鸡滑液囊支原体的研究进展

刘 麒，要纬玉，戎 畅，房思远，刘 莹，史万玉

河北农业大学动物医学院，河北保定 071000

1 病原学

鸡滑液囊支原体(MS)属于厚壁菌门，柔膜菌纲，支原体目，支原体科，是一种可自我复制的原核生物。MS 无细胞壁，直径介于0.2 ～0.4 µm，在电子显微镜下观察可见MS 大部分为圆形或者椭圆形，具有多形性。MS 可以被吉姆萨染色，革兰氏染色为革兰氏阴性。MS 细胞结构包括荚膜、单位膜、粘附蛋白以及内含物，其内含物又包括核糖体、核质、转座子以及质粒等。荚膜不仅包含抵抗宿主吞噬的粘性物质，还是重要的毒力因子。MS 可以发酵葡萄糖及麦芽糖产生酸不产气体，不能发酵乳糖、水杨苷或蕈糖。由于MS 生长所必需的很多营养物质无法自身合成，如脂肪酸和胆固醇等，可以用改良的Frey 培养基对其进行体外培养。在培养基中接种MS 后，在8%的CO2下37 ℃培养箱中培养3 ～5 d，可见“煎蛋”状菌落。MS 只有一种血清型但存在多种不同的基因型。

2 流行病学

MS 的自然宿主是鸡和火鸡，各个日龄均易感，相对于成年鸡，雏鸡更容易感染，此外鸽子、鸭等其它禽类也可以感染，哺乳动物不易感。病鸡和隐性感染鸡是其主要的传染源，传播方式有垂直传播和水平传播，包括种蛋传播、飞沫传播、接触各种被污染的物品传播，如被污染过的饲料、羽毛、水源等。鸡感染本病后造成饲料利用率下降、生长发育受阻、死亡率上升，当与大肠杆菌、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒等混合感染时，还可导致更加严重的疾病。鸡滑液囊支原体病在一年四季都可以发生，无明显的种群特异性，在气候骤变或换季时更易传播。疾病刚开始在鸡群中传播时，往往只有个别鸡发病，病死率较低，若不加以控制，会快速扩散至整个鸡群。近年来，MS 在全球各国都有不同程度的暴发，在我国MS 的发病率也越来越高。Sui 等人通过对来自我国中部地区的258 只鸡进行研究发现，蛋鸡的MS 感染率高达74.1%。MS 在我国的高感染率给各个家禽养殖企业造成了巨大损失。

3 临床症状

鸡滑液囊支原体病由急性向慢性发展，鸡在感染MS 之初可以观察到鸡冠发白、跛行及生长发育迟缓，后逐渐发展为羽毛粗乱、鸡冠萎缩。常见病鸡关节及胸部肿胀，附关节和爪垫是MS 的主要病变组织，但也偶见病鸡有全身性感染症状而无明显的附关节及爪垫肿胀。感染MS 后，病鸡虽仍会进水进食，但体形消瘦，常伴随不安及脱水等症状。度过急性期之后，机体恢复速度较为缓慢，恢复后体内仍含有MS 并伴随整个生命周期。偶见鸡群中无急性感染病鸡，仅有慢性感染的病鸡。通过呼吸道感染MS 的病鸡通常在一周内出现轻微啰音，通过爪垫注射方法感染的病鸡除爪垫、关节肿胀外，可能出现软骨发育不良等症状。气囊病变在任何日龄均有发生，常见于冬季，导致体重增加变慢、淘汰率增高。国外学者研究发现蛋鸡感染MS 后平均每日产蛋量下降11%，蛋壳顶端异常占总产蛋数的24.5%，产出部分软壳蛋，蛋壳表面出现少量气孔。

4 剖检变化

在MS 感染早期，滑液囊、关节、龙骨滑膜囊出现少量炎性渗出物。随着病情的加重，在病鸡的肌肉、关节、气囊中渗出物增加，逐渐浑浊甚至发展为干酪样渗出物。肝、脾肿大，肾脏肿大并伴有颜色发白斑驳等症状。部分病鸡有呼吸道症状，气囊浑浊严重者有干酪样渗出物，但上呼吸道无明显病变。

5 诊断

5.1 病原分离

在MS 感染早期可采集病鸡的咽拭子、气管拭子、关节及爪垫的渗出物后用改良的Frey 氏培养基在8%的CO2下37 ℃培养箱中培养。慢性感染的病鸡其关节及爪垫等病变组织中MS 含量减少，但在呼吸道仍有大量MS，建议使用无菌棉采集咽拭子和气管拭子进行分离培养。由于该病在感染后期机体病变组织不再含有MS，应在鸡群中尽可能多采集样本进行分离培养。采集样本后应在最短时间内进入实验室进行操作或者用干冰保存。病原分离是较为可靠的鉴定方法，但其耗时长、难度较大，在生产实践中较少采用病原分离作为诊断MS 的方法。

5.2 血清学诊断

平板凝集试验、酶联免疫吸附试验和血凝抑制试验是常用的血清学诊断MS 的方法。SPA 是生产实践中最常用的检测方法之一，将0.02 mL 血清和同等剂量的抗原在板上混合后观察，操作较为简单便捷，但用SPA 法检测MS 时，可能会出现非特异性反应，需要与其他检测方法配合使用。ELISA 作为另一种常用的血清学诊断方法，主要用于对鸡群感染的常规监控。由于没有商业化的抗原，不同菌株之间差异较为显著，HI 法检测MS 时并不常用。

