1 例犬吉氏巴贝斯虫病继发胰腺炎的诊治

杜依洋，李思洁，马陈淑，覃一峰*

（ 1. 广西大学动物科学技术学院，广西 南宁 530004 ；2. 南京农业大学动物医学院，江苏 南京 210018 ； 3. 扬州大学兽医学院，江苏 扬州 225009 ）

巴贝斯虫病是一种经硬蜱传播的血液寄生虫疾病，病原巴贝斯虫主要寄生于脊椎动物红细胞，可感染多种动物甚至人类[1]。目前已知寄生于犬的有吉氏巴贝斯虫、犬巴贝斯虫和韦氏巴贝斯虫，我国已发现了前两种存在，并且以吉氏巴贝斯虫为主要流行虫种[2]。红细胞内的吉氏巴贝斯虫呈现多种形态，以圆点状、指环状和小杆状为主。巴贝斯虫的致病机制为虫体在红细胞内繁殖，并不断破坏红细胞的完整性[1]，导致机体缺氧、溶血，表现出间歇热、黄疸、进行性贫血、血红蛋白尿等症状。红细胞被破坏造成的组织缺氧及损伤还会促进细胞因子释放，引起广泛的炎症和多器官损伤，重症患犬常因多器官功能障碍在3～4周内死亡[3]。

目前临床中对吉氏巴贝斯虫的治疗方法主要有咪唑苯脲法、阿托伐醌法、三氮咪法。鉴于犬吉氏巴贝斯虫病的传统治疗方法在副作用及针对性上存在一定缺陷，且犬吉氏巴贝斯虫病继发胰腺炎的病例研究较少。本文记录一病例在治疗中使用阿托伐醌配合阿奇霉素，再辅助以头孢喹肟静脉滴注和输血治疗，并定期复查血涂片镜检和血常规检查，最终结果表明预后良好，以期为临床中犬吉氏巴贝斯虫感染并继发疾病的诊治提供参考。

1 病例资料

患犬为边境牧羊犬，8 岁11 个月，体重24.4 kg，雌性，未绝育，疫苗驱虫均未按推荐程序进行。主诉：患犬于6月25 日开始出现呕吐、食欲减退，缺少活力、呼吸急促，随后于6 月26 日带至他院就诊，该院诊断为犬胰腺炎。经2 d的抗生素静脉滴注后无明显好转，随即于6月29日晚转诊至南京AMC中心动物医院河西转诊中心。

2 检查结果

2.1 患犬初诊结果

2.1.1 患犬临床检查结果

患犬精神状态沉郁，表现为四肢乏力，不愿走动。体温41 ℃，呼吸频率102次/min，心率150次/min，体型肥胖。眼结膜等可视黏膜轻度黄染；毛细血管再充盈时间（CRT）＞2 s；听诊未发现病理性呼吸音或心音；期间有茶色小便；上腹部触诊紧张，有中度疼痛反应。

2.1.2 患犬血压检查结果（见表1）

表1 患犬血压检查结果Tab.1 Blood pressure test results of sick dog

患犬以侧躺体位保定，在平静状态下使用振荡式血压计测量血压。由表1可知，患犬在平静状态下的收缩压为123 mmHg、舒张压为86 mmHg，皆处于正常范围内。

2.1.3 患犬影像学检查结果（见图1、图2）

图1 患犬X射线检查结果（左侧位）Fig.1 X-ray results of sick dog （left）

图2 患犬X射线检查结果（正位）Fig.2 X-ray results of sick dog （front）

患犬进行腹部侧位和腹部正位DR 检查，观察腹腔器官有无实质性病变。由图1、图2 可知，经DR 检查均未发现明显异常。

2.1.4 患犬血常规检查结果（见表2）

表2 患犬血常规检查结果Tab.2 Blood routine examination of sick dog

从后肢隐外侧静脉采血2 mL，用装有乙二胺四乙酸（EDTA）的抗凝管分装，前后倒置使全血与抗凝剂充分混匀，使用迈瑞全自动血液检测分析仪进行检测。

由表2可知，红细胞数及血细胞比容、血红蛋白浓度、平均红细胞体积、血小板数量及血小板压积均低于参考范围，而平均红细胞血红蛋白浓度、血小板分布宽度有一定升高，提示患犬存在中至重度的非再生性贫血。

