复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清生化指标的影响

杨 鹏，李 锐，2*，查红刚，叶志祥，史庆超，张志勇

（ 1. 内江师范学院，四川 内江 641100 ；2. 长江上游鱼类资源保护与利用四川省重点实验室，四川 内江 641100 ；3. 内江农业科技园区管理委员会，四川 内江 641201 ； 4. 内江市水产技术推广站，四川 内江 641100 ）

澳洲淡水龙虾原产自澳洲，具有营养价值高、肉质鲜美、产肉率高、易养殖等特点，目前已成为我国重要的经济虾养殖品种之一[1]。随着澳洲淡水龙虾在我国的养殖规模不断扩大，病害发生率逐年攀升，给澳洲淡水龙虾养殖户带来严重的经济损失。与其他经济虾类相同，抗生素类药物成为澳洲淡水龙虾养殖过程中预防和治疗疾病的首选，然而抗生素滥用会导致一系列问题，如药物残留、肠道菌群紊乱、二次污染等。因此，开发绿色、环保的新型饲料添加剂已成为近年来的研究重点，而植物多糖因其安全、绿色、高效、无残留等特性备受关注。

无花果（Ficus caricaLinn.）是桑科、榕属植物，具有健脾开胃、清热润肠、润肺止咳、消肿解毒、抗肿瘤、降压、轻泻、助消化等多种功能[2]。五倍子也是一种传统中药材，五倍子多糖具有敛肺降火、涩肠止泻、敛汗止血、收湿敛疮以及抗肿瘤等功效[3]。有研究表明，饵料中添加无花果多糖或五倍子多糖能够提高鱼类生长性能，增强机体免疫力[4-6]。然而关于上述多糖在澳洲淡水龙虾养殖中的报道较少，尤其两种多糖复合应用的研究更加匮乏。基于此，本试验旨在探讨饵料中添加复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血液生化指标的影响，以期为复合植物多糖在澳洲淡水龙虾产业健康养殖中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验饵料

复合植物多糖由五倍子多糖和无花果多糖两种多糖组成，均按照水提法获得[7]。原料五倍子和无花果均购自当地农贸市场。根据澳洲淡水龙虾的营养需求，以鱼粉、豆粕、花生麸和啤酒酵母、鱼油、豆油、大豆卵磷脂等原料配制两组澳洲淡水龙虾饵料。对照组龙虾投喂基础饵料，试验组使用复合植物多糖替代基础饵料中1%的豆粕。基础饵料组成及营养水平见表1。

表1 基础饵料组成及营养水平（干物质基础）Tab.1 Base diet composition and nutrient level(dry matter basis) 单位：%

1.2 试验设计及饲养管理

试验动物澳洲淡水龙虾购自重庆市荣昌区澳洲淡水龙虾良种繁育场。试验开始前，将澳洲淡水龙虾置于室外池塘网箱中暂养14 d以适应环境，暂养期间投喂常规澳洲淡水龙虾配合饵料。正式试验开始后，将180尾澳洲淡水龙虾随机分为对照组和试验组，每组3个网箱（每个网箱即一个重复），每个网箱30尾虾。对照组龙虾投喂基础饵料，试验组使用复合植物多糖替代基础饵料中1%的豆粕。试验期8周。

养殖试验期间采用少量多次饱食投喂方式，投喂量为虾体重的5%～10%。养殖采用池塘流水养殖，水体持续曝气，水温为22～28 ℃，pH值7.0～8.0，溶氧量为5～8 mg/L，氨氮含量≤0.2 mg/L，亚硝酸盐≤0.1 mg/L。试验期间定期监测池塘水温、溶解氧、氨氮和亚硝酸盐等含量的变化。

1.3 测定指标及方法

1.3.1 样品采集

养殖试验结束后，试验虾禁食24 h，每个网箱中随机抽取8尾虾，适量丁香酚麻醉后采血，采集血液置于1.5 mL离心管中，3 500 r/min 离心10 min，取上清分装并保存于-80 ℃冰箱中，用于血液生化指标分析。

1.3.2 血清生化指标

谷草转氨酶（AST）与谷丙转氨酶（ALT）采用赖式法测定；总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）采用比色法测定；总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）采用单试剂GPOPAP法测定；高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）采用双试剂直接法测定；上述指标均采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）进行测定。

1.4 数据统计与分析

试验数据采用SPSS 19.0 软件进行独立样本t检验。结果以“平均值±标准差”表示，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清免疫指标的影响（见表2）

表2 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清免疫指标的影响Tab.2 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum immune indexes of Cherax quadriarinatus 单位：g/L

由表2 可知，与对照组相比，试验组龙虾血清TP、ALB、GLB含量均显著升高（P＜0.05）。

2.2 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清血脂指标的影响（见表3）

表3 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清血脂指标的影响Tab.3 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum lipid indexes of Cherax quadriarinatus 单位：mmol/L

由表3可知，与对照组相比，试验组龙虾血清TC、TG、LDL-C 含量均显著降低（P＜0.05），HDL-C 含量显著升高（P＜0.05）。

2.3 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清肝脏功能指标的影响（见表4）

表4 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清肝脏功能指标的影响Tab.4 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum liver function indexes of Cherax quadriarinatus 单位：U/mL

