刘 涛,王 瑞,王艳芳
信阳农林学院,河南 信阳 464000
河南省是我国肉牛养殖大省,2021年牛肉产量为35.58万t,位居全国第8位。作为农业大省,秸秆和糟渣类饲料以其来源广、价格低等优势成为该省肉牛养殖的主要粗饲料来源。据统计,河南省的小麦、玉米、花生等主要作物年产可饲用秸秆约8 500万t,丰富的粗饲料来源为肉牛产业的发展提供了坚实的基础。近年来河南省南部地区肉牛养殖产业发展迅速,但受粗饲料及饲料原料收储加工过程中霉菌毒素污染因素的影响,肉牛健康可受到不同程度损伤。为了解豫南地区肉牛场粗饲料及饲料原料中霉菌毒素污染程度,从该地区肉牛场中收集了40份样品,采用快速荧光技术进行玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐霉素(DON)、黄曲霉毒素(AF)检测分析。
电子天平AE223C(舜宇恒平科学仪器有限公司);粉碎机FW-100型(北京市永光明医疗器械有限公司),台面恒温振荡器TH2-92C(常州跃琪医疗器械厂);干式免疫荧光分析仪(广东悦洋生物技术有限公司)。玉米赤霉烯酮、呕吐霉素、黄曲霉毒素B1荧光微球检测试纸条V2.0(广东悦洋生物技术有限公司)。
2021年12月—2022年4月共收集豫南地区肉牛养殖场样品40份(信阳市19份、南阳市14份、驻马店市7份),其中粗饲料33份、玉米4份、豆粕3份。
1.3.1 样品前处理
1)按照GB/T 14699.1-2005《饲料采样标准》制备样品,并用粉碎机粉碎后过20 目标准筛备用。
2) 称取处理后的样品于50 mL离心管中,加入25 mL样品提取液(1:5提取),振荡提取8 min;待测样品与样品提取液可以同比例放大进行提取,待测样品吸水量过大不易提取时,可采用1:10提取,检测结果乘以2即为样品的残留浓度。
3)提取结束后,4 000 r/min离心2 min,取100 μL上清液,加入到500 μL样品稀释液中,混匀后备用。
1.3.2 检测方法及结果判定
阴性(-):检测结果 阳性(+):检测结果≥cutoff值,结果为阳性。 无效:仪器读数报错,本次检测结果无意义,需要重新检测,具体标准如表1所示。 表1 判读标准 40份样品,粗饲料中黄曲霉毒素B1检出率为48.48%,超标率9.09%,最高值为66.96 μg/kg,玉米和豆粕样本黄曲霉毒素B1未超标,具体如表2所示。 各地区样品黄曲霉毒素B1平均含量从高到低依次为信阳(24.19 μg/kg)、南阳(11.18 μg/kg)、驻马店(5.63 μg/kg)。信阳地区黄曲霉毒素B1检出率为63.16%,驻马店为14.29%。只有信阳地区存在超标,超标率为15.79%,如表3所示。 表3 各地区样品黄曲霉毒素B1检测结果 40份样品中,粗饲料呕吐霉素检出率为18.18%,超标率为3.03%,平均含量为1 052.67 μg/kg。玉米和豆粕样本中的呕吐霉素未超标,如表4所示。 表4 各类样品中呕吐霉素的检测结果 样品中呕吐霉素平均含量从高到低依次为南阳(1 522.03 μg/kg)、驻马店(742.45 μg/kg)、信阳(693.74 μg/kg)。南阳地区呕吐霉素检出率最高为28.57%,驻马店最低为14.28%。只有南阳地区存在超标,超标率为7.14%,如表5所示。 表5 各地区呕吐霉素检测结果 40份样品中,粗饲料中玉米赤霉烯酮平均含量为98.72 μg/kg,检出率为27.27%,但未超标。玉米和豆粕超标率分别为25%和66.67%,如表6所示。 表6 各类样品中玉米赤霉烯酮的检测结果 样品中玉米赤霉烯酮平均含量从高到低依次为驻马店(369.611 μg/kg)、南阳(103.87 μg/kg)、信阳(94.23 μg/kg)。驻马店地区玉米赤霉烯酮检出率最高为85.71%。信阳最低为26.32%。只有驻马店地区存在超标,超标率为42.86%,如表7所示。 本次调查结果显示,豫南地区肉牛场使用的粗饲料以及饲料原料中普遍存在霉菌毒素污染。