乳腺癌组织中人表皮生长因子受体-2、雌激素受体、磷酸酶张力蛋白同源物的表达及其与临床病理特征和预后的关系

黄晓玲，赵芳芳，陈香菊

（临汾市中心医院病理科，山西 临汾 041000）

乳腺癌乳腺上皮细胞是在多种致癌因子作用下出现增殖失控而形成的恶性病变，是女性常见的恶性肿瘤类型之一，部分患者接受手术、放化疗等治疗后仍存在不良预后，因此临床需寻找特异性与敏感性较高的指标，评估患者病情的进展与预后情况。人表皮生长因子受体-2（HER-2）是细胞膜上的一种蛋白质受体，其可以控制正常细胞的生长与分裂，与多种肿瘤的增殖、生长及转移密切相关[1-2]。雌激素受体（ER）为基因调节蛋白，主要参与调节生长因子受体通路，可以通过其表达情况预测患者的预后[3-4]。磷酸酶张力蛋白同源物（PTEN）是一种抑癌基因，在细胞核与细胞质中均可表达， PTEN 与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关[5-6]。本研究旨在探讨乳腺癌组织中HER-2、 ER、 PTEN 的表达情况及其与临床病理特征和预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料回顾性分析2018 年1 月至2022 年1 月临汾市中心医院收治的225 例女性乳腺癌患者的临床资料，收集其癌旁正常组织与浸润性导管癌组织，将其分为正常组与癌化组。纳入标准：①符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范（2015 版）》[7]中乳腺癌的诊断标准者；②经检查肿瘤未发生远处转移者；③未接受放化疗或性激素类药物治疗者；④既往无乳腺癌或其他恶性肿瘤病史者等。排除标准：①临床资料不完整者；②合并有结缔组织疾病者；③妊娠期乳腺癌者等。本研究经院内医学伦理委员会审核批准。

1.2 检测方法取所有患者乳腺癌手术切除病灶组织与癌旁正常组织，固定于10%中性福尔马林，常规制作石蜡组织切片，厚4 μm，微波加热进行抗原修复，梯度酒精脱水，滴入浓度为1∶300 的HER-2、ER、PTEN 第一抗体，4 ℃湿盒孵育过夜，而后滴加Envision 第二抗体，37 ℃湿盒孵育30 min。最后显色、冲洗、复染、封片。HER-2 主要定位于细胞膜或细胞浆中，HER-2 表达判定：细胞无染色或染色细胞≤ 10%为0；细胞染色＞10%、呈不完整的微弱细胞膜染色为1+；细胞染色＞10%、呈不完整的中等强度细胞膜染色，或肿瘤染色＜10%、肿瘤呈完整的细胞膜染色为2+；细胞染色＞10%，呈完整的强度细胞膜染色为3+；HER-2 免疫组化2+者再行荧光原位杂交（FISH）检测，FISH 检测无扩增为阴性，2+FISH 检测扩增与3+均为阳性。ER 定位于细胞核内，ER 的表达分为阳性、阴性和无法判读，以1%为阳性界值， ≥ 1%的肿瘤细胞核任何强度着色时即判为阳性；在理想的内外阳性对照前提下，＜1%的肿瘤细胞核着色时判为阴性；标本中正常乳腺上皮细胞和肿瘤细胞均无着色时，结果为无法判读。 PTEN 定位于细胞核与细胞质内，阳性着色表达呈黄色、棕黄色、褐色；着色程度按照无色、淡黄色、棕黄色、棕褐色分别计0、1、2、3 分；阳性细胞所占比例＜5%计0 分，5% ≤ 阳性细胞所占比例＜25%计1 分， ≤ 25%阳性细胞所占比例＜50%计2 分，50% ≤ 阳性细胞所占比例＜75%计3 分，阳性细胞所占比例≥ 75%计4 分；两积分之和≤ 3 分为阴性，＞3分为阳性[8]。

1.3 观察指标①比较正常组与癌化组组织中HER-2、ER、PTEN 的表达情况。②HER-2、ER、PTEN 表达与乳腺癌患者临床病理特征（年龄、组织学分级、TNM 分期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移情况）的关系。③所有患者均随访1 年，随访期间根据患者预后结果，将其分为生存组（202 例）与死亡组（23 例），比较不同预后患者肿瘤组织中HER-2、ER、PTEN 的表达。④将生存组和死亡组患者的一般资料进行单因素与多因素Logistic 回归分析，筛选出影响乳腺癌患者预后生存的危险因素。

1.4 统计学方法应用SPSS 22.0 统计学软件分析数据，计数资料以[ 例(%)] 表示，采用χ2检验；计量资料首先采用S-W 法检验，对于符合正态分布的计量资料以(±s)表示，采用t检验；危险因素分析采用多因素Logistic 回归分析。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正常组与癌化组组织中HER-2、ER、PTEN 的表达差异正常组中HER-2 阳性和阴性表达率分别为15.11%（34/225）、84.89%（191/225），ER 阳性和阴性表达率分别为23.11%（52/225）、76.89%（173/225），PTEN 阳性和阴性表达率分别为69.78%（157/225）、30.22%（68/225）；癌化组HER-2 阳性和阴性表达率分别为80.00%（180/225）、20.00%（45/225），ER 阳性和阴性表达率分别为82.22%（185/225）、17.78%（40/225），PTEN 阳性和阴性表达率分别为33.78%（76/225）、66.22%（149/225），见图1。与正常组比，癌化组HER-2 和ER 的阳性表达率及PTEN 阴性表达率均更高，差异均有统计学意义（χ2=189.930、157.684、58.394，均P＜0.05）。