由表4 可知，与对照组相比，试验组龙虾血清AST 活性显著降低（P＜0.05），而ALT活性差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清免疫指标的影响

血液生化指标检测具有重要的应用价值，可在一定程度上反映水生动物的生理健康情况[8]。ALB是机体一种重要的免疫蛋白，主要由肝脏实质性细胞合成，可用于机体的组织修补和能量供给，也是血液胶体渗透压的主要组成部分[9]。GLB 是由机体免疫器官制造的一种免疫蛋白，主要在肝脏以外生成，与ALB 共同反映机体对环境的抵抗力[10]。ALB和GLB共同组成TP，当血清中ALB和GLB含量在正常范围内升高时，可在一定程度上表明机体的免疫力提高[11]。方珍珍等[12]研究发现，投喂含1 200 mg/kg枸杞多糖的饵料后，黄颡鱼免疫力显著增加。吴旋[13]研究表明，在黄颡鱼饵料中添加1 200 mg/kg 的黄芪多糖可提高其血清TP和ALB含量。

本试验结果显示，使用复合植物多糖替代基础饵料中1%的豆粕能够显著提高澳洲淡水龙虾血清TP、ALB、GLB的含量，表明复合植物多糖可提高澳洲淡水龙虾免疫力，结果与前人研究结论相似。

3.2 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清血脂指标的影响

血清中TC 和TG 是机体脂类代谢水平的重要指标之一，TG 是脂类代谢的主要产物，其合成场所主要是肝脏[14]。TC在血液中通常存在于脂蛋白，HDL-C和LDL-C是其主要存在形式。血清中HDL-C 和LDL-C 含量主要反映脂类在机体内的分解与转运的情况[15]。高密度脂蛋白可将血液中多余的胆固醇运送到肝脏，处理分解为胆酸盐后排出，防止胆固醇在机体中沉积，进而导致机体胆固醇含量过高。而低密度脂蛋白的作用与高密度脂蛋白的作用相反，主要是将肝脏内的胆固醇转运到周围组织加以利用[16]。本试验中，试验组龙虾血清TC和TG含量显著低于对照组，表明虾体的脂肪分解代谢能力增强[17]；而HDLC含量提高和LDL-C含量降低，则表明使用复合植物多糖替代基础饵料中1%的豆粕能够提高澳洲淡水龙虾对脂类物质的转运利用，降低血脂水平，有利于机体健康。

有研究发现，草鱼摄食金针菇菇头后，血清中TG 和TC 含量均显著下降[18]。此外，谭连杰等[4]研究也表明，饵料中添加0.2%黄芪多糖的降血脂作用很明显，主要表现为卵形鲳鲹血清TC、TG和LDL-C含量显著降低，HDL-C含量显著升高。前人研究表明，植物多糖具有很好的降低血糖血脂的效用，其作用机制主要是通过促进机体胰岛素分泌，调节己糖激酶活性，抑制糖异生，抑制脂肪酶的活性、改善脂肪代谢等发挥其降血糖血脂的作用[19]。由此推测，本研究中的复合植物多糖可能也通过上述机制发挥降血脂作用，但有待进一步研究验证。

3.3 复合植物多糖对澳洲淡水龙虾血清肝脏功能指标的影响

血清生化指标中，ALT 和AST 是两个重要的指标，其活性高低主要反映机体肝脏的健康状况[11]。ALT 和AST主要存在于肝细胞中，其中ALT 主要存在于肝细胞胞质，而AST则主要存在于肝细胞的线粒体，检测两种酶活性是检验肝细胞受损情况的灵敏指标之一[9]。正常情况下，血清中ALT 和AST 的活性并不高，但当鱼体肝脏功能异常时，肝细胞破裂，肝细胞中的ALT 和AST 释放到血液中，导致血清中ALT 和AST 活性升高。因此，当鱼类血清中ALT和AST的活性升高时，可在一定程度上表明鱼体的肝脏功能出现异常[20]。

本试验结果显示，与对照组相比，使用复合植物多糖替代基础饵料中1%豆粕的试验组龙虾血清AST活性显著降低，表明在澳洲淡水龙虾饵料中使用复合植物多糖替代基础饵料中1%的豆粕对肝脏健康有利。白东清等[21]研究发现，在金丝鱼饵料中添加600～800 mg/L灵芝多糖可显著降低金丝鱼血清AST 活性，结果与本研究结论一致。此外，卢文麒等[22]研究也发现，在欧洲鳗鲡饵料中添加480 mg/kg的香菇多糖可显著降低其血液AST活性。而杨琳霖等[18]对草鱼的研究中发现，与对照组相比，金针菇菇头组草鱼血清AST 活性显著升高，与本研究结果相反，原因可能由于鱼种类、饵料加工工艺、养殖环境、管理条件等差异导致，具体原因有待进一步分析。

4 结论

本研究结果表明，使用复合植物多糖替代基础饵料中1%的豆粕可显著提高澳洲淡水龙虾的血清免疫功能，降低血脂指标，且对龙虾的肝脏功能具有一定的保护作用。