25%戊菌唑水乳剂在草莓上的残留试验

秦兰香 李秉衡

戊菌唑是一种兼具保护、治疗和铲除作用的内吸性三唑类杀菌剂，是甾醇脱甲基化抑制剂，具有毒性，使用量要控制得当，因此检测农产品中的戊菌唑具有重要意义。本研究中把25%戊菌唑水乳剂施用在供试作物上，采收后检测其残留及降解情况，结果表明，药物残留量低于国家标准。

一、材料与设备

Agilent 1290-Ultivo超高效液相色谱-质谱联用仪；KQ-500B超声波清洗器；SL-2000A多功能粉碎机；XW-80A微型旋涡混合仪；Scout电子天平（百分之一）；移液枪及各种玻璃仪器。

乙腈、水、甲酸，均为HPLC级；NaCl为分析纯；Florisil选择性吸附剂（60-100目）、石墨化碳黑；啶虫脒标准品（1000±20μg/mL），北京坛墨质检科技有限公司。

草莓样品，来自日照市东港区河山镇范家官庄试验田的对照区。

二、试验与方法

1.田间试验。（1）试验地点。试验地点为山东省日照市高新区河山镇范家官庄村，土壤类型是棕壤，此地属温带季风气候，四季分明，冬无严寒、夏无酷暑。年均气温12.7℃、年均湿度72%、无霜期223d、年平均日照2533h、年均降水量874mm。实验地块的前茬作物为草莓，未曾施用过与试验药剂性质相似的农药。

（2）供试作物、品种及种植密度。供试作物为山东省日照市草莓，品种为甜宝，畦宽0.50m、畦长48.0m、畦距0.40m、株距0.16m，每畦2排，每畦排距0.15m。

（3）施药方法和器具。选择背负式电动喷雾器施药，每亩兑水50L，对植株进行均匀的喷雾处理。试验均在风速小于3m/s、气温低于40℃、施药后2h内无降雨的情况下开展。

（4）田间管理。试验期间，对供试作物的灌溉、施肥进行常规化管理，必要时可进行疏苗、疏花、疏果、耕作等操作。为确保供试作物的正常生长必须使用其他农药时，应在病虫害发生时同时在对照小区和处理小区使用剂量相同的同种农药，且该农药不能对被试农药造成分析干扰。观察作物给药后的生长情况，若有药害产生，需评估该次施药对试验项目的影响。

（5）最终残留量试验。①试验小区。试验地设计1个处理小区、1个对照小区，处理小区的面积为70m2，对照小区的面积为70m2，小区之间的隔离带为5m。试验小区标识明确，并绘制田间小区布置图，同时记录试验地点的地理位置信息等。

②施药剂量、间隔、次数、时期和用水量。处理小区按照表1的信息施药，采用其推荐剂量的最高值10mL/亩，每亩兑水50L，以植株均匀喷雾的方式施药3次，施药间隔7d。对照小区采用清水喷雾。第1次施药时作物BBCH编码为81，第2次施药时作物BBCH编码为85，第3次施药时作物BBCH编码为87。

③田间样品采样。每个试验点在最后一次施药后间隔5d、7d在处理小区分别采集2个草莓样品，5d和7d时在对照小区分别采集1个草莓样品。按试验计划的采样要求，戴一次性手套，小区边行和每行两边0.5m不采样，用对角线法在试验小区不少于12株草莓藤曼上至少采集1kg生长正常、无病害、成熟的草莓果实，装入自封袋。试验人员在采集现场对草莓样品进行简单的处理，去除果梗和附属物。将采集的样品独立分开装入自封袋中，在样品自封袋上加贴标签。标签内容包括：项目编号、样品编号、试验地点、样品名称、采收间隔期、采收日期、田间试验单位和采样人员。

2.样品运输、制备与储藏。采集的田间样品在8h内运回实验室进行样品制备，冷冻保存（低于-18℃）。到达实验室后不能立即检测的样品，应在低于-18℃的条件下储存，并连续监控其温度。将草莓样品混合均匀后，取2份各150-250g的样品贴好样品标签，A样用于检测，B样用于留样。制备好的农残样品在低于-18℃的冰箱中冷冻保存，并连续监控温度。试验结束后B样在低于-18℃条件下至少保存半年。

