酶联免疫吸附法与金标快速检测板法检测乙肝五项血清标志物的价值

吴园

万载县人民医院 （江西宜春 336000）

乙肝是由乙肝病毒引起的以肝脏病变为主的一种传染病，具有较高的传染性[1]。该病呈进行性加重，若不及时采取干预措施，病情可逐步恶化，发展为肝硬化、重型肝炎、肝癌等，对患者生命安全造成极大威胁[2]。但大多数乙肝患者初期并无明显症状，因此，快速、准确的诊断尤为重要。乙肝五项血清标志物是发现乙肝病毒感染的最直接手段。现阶段，酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和金标快速检测板法是乙肝五项常用的检测手段，前者因灵敏度及特异度高被广泛应用，后者具有快捷、简便、无需使用特殊仪器的优点，上述方法均具有一定优势，但采用何种方法准确度更高尚存在争议[3]。鉴于此，本研究比较ELISA 与金标快速检测板法检测乙肝五项血清标志物对乙肝的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年1 月至2022 年6 月我院收治的68 例确诊乙肝患者作为研究对象。男36 例，女32 例；年龄25～50 岁，平均（36.05±5.01）岁；文化程度，初中及以下15 例，高中或中专37 例，大专及以上16 例；体质量指数20.15～27.48 kg/m2，平均（23.52±1.10）kg/m2。本研究经医院医学伦理委员会批准（审批号：20191205001）。

纳入标准：伴食欲不振、全身乏力、肝区疼痛等症状；临床资料齐全；均已签署研究知情同意书。排除标准：合并血液系统严重疾病；既往有肝脏手术史；合并肝脏其他病变；急慢性感染；合并恶性肿瘤、精神异常；妊娠期或哺乳期。

1.2 方法

采集所有参检者3 ml空腹静脉血，以4 000 r/min离心5 min，取上清液，置于-20 ℃下保存待测。所有参检者均行ELISA、金标快速检测板法检测乙肝五项，即乙肝表面抗体（hepatitis B surface antibody，HBsAb）、乙 肝e 抗 体（hepatitis B e antibody，HBeAb）、乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、乙肝e 抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）、乙肝核心抗体（hepatitis B core antibody，HBcAb）。采用中山生物工程有限公司生产的ELISA 试剂盒检测HBcAb、HBeAb 样本在450 nm 波长下的吸光度（optical density，OD ）值，计算样本吸光度值比临界值（sample 的OD 值/cut off，S/CO）≥阴性对照孔均值×0.5 为阴性结果，否则为阳性结果；检测HBsAg、HBsAb、HBeAg 样本在450 nm 波长下的OD 值，计算样本吸光度值比/临界值（sample 的OD 值/cut off，S/CO）≥阴性对照孔均值×2.1 为阳性结果，否则为阴性结果。金标快速检测板法所使用的乙肝五项检查卡购自英科创新（厦门）科技有限公司，在加样区加入样本，15 min 后观察颜色变化，若质控区出现紫红色条带，则测试有效，否则须重新测试。HBsAg、HBeAg、HBsAb 检测中，测试区若出现紫红色条带，则为阳性；HBcAb、HBeAb 检测中，测试区若未出现紫红色条带，则为阳性。

1.3 观察指标

比较两种检测方法对乙肝五项血清标志物的阳性检出率及对乙肝的诊断准确度。

1.4 统计学处理

采用SPSS 22.0 统计软件分析数据。计数资料以率表示，采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法对乙肝五项血清标志物的阳性检出率比较

两种检测方法对HBsAg、HBeAg 的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；ELISA 检测对HBsAb、HBeAb、HBcAb 的阳性检出率高于金标快速检测板法，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两种检测方法对乙肝五项血清标志物的阳性检出率比较[例（%）]

2.2 两种检测方法对乙肝的诊断准确度比较

ELISA 诊断乙肝的准确度为88.24%（60/68），高于金标快速检测板法的73.53%（50/68），差异有统计学意义（χ2=4.755，P=0.029）。

3 讨论

我国乙肝患者与乙肝病毒携带者数量较多，人群感染率较高，现已成为影响我国公共卫生安全的重大疾病，且其病情复杂，早期症状不明显，易延误最佳治疗时机，造成病情加重，对患者生命安全造成极大威胁[4-5]。因此，早期对其诊断至关重要。乙肝五项检测为早期发现乙肝的重要途径，因此，行之有效的检验方法对疾病早期预防与控制具有十分重要的作用。

ELISA 与金标快速检测板法是当前检测乙肝五项血清标志物的主要手段。ELISA 具有较高的灵敏度和特异度，且重复性好[6]。金标快速检测板法以胶体金作为标记物，采用免疫层析技术检测抗原或抗体。本研究结果显示，ELISA 法对HBsAb、HBeAb、HBcAb 的阳性检出率高于金标快速检测板法，ELISA 诊断乙肝的准确度高于金标快速检测板法，差异有统计学意义（P＜0.05），说明使用ELISA 检测乙肝五项血清标志物结果更可靠。金标快速检测板法检测中显色往往需要较高浓度的标志物，且直径较大的金颗粒才能获得较高灵敏度，故其应用具有一定限制。同时此检测方法使用了竞争抑制法，标本阳性时测试区无条带出现，若标本中HBsAb、HBcAb、HBeAb 浓度较低，则可能导致测试区出现颜色比质控区稍浅的色带，肉眼难以对其进行分辨，进而出现漏诊[7-8]。ELISA 应用双抗体夹心法和双抗原夹心法进行检测，采用二步法可降低“钩状效应”的影响，使阳性检出率明显升高[9-10]。临床标本检测中发现，对于ELISA 检测HBsAb 显色浅的标本，若使用金标快速检测板法复检，往往在限定时间内无法判断出结果，故针对此情况不宜采用金标快速检测板法[11-12]。本研究结果还显示，两种检测方法对HBsAg、HBeAg 的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明ELISA 与金标快速检测板法检测HBsAg、HBeAg 的阳性检出率相当。金标快速检测板法操作方法简单，不需要特殊仪器，对实验人员及实验室条件要求较低，且试剂稳定性好，保存方便[13-14]。金标快速检测板法适用于急诊标本及献血前的快速筛查，也可用于健康体检或流行病学的调查，对保护医护人员安全及预防感染具有重要的作用，但其仅可作为医护人员预防乙型肝炎病毒感染的手段，不可作为诊断结果。若想要明确诊断，应结合ELISA 复查。金标快速检测板法成本更高，不适用于对准确性要求较高的诊断，故其应用具有一定局限性。在现阶段临床实验中，ELISA 能够很好地符合检测要求，检测准确性度较高。值得注意的是，ELISA 检测时需对样本进行稀释，标本量应严格按照使用说明添加，避免结果出现假阴性，最大限度提高诊断准确度[15]。

综上所述，ELISA 法对乙肝五项血清标志物中HBsAb、HBeAb、HBcAb 的阳性检出率高于金标快速检测板法，且对乙肝具有较高的诊断准确度，为临床治疗方案、判断治疗结果、评估预后提供科学依据。