，2～8 ℃保存过夜，第二天进行血站常规项目和戊型肝炎病毒检测，所有样本均进行HEV-IgM抗体筛查，其中抽样8 449份进行HEV-IgG抗体筛查。

1.2    试剂与仪器    HEV-IgM筛查试剂由英科新创（厦门）科技股份有限公司提供，批号为2020127123、2021047107、2021087116、2021117120；HEV-IgG筛查试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供，批号为EG20201105B、EG20210201B；戊型肝炎病毒核酸檢测试剂盒由湖南圣湘提供，批号为KY202100。仪器为瑞士HAMILTON STAR全自动加样系统、FAME/2 420全自动酶免处理系统和上海宏石SLAN荧光定量PCR仪。

1.3    方法    采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对样本进行HEV-IgM及HEV-IgG抗体筛查，对HEV-IgM抗体筛查阳性样本进行RT-PCR检测HEV- RNA。

1.4    检测判读

1.4.1    HEV抗体检测判读    严格按照试剂说明书要求编写操作规程，设定判读规则：阴性对照A值≤0.1（若有1孔阴性对照孔A值大于0.1，应舍弃；若2孔或2孔以上阴性对照孔A值大于0.1，应重复试验），样本A值≥临界值（CUTOFF）为HEV-IgM或IgG抗体阳性，样本A值<临界值（CUTOFF）为HEV-IgM或IgG抗体阴性。

1.4.2    HEV-RNA检测判读    样本Ct值≤38，报告为HEV-RNA阳性，样本Ct值>38或无Ct值的样本，报告为HEV-RNA阴性；内标Ct值>40或无显示，则该样本的检测结果无效，应查找并排除原因，并对此样本进行重复试验。

1.5    统计学方法    使用SPSS20.0统计学软件进行数据处理，计数资料以百分比表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2    结果

2.1    46 837份样本HEV-IgM筛查结果显示117份HEV-IgM阳性，阳性率0.25%，在不同性别、血型、学历和献血次数间差异无统计学意义（P>0.05），随着年龄增长，阳性率明显升高（P<0.05），见表1。

2.2    8 449份样本HEV-IgG筛查结果显示1 734份HEV-IgG阳性，阳性率20.52%，在不同性别和血型间差异无统计学意义（P>0.05），随着年龄增长、献血次数的累积以及学历下降，阳性率均明显升高（P<0.05），见表2。

2.3     117份HEV-IgM阳性结果S/CO值（样本A值/CUTOFF）分布显示，102份在1.00～3.00区间，占比87.18%；11份在3.01～6.00区间，占比9.40%；4份在6.01～9.00区间，占比3.42%。1 734份HEV-IgG阳性结果S/CO值有469份在1.00～3.00区间，占比27.05%；440份在3.01～6.00区间，占比25.37%；825份在6.01～53.00区间，占比47.58%，见表3。

2.4    117份HEV-IgM阳性样本经戊型肝炎病毒核酸检测，检出HEV-RNA阳性1份，总体阳性率为0.002%（1/46 837），为合并HEV-IgG阳性，图1、图2。

3    讨论

近些年HEV经血液传播的研究越来越受重视，血液安全备受关注。在日本（北海道地区）、英国和一些欧洲国家等已经或即将开始对部分或者全部无偿献血者血液样本进行HEV筛查[2]，2014年英国报道了18例患者由于输注了HEV-RNA阳性的血液制品感染 HEV[3]，国内陆续有多个地区对无偿献血人群HEV抗体及核酸检测进行研究报道。本次调查结果显示，上饶市献血人群HEV-IgM/IgG阳性率为0.25%/20.52%，均低于湖州1.5%/41.7%[4]、温州0.92%/33.28%[5]、深圳1.24%/22.15%[6]、重庆1.67%/49.19%[7]等地区；HEV-RNA总体阳性率为0.002%，在全国处于较低水平，上饶市献血人群引起戊型肝炎病毒血症相对较少，与本地区大力推行环卫工作有关。2016年，上饶市委、市政府提出“巩固省级卫生城市、争创国家卫生城市”目标，大力开展城乡环境卫生整洁行动，上饶市于2021年1月正式被评为“国家卫生城市”，很大程度上改善了全市的环境卫生状况。

