酸碱消煮液温度对饲料粗纤维测定结果的影响

陈韦韦　易晶晶　刘子维等

关键词：饲料；粗纤维；酸碱消煮

0 引言

粗纤维在动物营养研究中是一类重要的营养素，特别对于反刍动物而言，是一种必需营养素。动物在摄取其他高营养物质的同时需要一些辅助消化、帮助其进行更好吸收的物质，粗纤维中包含了纤维素和半纤维素等成分，这些成分能更好地促进动物的胃肠蠕动，对帮助其消化吸收起到一定的作用[1]。在分析饲料样品时，粗纤维是评定饲料质量和营养价值的重要依据，因此准确测定粗纤维含量具有重要意义[2]。

现行的GB/T 6434-2006《饲料中粗纤维的含量测定——过滤法》[3] 对比作废的GB/T 6434-94《饲料中粗纤维测定方法》[4]有所修改。有相关学者对其中的条件进行了学术研究。其中吴文琪等[5]研究洗涤温度对饲料粗纤维测定的影响，结果证明可用室温蒸馏水进行洗涤；张森等[2]研究饲料粒度及分布对国标法和滤袋法测定粗纤维的影响及两种方法的差异比较，结果表明不同粉碎方式导致样品的粒度大小及体积累积分布差异明显，不同方式粉碎的样品分别对国标法和滤袋法的结果有一定影响，但总体差异在可接受范围内。而新国标中对于手工操作法在分析步骤酸消煮和碱消煮中加入的酸碱液，未注明是否需要提前加热至沸腾，只提到尽快使其沸腾，并保持沸腾状态30依1 min；这一点与旧国标分析步骤中加浓度准确且已沸腾的硫酸溶液和氢氧化钠溶液有所区别。在樊霞等[6]和张崇玉[7]的研究中酸碱消煮均是使用常温的酸碱液加热至沸腾后开始计时；蔡小玲[8]的研究中在碱煮过程特意提到加入的氢氧化钠溶液必须是提前已经煮沸的；张桂英[9]的研究中加入酸堿消煮液均提前煮至沸腾再加入至样品中，而对于酸碱消煮液加入样品时的温度没有确定要求。

本试验选取饲料原料及饲料产品为研究对象，探究酸碱消煮液加入样品时的温度是否会对粗纤维的测定结果造成影响。

1 材料与方法

1.1材料与试剂

原料：玉米、豆粕、浓缩饲料、配合饲料。

试剂：0.13依0.005 mol/L 硫酸溶液、0.23依0.005mol/L 氢氧化钾溶液、正辛醇、石油醚30-60 益、丙酮、硅藻土。

1.2仪器与设备

AL204 电子天平，梅特勒原托利多有限公司；101-2AB 电热鼓风干燥箱，天津市泰斯特仪器有限公司；SXL-1008T 箱式电阻炉，上海精宏试验设备有限公司；SHZ-D（域）循环水式真空泵，浙江台州求精真空泵有限公司；电子万用炉，北京市永光明医疗仪器有限公司。

1.3试验方法

1.3.1 样品处理

将采样的样品用四分法缩分至200 g，用粉碎机将样品粉碎至过孔径1 mm 试验筛（18 目），封入样品袋中待用。

1.3.2 试验方法

步骤一：加入热酸、热碱消煮。称取1 g 试样准确至0.000 1 g，记为M1，每份样品做3 个平行样，于600 mL 高型烧杯中，加入150 mL 0.13mol/L 煮沸后的硫酸溶液，加盖有冷凝管的锥形瓶，置于电炉上加热，火力开至最大，待其溶液沸腾后开始计时30依1 min，并保持微沸状态。提前在G2 砂芯坩埚中铺一层厚度3-5 mm 的硅藻土，并于真空泵中用水压实硅藻土。酸消煮结束后，将样品溶液滤至真空泵上的G2 砂芯坩埚中，用煮沸后的纯水洗涤残渣，直至溶液pH 至中性，停止抽真空。用丙酮进行浸泡后，抽滤排掉丙酮使其干燥，再加入30 mL 石油醚进行2 次脱脂，抽真空至干燥后放置通风橱中挥发干石油醚。

将残渣全部转移入对应的酸消煮高型烧杯中，加入150 mL 0.23 mol/L 煮沸后的氢氧化钾溶液，置于电炉上加热，火力开至最大，待其溶液沸腾后开始计时30依1 min，并保持微沸状态。碱消煮结束后，将样品溶液滤至对应的G2 砂芯坩埚中，用煮沸后的纯水洗涤残渣，直至溶液pH 至中性，停止抽真空。用30 mL 丙酮进行3 次脱脂，抽真空至干燥后放置通风橱中挥干丙酮。

将G2 砂芯坩埚放入灰化皿中放置于130 益干燥箱中干燥2-3 h，取出于干燥器中冷却至恒温称重，记为M2。

将称量后的坩埚和灰化皿放入500依25 益箱式电阻炉中灰化，取出冷却至100 益左右，放置干燥器中冷却至恒温称重，记为M3。重复以上操作，直至冷却后连续两次称量结果的差值不超过0.000 2 g。

步骤二：加入常温酸消煮、热碱消煮，同上述步骤一。更换条件：加入常温硫酸溶液和沸腾的氢氧化钾溶液。

步骤三：加入常温酸碱消煮，同上述步骤一。更换条件：加入常温硫酸溶液和氢氧化钾溶液。

1.4结果计算

粗纤维含量（%）=（M₂-M₃）/M1伊100%注：M₁为试样质量，g；M₂ 为130 益干燥后的砂芯坩埚和滤渣质量，g；M3 为500 益灰化后的砂芯坩埚和残渣质量，g。

2 结果与分析

2.1不同条件下酸碱消煮液与样品接触时长比较

溶液的温度越低，加热至沸腾时间越长，与样品接触的时间也越久。由表1 可知，提前加热的酸碱溶液，与样品接触后基本能保证在1 min 沸腾；而常温酸碱溶液受环境影响温度较低，溶液加热时间长，加热至沸腾时间基本需要5 min，后者与样品接触时间多4 min。

2.2不同条件下酸碱消煮液处理对饲料中粗纤维的影响

根据表2 分析，各试验样品在不同条件下测得的粗纤维含量存在些微差异，玉米的粗纤维含量在2.20%-2.45%之间，最大相差0.25%；豆粕的粗纤维含量在5.98%-6.37%之间， 最大相差0.39%；浓缩饲料的粗纤维含量在5.32%-5.82%之间，最大相差0.50%；配合饲料的粗纤维含量在7.79%-8.26%之间，最大相差0.47%；但不同条件下四者之间的平均值相差较小，标准误差也很小，总体差异在可接受范围内。

3 结论

饲料中粗纤维含量指标是配合饲料、浓缩饲料、精料补充料及饲料原料等饲料标签中的产品成分分析保证值项目，也是《饲料原料目录》中150 余种原料中规定的强制性标示要求指标[5]。

本试验表明，在测定饲料中粗纤维含量时，酸碱消煮液与样品接触时的温度对结果影响差异不显著；为方便操作与加快实验进度，可采用常温酸碱溶液加入样品中煮沸后再开始计时的方式。本试验只挑选了几种常见的原料和成品，对于纤维含量高的样品未进行试验，有待同行继续研究。