检出2种及2种以上的霉菌毒素污染的样品占比为22.5%,与王国强 等[1]2019年相关研究、王娟 等[2]河南地区黄曲霉毒素污染较为严重结论相似。通过调查发现豫南地区中小规模肉牛场所使用的粗饲料主要来自稻草、麦秸、花生秧、玉米秸秆和粉碎的玉米芯。结果显示,豫南地区肉牛养殖场粗饲料中AF污染最为严重,特别是信阳地区超标率最高。南阳地区的粗饲料中DON超标率最高。ZEN在玉米和豆粕中存在超标情况,驻马店地区超标率最高。这些地区粗饲料及饲料原料的霉菌毒素超标,分析其原因主要有2个方面的因素。 黄曲霉素广泛存在于自然界的土壤环境中,在适宜的环境条件下可大量生长繁殖。如果粗饲料长时间在潮湿、闷热的环境中存放,库存过多且不注意通风干燥和卫生清洁,则容易导致霉变。信阳地区是河南省水稻主要种植地区,水稻种植面积达700多万亩(1亩≈666.7 m2),占全省水稻总播种面积的70%,因此当地肉牛养殖从业者大量使用稻草作为粗饲料。但由于水稻种植区在雨季极度潮湿,利于真菌繁殖与毒素产生。近几年,信阳水稻收获时,恰逢初秋季节,雨水丰沛,导致信阳地区稻草中黄曲毒素的污染情况较严重。 呕吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)属于田间毒素,玉米穗腐病的发生,加剧了玉米污染DON和ZEN的风险[3]。南阳市地处河南省西南部,夏玉米是南阳市第二大作物,近几年南阳市玉米生长季节,高温干旱、阴雨寡照、暴雨大风等灾害性天气频发;驻马店降水量时空分布不均,降水大部分集中在6—9月,该季节时常出现暴雨洪涝灾害,而霉菌分生孢子借风雨传播,有利于玉米穗腐病发生。这一因素导致南阳地区的粗饲料中呕吐毒素和驻马店地区玉米赤霉烯酮污染较严重。 我国多数地区农民在玉米收获后采用晾干等慢干方式,且粮仓结构简单,储藏条件不可控,玉米中真菌毒素的积累会随着储存时间而增加。因此,选择优良的干燥设备以及构建结构合理、条件可控的仓储设施对减少玉米真菌毒素污染十分关键。在水稻种植地区,许多肉牛养殖从业者,习惯将稻草堆积成垛,露天堆放,容易受到雨淋,通风不良者容易发生霉变。 霉菌毒素引起的直接经济损失是动物生产性能下降以及因霉菌毒素中毒引起的损失。在多数情况下,动物生产性能下降可能是相当普遍且不易被察觉的,在霉菌的感染水平较低或霉菌毒素的污染程度较轻时尤其如此[4]。只有肉牛养殖从业者对霉菌毒素的危害性认知水平达到一定高度,才会从采购、储藏、使用环节上对粗饲料、饲料原料质量进行把关。 严格控制好购买的玉米、豆粕等原料的水分,以免储存过程中霉变。加强对原料和饲料成品的霉菌毒素检测和品控,尤其是玉米和麸皮。同时保持储仓内通风、干燥,因此宜选高且平的平燥处,垛底要高出地面30~50 cm,堆垛时要尽量压紧,封顶,以防雨淋。定期检查,变质的剩料要清洗干净,避免牛吃到霉变饲料。在生产中通过使用防霉剂、脱霉剂和解霉剂在一定程度上能缓解饲料霉变带来的危害,但过度防控所带来的成本也是不菲的,更应重视原料的质量和贮存[4]。 从霉菌毒素检测结果来看,豫南地区肉牛养殖场粗饲料和饲料原料霉菌毒素污染问题不容乐观,40份样品中,粗饲料同时存在DON、AF污染,玉米同时存在ZEN与DON污染,豆粕ZEN的超标率严重。目前豫南地区肉牛养殖业方兴未艾,相对养殖技术更为成熟的家禽与生猪产业对霉菌毒素超标的重视程度,肉牛养殖在这方面的意识还有待提高。在肉牛养殖过程中,应加快从田间种植、收获、储藏到谷物加工等环节真菌毒素防控标准化体系的建设,实现绿色、安全农产品的统一规范化生产[5]。同时地方主管部门,应面向农户开展以储藏条件控制为重点的真菌毒素防控意识与技术培训。2 结果与分析
2.1 各类样品中黄曲霉毒素B1的检测结果
2.2 各地区样品中黄曲霉毒素B1的检测结果
2.3 各类样品中呕吐霉素检测结果
2.4 各地区样品中呕吐霉素检测结果
2.5 各类样品中玉米赤霉烯酮检测结果
2.6 各地区样品中玉米赤霉烯酮检测结果
3 讨论
3.1 地域气候条件
3.2 保存条件
3.3 从业者对霉菌毒素危害程度的认知水平
4 建议
5 结论