2.1.5 患犬血气检查结果（见表3）

表3 患犬血气检查结果Tab.3 Blood gas test results of sick dog

取肝素抗凝血100 μL，使用雅培EC8+血气检测仪进行检测。

由表3可知，患犬的二氧化碳总量、血细胞比容、二氧化碳分压、碳酸氢根、细胞外液碱剩余量、血红蛋白浓度均低于参考范围，表明患犬存在混合性酸碱失衡。

2.1.6 患犬血液生化检查结果（见表4）

取肝素锂抗凝血2 mL，2 000 r/min离心2 min，移液枪吸取上层血浆600 μL，进行血液生化检查。

由表4可知，胰淀粉酶、胰脂肪酶、球蛋白等指标数值偏高，提示存在胰腺炎可能；对称性二甲基精氨酸数值在参考范围内，暂时排除肾脏功能障碍；犬C 反应蛋白数值远超出参考范围，表明患犬体内存在广泛的炎症反应。

2.1.7 患犬胰腺炎特异性脂肪酶（cPL）检测结果

取一套全新cPL 检测盒，用吸管滴加4 滴cPL 共轭液及3滴血浆于留样管，前后倒置混匀，将管内液体倒入检测板的加样孔内。待液体没过检测板中心圆孔时，用力按下检测板，将检测板插入爱德士内分泌检测机组，选择开始检测，检测结果见表5。

由表5可知，cPL结果为异常，提示该犬患有胰腺炎。

2.1.8 患犬初步诊断结果

结合上述相关检查结果，初步诊断为犬急性胰腺炎。

2.2 患犬追加检查结果

以止痛、消炎、止吐、维持水合为治疗原则，使用赛福魁（头孢喹肟）静脉滴注，配合皮下注射布托啡诺和枸橼酸马罗皮坦以缓解疼痛并控制呕吐、反胃，同时静脉滴注乳酸钠林格，定期检测水合情况。

抗生素静脉滴注治疗1 d 后，6 月30 日早观察该犬精神状态一般，并无明显好转。并在外出牵遛时出现血红蛋白尿（见图3），遂复查基灵血液原虫（犬巴贝斯虫/吉氏巴贝斯虫）PCR检测和血涂片镜检。

图3 患犬出现血红蛋白尿Fig.3 Sick dog had hemoglobinuria

2.2.1 患犬巴贝斯原虫PCR 核酸检测（吉氏巴贝斯+犬贝斯）结果（见表6）

表6 患犬巴贝斯原虫PCR核酸检测结果Tab.6 PCR nucleic acid detection result of Babesiamicroti of sick dog

后肢外侧隐静脉采血2.5 mL，EDTA 抗凝管分装，混匀，吸取400 μL 抗凝血，加入样本处理液静置10 min，取200 μL混合液于核酸提取舱内，试剂盒固定在检测槽内开始检测，结果显示，患犬吉氏巴贝斯虫阳性（见表6）。

2.2.2 患犬血涂片镜检结果（见图4）

图4 患犬血涂片镜检结果Fig.4 Results of blood smear microscopy of sick dog

由图4 可知，镜检发现多个视野中均可见有较多红细胞中存在明显的吉氏巴贝斯虫体（圆点样）。

2.2.3 最终诊断结果

根据患犬的临床检查、影像学检查及实验室检查等初诊结果，结合血液原虫PCR 核酸检查及血涂片镜检结果，推测为吉氏巴贝斯原虫感染继发胰腺炎。

3 治疗

根据对该犬的诊断结果分析及状态评估，将药物治疗分为灭虫、对症、支持等3个步骤，配合输血治疗同时进行。

3.1 输血治疗

3.1.1 患犬血型检测结果（见表7）

表7 患犬血型检测结果Tab.7 Blood type test results of sick dog

由表7可知，患犬血型为DEA1阴性。

3.1.2 输血

按照交叉配血原则（主侧配血型即受血犬的血浆或血清和供血犬的红细胞反应配型阴性），连用3 d，每日输血400 mL；静脉输血的速度低于10 mL/(kg·h)，在前30 min速度控制在0.25 mL/(kg·h)。

3.2 灭虫治疗

口服血虫醌（阿托伐醌片）对红细胞内虫体进行杀灭，并配合口服阿奇霉素片，减少耐药性以及抑制继发感染。

3.3 对症治疗

静脉输注200 mg 注射用硫酸头孢喹肟+200 mL 0.9%氯化钠注射液，配合使用100 mL 5 g/L奥硝唑氯化钠注射液，抑制胰腺炎症和感染；静脉滴注40 mg 奥美拉唑+100 mL葡萄糖注射液抑制呕吐症状；静脉输注600 mg还原型谷胱甘肽注射液降低药物代谢产生的细胞毒性。皮下注射0.02 mL/kg布托啡诺止痛，减轻患犬痛苦。