酶联免疫吸附试验（ELISA）是目前临床上常用的传染性疾病指标检测方法，对于ELISA试验结果，样本的S/CO值在一定程度上能反映出被测对象血液中抗体水平。本次研究发现，HEV-IgM阳性S/CO值范围比较小，在1.00～9.00范围，而IgG在1.00～53.00范围，机体感染HEV后，HEV-IgM出现早，消失也快，在发病1～2个月其滴度开始明显下降，一般在发病5个月则转为阴性，是戊肝现/近期感染的一个重要指标；而HEV-IgG则在IgM之后出现，4周后达到峰值，1年内维持高水平，后期也可检出，是戊肝慢性或既往感染的指标。绝大部分IgM抗体水平较低，S/CO值在1.00～3.00之间（占87.18%），符合IgM抗体出现早、滴度下降快的特点；极少数S/CO值在6.01～9.00之间（占3.42%）；IgG在各区间都有一定比例，且在9.01～53.00区间占多数（30.16）%，所以IgM在机体内大部分为低水平，而IgG在机体内持续时间长，水平跨度大。

HEV-RNA检测是诊断HEV感染的金标准，荧光定量RT-PCR法采用磁珠法提取血清样本中戊型肝炎病毒RNA，利用针对病毒开放读码框3（ORF 3）基因特异性RNA核酸保守区设计的一对特异性引物、一条特异荧光探针，配以PCR反应液，在荧光定量PCR仪上，应用实时荧光定量PCR检测技术，通过荧光信号的变化实现戊型肝炎病毒核酸的检测。血液中检出HEV-RNA说明血液存在HEV感染，HEV-RNA检测指标在慢性感染患者中通常有重要意义。

为了解HEV感染率在人群中分布特征，对HEV-IgM/IgG阳性率分别进行性别、年龄、血型、学历和献血次数分析发现，本地区献血人群中HEV-IgM阳性率在不同性别、血型、学历和献血次数间无显著性差异（P>0.05）；IgG阳性率在不同性别及血型间无显著性差异（P>0.05），性别和血型都不是HEV-IgM及IgG阳性率的影响因素。随着年龄增长，IgM和IgG阳性率均呈现上升趋势，与有关报道戊型肝炎在中老年中发病率较高[8]相符；不同学历间随着学历升高，IgG阳性率呈现下降趋势变化（P<0.05），与年龄增长人体免疫力下降和本地区主要为农业人口，通过粪-口途径传播概率较大有关；多次献血者比初次献血者阳性率高，与献血者多次献血，重复累积检测有关。本次调查研究未对HEV核酸阳性献血者进行基因序列分析，后期将继续进行HEV分子生物学方面的研究，以获得本地区HEV基因型分布特征相关数据。

HEV主要通过粪-口途径传播，食用未煮熟的猪肉、海产品或饮用被污染的水均易感染。随着人民生活水平的提高，农村粪便无害化处理，公共卫生条件的改善，本地区人群感染率处于较低水平。因HEV感染无特异性抗病毒治疗药物，一般以预防为主，除了注射戊肝疫苗、改善环境卫生条件，还可通过HEV抗体和核酸相结合的检测模式进行血液筛查，以降低HEV经血液传播的风险。

参考文献

[1]    刘丽，李兰英.戊型肝炎病毒与血液安全研究进展[J].疑难病杂志，2017，16（9）：963-967.

[2]    谢月娜，潘彤，刘军.戊型肝炎病毒与输血安全的研究进展[J].中国输血杂志，2020，33（4）：413-416.

[3]     HEWITT P E，IJAZ S，BRAILSFORD S R，et al.Hepatitis E virus in blood components：a prevalence and transmission study in southeast England[J].Lancet，2014，384（9956）：1766-1773.

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[5]    黄国永，王海虹，陈筱华，等.温州3 044例献血者戊型肝炎病毒血症及基因分型的研究[J].北京医学，2009，31（6）：366-368.

[6]    聂冬梅，郑欣，许晓绚，等.深圳地区献血者戊型肝炎病毒感染流行病学调查[J].热带医学杂志，2014，14（10）：1336-1342.

[7]    李维，欧阳熊妍，魏兰，等.重庆地区献血人群戊型肝炎病毒的血清学初析[J].中国输血杂志，2018，31（4）：412-415.

[8]    温丽珍，沈秦.戊型肝炎107例临床分析[J].安徽医学，2012，33（7）：874-875.

（收稿日期：2023-02-16）