图1 癌化组组织中ER、HER-2 及PTEN 免疫组织化学染色图片（×100）

2.2 HER-2、ER、PTEN 表达与患者临床病理特征的关系HER-2、ER 阳性及PTEN 阴性患者中组织学分级为3 级、TNM 分期为Ⅲ+Ⅳ、神经/脉管侵犯、淋巴结转移患者占比分别高于HER-2、ER 阴性及PTEN 阳性患者，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 HER-2、ER、PTEN 表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系[例(%)]

2.3 影响乳腺癌患者预后生存的单因素分析225 例患者均完成随访，随访期间根据患者预后结果，将其分为生存组（202 例）与死亡组（23 例），死亡率为10.22%。与生存组患者比，死亡组组织学分级3 级、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2 阳性表达、ER阳性表达、PTEN 阴性表达的患者占比均更高，组织学分级1+2 级、TNM 分期Ⅰ+Ⅱ期占比均更低，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 影响乳腺癌患者预后生存的单因素分析[例(%)]

2.4 影响乳腺癌患者预后生存的多因素Logistic 回归分析将表2 中差异有统计学意义的因素纳入多因素Logistic 回归模型分析，结果显示，组织学分级3 级、TNM 分期Ⅲ+ Ⅳ期、神经/ 脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2 阳性表达、ER 阳性表达、PTEN 阴性表达均为影响乳腺癌患者预后生存的危险因素，差异均有统计学意义（OR=1.672、1.863、1.866、1.548、1.471、1.704、1.525，均P＜0.05），见表3。

表3 影响乳腺癌患者预后生存的多因素Logistic 回归分析

3 讨论

随着外科手术技术的进步，乳腺癌的临床治疗方法也不断地改良、优化，但部分患者预后效果仍不理想，亟需探寻更为可靠的指标进行病情评估与疗效预测[9-10]。

HER-2 在正常状况下处于非激活状态，而病理状态下HER-2 过度表达提示患者预后较差，且肿瘤细胞的侵袭性会增加，因此其水平可判断病情严重程度[11-12]。ER 阳性表达表示癌细胞的生长需依靠雌激素，其生长增殖与内分泌因素调节相关，给予患者内分泌治疗可取得较好的预后效果[13-14]。PTEN 是抑癌基因，能够抑制细胞增殖，促进细胞分化，在细胞周期调控中具有重要作用，是阻碍乳腺癌细胞增生活跃的重要因素，因此其水平能够反映病情进展程度[15-16]。本研究中，与正常组比，癌化组HER-2、ER 阳性表达率，PTEN 阴性表达率均更高，HER-2、ER 阳性组织学分级为3 级、TNM 分期为Ⅲ+Ⅳ、神经/脉管侵犯、淋巴结转移患者占比高于HER-2、ER 阴性患者；PTEN 阳性组患者织学分级为3 级、TNM 分期为Ⅲ+Ⅳ、神经/脉管侵犯、淋巴结转移均低于PTEN 阴性患者，表明乳腺癌组织中HER-2、ER 蛋白呈高表达状态，PTEN 蛋白呈低表达状态，并且与患者的临床病理资料具有一定的相关性。HER-2 与ER 蛋白阳性表达越高则提示乳腺癌患者肿瘤分化程度越高，转移风险越大；组织学分级3 级属于高级别肿瘤，患者病情进展快速，极易出现癌细胞的淋巴结或远处器官组织转移；TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期属于中晚期、晚期，癌细胞已出现一定转移；浸润性导管癌的转移速度较快，侵袭性较强，一旦出现淋巴结转移或神经/脉管侵犯，临床治疗困难程度会增加，会对患者预后造成不良影响，与蔡冰等[17]及霍翔等[18]研究结果较为一致。本研究中，经单因素与多因素Logistic 回归分析显示，组织学分级3 级、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2阳性、ER 阳性、PTEN 阴性均为影响乳腺癌患者预后生存的危险因素，提示乳腺癌患者HER-2、ER、PTEN 的表达情况与病情进展与预后具有相关性。该结果与贺新等[19]、张国平等[20]研究结果较为一致。

综上，乳腺癌组织中HER-2、ER 高表达，PTEN 低表达，乳腺癌组织学分级、TNM 分期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移与乳腺癌组织中HER-2、ER、PTEN 的表达均具有相关性，组织学分级3 级、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神经/脉管侵犯、淋巴结转移、HER-2 阳性、ER 阳性、PTEN阴性均为乳腺癌患者预后生存的危险因素，进行乳腺癌组织HER-2、ER、PTEN 的检测能够为乳腺癌的诊治与预后提供一定参考依据，建议临床进一步研究。