3.4 支持治疗

在药物治疗的同时，静脉输注20 mL 50%葡萄糖注射液、0.2 g 水溶性维生素、200 mL 乳酸钠林格注射液、200 mL 18种氨基酸注射液，补充体液，调节机体内环境以及改善酸碱失衡。

3.5 出院后复诊

经住院治疗7 d后，患犬出院，在家继续服用血虫醌和阿奇霉素，并于出院7、14 d后进行复诊。

3.5.1 首次复诊

出院7 d 后，宠主携该犬回医院复查。临床检查结果显示：患犬体重24 kg，体温38.5 ℃，呼吸速率63次/min，心率70次/min。精神状态尚可，步态尚可，稍喘，体表触诊未发现明显异常。

复查血常规，结果表明依然存在一定程度的贫血，红细胞再生情况良好（见表8）。综合患犬状态评估及血常规检查指标，可见该犬恢复情况理想，预后良好。

表8 患犬血常规复查结果（出院7 d）Tab.8 Blood routine reexamination results of sick dog (7 d after discharge)

3.5.2 再次复诊

出院14 d后，宠主携犬再次回医院复诊，经检查：体重23 kg，体温38.5 ℃，呼吸速率72 次/min，心率30 次/min。精神状态良好，步态正常；复查血常规及血涂片镜检，结果见表9、图5。

图5 患犬血涂片镜检结果（出院14 d）Fig.5 Results of blood smear microscopy of sick dog (14 d after discharge)

表9 患犬血常规复查结果（出院14 d）Tab.9 Blood routine reexamination results of sick dog (14 d after discharge)

由表9可知，红细胞数已恢复至正常水平，说明贫血症状已得到有效改善。

由图5 可知，血涂片镜检多个视野范围内未发现受虫体感染红细胞。

根据此次血常规及血涂片镜检复查结果，结合整体状态检查，建议长期服用血虫醌配合阿奇霉素，待用药周期结束后再次复查评估。

4 讨论

根据此病例发展过程及治疗经过，结合相关临床病例资料，推测犬吉氏巴贝斯虫病为原发疾病，虫体大量破坏红细胞造成贫血后，使器官血液灌流量减少，且该犬肥胖，据此推测，在贫血和肥胖的诱因下导致该犬产生继发性的胰腺炎。

巴贝斯虫属于巴贝斯虫属、巴贝斯虫科，巴贝斯虫广泛分布于世界各地，尤其是植被茂盛的区域。在我国境内报道的主要为吉氏巴贝斯虫，此虫种主要在江苏、河南等地区呈地方性流行趋势[4]，该虫种的传播媒介硬蜱多分布在气候温暖地区，以春、夏、秋季较为活跃[5]。当犬类进入植被茂密的区域时便伺机附着在犬的皮毛上，进而通过叮咬传播该病[6]。随着我国近年来犬饲养数量迅速增长，该病大有流行和暴发的趋势，严重威胁宠物犬以及军犬、警犬的健康[4]。犬巴贝斯虫病通常的临床症状为高热、贫血、黄疸、血红蛋白尿等，其症状的严重程度取决于感染的巴贝斯虫种类以及犬的营养情况、年龄和免疫情况等因素[7]。本病例中，患犬所表现出的症状与犬巴贝斯虫病的主要症状较为吻合。通过血常规检测发现，患犬存在严重贫血以及血小板数量减少。犬巴贝斯虫的致病机制为传播媒介蜱虫叮咬宿主后，释放的感染性子孢子通过红细胞吞噬作用进入宿主红细胞，导致红细胞受到机械性损伤，随后子孢子在红细胞体内不断繁殖发育，最终导致红细胞裂解。此外，巴贝斯虫感染红细胞时，释放的寄生虫抗原与感染红细胞、未感染红细胞以及血小板的表面结合，激活机体的单核吞噬细胞系统，表现为血小板减少以及溶血性贫血。同时，裂解的红细胞释放出血红蛋白以及非结合性胆红素，前者通过尿液排出体外，形成血红蛋白尿；后者在超出肝脏能够摄取的阈值后导致黄疸[6]。