5.3 分子生物学诊断

分子生物学检测方法是通过检测MS 的遗传物质来对机体是否已感染作出判断。对比其他检测方法，分子生物学检测方法更加敏感，有更强的特异性，可以免去大量干扰因素，检测结果具有较强的说服力。通常使用聚合酶链式反应扩增MS 特异性可变脂蛋白和凝血素A（vlha）基因或16SrRNA 片段，再采用琼脂糖凝胶电泳的方法来检测MS 的感染，这种检测方法具有强特异性，可信度高。

6 致病机制

6.1 通过与宿主细胞表面受体结合侵入细胞

MS 细胞膜上的蛋白能够结合宿主细胞的受体，分泌产生的有毒物质能够穿过宿主细胞膜进入细胞并对其造成损伤，使宿主细胞丧失原本功能。

6.2 影响机体钙物质代谢

MS 可以影响蛋鸡和肉鸡的钙代谢，造成产蛋量下降、蛋壳顶端异常等问题，使鸡蛋品质下降，但并不会对鸡蛋的重量及蛋壳厚度造成严重影响。

6.3 掠夺宿主细胞的营养物质

由于MS 本身基因组较小且对生长环境要求较高，一些自身生长繁殖所需要的营养物质不能自己合成，需要从宿主细胞内掠夺，如维生素、氨基酸、脂肪酸、胆固醇等营养物质，这种掠夺的过程会对宿主细胞造成损伤。

6.4 产生有毒代谢产物

MS 的生长繁殖过程中会分泌大量有毒代谢产物，如神经毒素、过氧化氢酶、溶细胞酶等，损伤宿主细胞或造成宿主细胞死亡。

6.5 逃避免疫应答

MS 表面膜蛋白中的vlha 蛋白及可变脂蛋白可以帮助MS 逃避宿主的免疫应答。vlha 可以通过突变多个位点、改变抗原决定簇以及粘附结构域来逃避宿主的免疫系统，造成机体慢性感染。

7 防控

7.1 综合措施

应保持合适的饲养密度，确保鸡舍内通风合理，温度湿度适宜，减少鸡的应激反应。鸡场应当加强饲养管理，切实做好鸡场的卫生消毒工作，定期消毒并清理粪便，严格管控进出车辆，货车进出应做好消毒工作。坚持从阴性鸡场引种，严格把控鸡苗质量，从源头防止MS 进入鸡场。饲养过程中应提供全价饲料，做好MS 的定期检疫工作，尽量做到全进全出的饲养模式，防止与野鸟接触。在这些管理措施基础上结合疫苗注射与药物防治两种方法，可有效预防滑液囊支原体病。

7.2 药物防治

由于支原体没有细胞壁，故常用的作用于细胞壁的药物不能应用于MS 的防治。一般选用泰乐菌素、氟苯尼考、泰万菌素、泰妙菌素等药物进行治疗。在治疗鸡滑液囊支原体病时一般采取间歇用药的方法，用药一周停药一周，再用药一周。除常规给药方法外，针对呼吸系统症状较为严重的病鸡还可以用喷雾的方法给药，可以取得较好的治疗效果。治疗时不能在应用恩诺沙星的同时使用氟苯尼考，二者会产生拮抗作用，可以选用恩诺沙星加替米考星或者恩诺沙星加泰乐菌素联合用药的方法提升治疗效果。由于只有少量药物能够通过血液循环达到靶器官，且不同鸡场存在的毒株耐药性不同，对药物的敏感程度不同，单纯使用药物治疗的方法不能有效根除MS，只能使症状减轻，故应采用药物防治与疫苗预防相结合的方法防治鸡滑液囊支原体病。

7.3 疫苗预防

药物防治是应对MS 感染的手段之一，但由于生产实践中缺乏规范使用，容易造成病菌耐药性问题和药物残留问题。接种疫苗的方法更加经济、安全、有效，已成预防MS 感染最重要的手段之一。当前对于MS 疫苗的研究主要集中在弱毒疫苗、灭活疫苗和基因工程疫苗。弱毒疫苗MS-H 株有较强的保护性和安全性，可通过滴鼻点眼的方式免疫。保护期能达到40 周左右，可使蛋鸡的产蛋率有一定提升，提高鸡蛋的重量和品质，但对于已经感染MS 的鸡并不能起到保护效果。MS 灭活疫苗在临床上有较好的免疫保护效果，可以刺激机体产生免疫反应，显著降低感染率。王昆将实验中分离到的4种疫苗株灭活处理后，配以相应的佐剂制备成灭活疫苗，均有较好的疫苗保护率。MS 灭活疫苗安全有效，有较高的保护率，适合在中国市场推广使用。当前对于MS基因工程疫苗的研究仍处于起步阶段，相较于其他种类疫苗来说，基因工程疫苗成本更低，更易于大规模生产，能够为企业带来较好的经济效益，有较好的发展前景，因此基因工程疫苗是MS疫苗未来的发展方向之一。