3.残留物检测。（1）残留物。根据《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763-2019）的规定，残留物为戊菌唑，戊菌唑在草莓上的最大残留量为0.1mg/kg。

（2）检测方法。检测方法来自《戊菌唑在草莓上的残留分析方法验证试验》（试验项目编号：FXS21003，试验报告编号：FXS21003R）。草莓样品用乙腈提取，C18吸附剂净化，用超高效液相色谱-质谱联用仪测定，定性离子和保留时间双重定性，标准曲线-外标法定量。

（3）样品检测。①标准溶液配制。以空白基质溶液为定容介质配制一系列质量浓度分别为0.001mg/L、0.005mg/L、0.010mg/L、0.020mg/L、0.050mg/L的标准溶液，在确定的方法条件下对标准溶液进行测定，每个浓度采集3个平行，以5个浓度的标准溶液绘制标准曲线。

②检测步骤。样品的提取和净化：取待测样品，放入搅拌机制成匀浆，称取匀浆试样（5±0.10）g（其质量记作M）于具塞试管中，加入50mL乙腈提取剂（提取剂加入体积记作V），超声提取15min，加入3g氯化钠，涡旋混合30s，静置后吸取2mL上清液，加入0.10g C18吸附剂，涡旋混合30s，静置后取1.0mL上清液，过0.22μm有机滤膜，测试。

质控样品的提取和净化：取对照小区的空白样品，放入搅拌机制成匀浆，称取匀浆试样（5±0.10）g（其质量记作M）于具塞试管中，添加标准物质30min后，加入50mL乙腈提取剂（提取剂加入体积记作V），超声提取15min，加入3g氯化钠，涡旋混合30s，静置后吸取2mL上清液，加入0.10g C18吸附剂，涡旋混合30s，静置后取1mL上清液，过0.22μm有机滤膜，测试。

仪器条件：仪器：Agilent 1290-Ultivo超高效液相色谱-质谱联用仪；色谱柱：Eclipse Plus C18，1.8μL，2.1mm×50mm；柱温：35.0℃；进样量：5μL；流动相预处理：超声脱气；流动相A：0.1%甲酸缓冲液；流动相B：乙腈；梯度洗脱条件见表2；离子源：AJS-ESI；扫描方式：MRM模式；气体温度：250℃；气体流速：7.0L/min；鞘气温度：300℃；鞘气流速：11.0L/min；MS2 Heater：65℃；MS1 Heater：65℃；喷雾：15.0psi；MRM质谱条件见表3。

4.质控样品。将本试验2个试验点的农残样品当作一个批次进行检测，设置2个质控样品（理论添加浓度为0.05mg/kg），分别以2个试验点的对照小区的草莓样品为基质，加入标准溶液，放置30min后，按照检测步骤，同一批次上机进行检测。

5.定性和定量方法。采用保留时间（3min）及定性离子对（284.0/158.9）定性；采用标准曲线-外标法定量（定量离子对284.0/69.9）。

三、结果与讨论

1.质控样品结果。质控样品戊菌唑的回收率为94%、92%。标准曲线相关性和质控样品的回收率均符合残留检测要求，能满足《农作物中農药残留试验准则》（NY/T 788-2018）对残留检测方法的相关要求。

2.最终残留量试验结果。2021年在山东省日照市的最终残留试验结果中，用25%的戊菌唑水乳剂，10mL/亩的制剂量施药3次，施药间隔7d，安全间隔期5d。最终残留样品的采收间隔期为5d、7d，经检测，试验点草莓中戊菌唑平均残留量为0.038mg/kg、0.018mg/kg，低于《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763-2019）规定的草莓上戊菌唑的MRL值（0.1mg/kg）。

作者简介：秦兰香（1978-），女，汉族，山东日照人，高级工程师，大学本科，研究方向为林业。