由于虫体感染作用导致红细胞被破坏，部分胆红素进入血液，故血液生化检查结果提示总胆红素升高；此外，初诊时患犬呼吸频率为102 次/min，因此推断该犬存在代偿性呼吸，血气检查结果中提示二氧化碳含量及二氧化碳分压降低。此外，患犬血小板含量降低也是该病最常见的标志之一，其原因可能为局部及全身弥散性血管内凝血、免疫介导的破坏和脾脏内血小板的滞留[6]。

临床中对巴贝斯虫病的诊断，主要是通过PCR核酸检测配合血涂片镜检进行确诊，其中血涂片镜检特异性强，但受限于涂片和读片技术，敏感性较低，且仅在血液中虫体数量较多时有机会发现，不推荐作为巴贝斯虫病的单独筛查检测。经DIFF-QUIK 染色后，红细胞呈中央有淡染区的蓝紫色圆形细胞，而吉氏巴贝斯虫染色后呈紫色，可在视野内见到红细胞中的紫色指环形虫体[8]。除血涂片镜检外，推荐使用PCR核酸检测方式进行诊断。PCR核酸检测是特异性和敏感性最高的检测方法，可鉴别犬巴贝斯虫和吉氏巴贝斯虫。也可使用多重PCR 同时检测包括巴贝斯虫在内的多种蜱传播病原的混合感染，进一步提高诊断效率。此外，犬巴贝斯虫病应同时与其他疾病进行鉴别诊断，如犬细小病毒病也会引起贫血，不同点在于有无便血史，犬细小病程短并伴有呕吐；犬体内寄生虫病除贫血外，还常伴有被毛焦躁，无驱虫史等[9]。

目前尚无能够根治巴贝斯虫病的药物，任何方法均无法完全消除虫体，均存在复发的可能。此外，对于不同虫种的治疗需使用不同药物，如本病例中患犬所患虫种为吉氏巴贝斯虫，传统治疗该虫种的药物如贝尼尔、咪唑苯脲在药效上均存在一定局限性。贝尼尔可破坏巴贝斯虫的需氧糖酵解作用，并使虫体核蛋白变性[7]，虽具有良好的治疗效果，但却具有较大的副作用，尤其对于纯种犬容易引起较为严重的神经症状甚至死亡[10]。咪唑苯脲直接作用于巴贝斯虫虫体，改变其细胞核的数量和大小，并且使细胞质发生空泡现象，兼具预防和治疗作用[11]，临床常用6.6 mg/kg肌肉或皮下注射，连续给药2周[12]。此药物对于犬巴贝斯虫有较好的治疗效果，但对吉氏巴贝斯虫的治疗效果不如贝尼尔，同时也会引起一定的胆碱能反应，如流涎、呕吐等。

对于出现继发感染的病例，支持治疗也是一种有效的方法，可通过输液维护血容量、修正酸碱平衡、电解质异常、利尿和预防红细胞淤积在毛细血管内；对于复杂情况的巴贝斯虫病能够起到缓解低血压及溶血性贫血的症状的作用，并给予营养支持，具有一定积极意义[13]。

本病例治疗过程中所使用药物为阿托伐醌以及阿奇霉素，通过阿托伐醌的选择性阻断原生动物线粒体电子转运，从而抑制嘧啶和ATP的合成，达到灭虫目的，同时与阿奇霉素联用减少耐药性的产生以及复发的可能[6]，通过还原性谷胱甘肽减少药物细胞毒性。阿托伐醌与阿奇霉素联用效果较咪唑苯脲更佳，且比贝尼尔更安全。在灭虫的同时，可采用输血疗法以及时补充血容量和红细胞数目[14]。

由于该犬存在继发性胰腺炎，因此在治疗中除灭虫、输血以外还需对症治疗，使用头孢喹肟、奥硝唑等药物进行静脉滴注，抑制胰腺炎症，纠正酸碱及电解质平衡，提高抵抗力，镇痛，止吐，控制继发感染；同时配合补液治疗[15]，达到对症治疗目的。

5 结论

犬吉氏巴贝斯虫病常发于春、夏季的温暖时节，以蜱虫叮咬为主要传播方式。患犬常出现可视黏膜苍白、无力、酱油尿等症状，在临床中可利用PCR 核酸检测配合血涂片镜检进行确诊。使用口服阿托伐醌配合阿奇霉素可起到较好的治疗效果，且相对副作用较小，操作方便。在病情严重时可进行输血治疗，避免出现急性失血引起的全身器官衰竭。