一例育肥猪圆环病毒和传染性胸膜肺炎混感的诊断分析

韦景利

（广西壮族自治区来宾市武宣县东乡镇农业农村综合服务中心 广西来宾 545908）

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引发的一种高度接触性传染病，该病毒主要定殖于机体的淋巴细胞，能够引起猪群免疫抑制[1]。作为猪群的常见病，猪圆环病毒病不仅给广大养殖户带来了巨大的经济损失，还增加了猪群继发感染和混合感染的机率。猪胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种典型呼吸道传染病，该病发病率高，传染性强。尤其是自2000 年后，该病在我国多个地区呈现出暴发流行趋势，损失惨重[2]。当猪群免疫力低下时，该病极易趁虚而入，与其他呼吸道病原微生物发生混合感染或继发感染，增加死亡率，增大经济损失。笔者根据近期诊治的一例猪圆环病毒和传染性胸膜肺炎混合感染的病例情况进行分析总结，以便为相似症状的病例提供参考。

1 发病过程

2021 年11 月5 日，广西壮族自治区来宾市某3 000 头育肥猪场部分猪只突然发病，出现采食量下降、高热，咳嗽、呼吸困难等为主要症状的疾病，猪群的咳嗽比例约20%左右，平均体重40～60 kg。了解得知，出现发病情况后，该养殖户曾使用阿莫西林，庆大霉素，鱼腥草等药物进行治疗，但效果不佳。经笔者对病死猪只进行病理剖检，结合实验室诊断结果，最终确诊该猪群为猪圆环病毒PVC2 和传染性胸膜肺炎混合感染。随后，根据笔者的临床疾病防控经验及实验室药敏试验结果，采取了一系列防治措施，经过14 d后猪群的病情明显好转。最终将该猪群的全程死淘率控制在5%。

2 临床症状

发病猪只精神沉郁，体温升高达40～42 ℃，采食量明显下降或废绝，被毛松乱，皮肤苍白，拥挤聚堆，不喜走动，流脓性鼻涕，呼吸困难，咳嗽、呈明显的腹式呼吸，眼睑水肿，眼结膜潮红，呈犬坐姿势。在患病猪只的耳朵、颈部及背部皮肤表面可见出血斑块。个别猪只不表现任何明显的症状，突然死亡。病死猪只的鼻腔和口腔内有大量的泡沫样血液流出。

3 病理变化

将部分病死猪只进行病理剖检，剖检发现病死猪只病理变化基本相似，主要病理特征为：血凝不良，全身淋巴结肿大，特别是纵膈淋巴结和腹股沟淋巴结充血肿胀明显，淋巴结切面湿润，有大量浑浊液体流出。气管支气管周围有大量炎性细胞浸润，肺脏病变严重，大面积充血肿胀，肺泡扩张，心叶、间叶、膈叶出现紫红色坏死灶，质地坚硬，边缘钝圆，肺间质增宽。胸腔积液呈淡黄色，胸膜变厚，表面弥散性附着黄白色纤维素样渗出物，渗出严重病例，造成肺脏，胸膜，心包粘连。肾脏苍白贫血，肿大，肾皮质有不同大小的坏死点，肝脏，脾脏，胆囊肿胀，出血。

4 实验室诊断

结合临床症状和病理变化，初步诊断为猪胸膜肺炎和其他病毒性疾病混合感染。随后，采集病死猪只的肺脏、淋巴结和血液送检，分离血清，通过PCR（聚合酶链式反应）检测技术，分别进行了猪伪狂犬、猪圆环病毒病、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒鉴定；同时进行了细菌分离培养，及染色镜检；最后进行药敏试验。

4.1 病毒鉴定

分别采集发病猪场10 头病死猪只的肺脏、淋巴结、脾脏、血液等病料加入适量的DMEM 后剪碎研磨，匀浆10 000 rpm，离心取上清，置于-80 ℃冰箱保存。参照所使用的试剂盒的说明书步骤进行病毒的DNA 提取，以提取得到的DNA 为模板，分别加入含猪伪狂犬、猪圆环病毒病、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒、猪胸膜肺炎引物的反应体系，加入待检样品DNA 模板，按照PCR 方法进行病毒基因片段扩增，扩增产物置于1%的琼脂糖凝胶电泳上跑胶，最后使用紫外凝胶成像仪器进行结果分析。经过上述PCR 检测，结果显示：猪伪狂犬与猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒呈阴性，琼脂糖凝胶电泳上出现猪圆环病毒引物、猪胸膜肺炎的引物对应大小的条带，表明样品PVC2、猪胸膜肺炎结果呈阳性，阳性率分别为80%和90%。询问得知，该养殖场从未进行猪圆环病毒疫苗免疫，因此推断该场猪群此次为野毒感染[3]。

4.2 细菌分离培养

无菌操作采集患病猪只的肺脏和淋巴组织，接种于巧克力琼脂平板和含有5%山羊血的鲜血琼脂平板上，置于37 ℃恒温箱中培养36 h 后，仔细观察菌落的生长状态，发现无溶血现象的发生，菌落表面光滑，半透明状，呈“卫星状”生长。无菌操作挑取单个菌落涂片，经过革兰氏染色后镜检，可看见革兰氏阴性丝状及球杆状短小杆菌，无芽孢，确诊为猪传染性胸膜肺炎阳性，结果与PCR 结果一致。

4.3 药敏试验

检测分离株对所选6 种药物的敏感性，在细菌分离培养基的平板表面贴上头孢氨苄、阿莫西林、头孢噻肟钠、氟苯尼考、替米考星、阿奇霉素药敏片，置于37 ℃恒温箱中培养24 h 后，测量抑菌环的直径，以此判断药物的敏感性，为治疗药物的选择提供依据。药敏试验结果显示氟苯尼考的抑菌圈最大，抑菌圈直径均〉23 mm，表明其对本次分离到的猪传染性胸膜肺炎高度敏感；阿莫西林、头孢噻肟钠和替米考星次之，抑菌圈直径在15～19 mm 之间，中度敏感；阿奇霉素抑菌圈直径为0，表明其对本病不敏感。

根据现场调查，结合临床症状及病理剖检变化以及上述实验室检测结果，确诊该猪场为猪圆环病毒PVC2 和传染性胸膜肺炎混合感染。

5 防治方案

根据实验室确诊结果，为本猪场制定了如下疾病处理方案：

5.1 紧急接种

猪只全群使用猪圆环病毒PVC2 基因工程灭活疫苗，进行紧急免疫接种，免疫顺序为先健康猪，后患病猪，最后发病严重猪。为防止免疫过程中出现应激，接种前中后3 d 在饮水中加入多维和黄芪多糖类保健药物，提高猪群的整体抗应激能力。

5.2 治疗用药

对于发病猪群进行对症治疗，对于表现高热症状的猪群，肌肉注射氨基比林，剂量5～10 mL，1～2 次/d，连用3～5 d，缓解高热症状。结合药敏试验结果，选择20 mg/kg·bw 氟苯尼考搭配0.2 mL/kg·bw 黄芪多糖注射液进行配合治疗，1 次/d，连用7 d。同时在猪群日粮中添加氟苯尼考、黄芪多糖粉剂和卡巴匹林钙，剂量参考使用说明，饮水中添加多维和电解质，增强猪群整体的抗病能力。

5.3 加强饲养管理

根据外界气温变化，在确保猪舍温度的前提下，及时调整猪舍的通风量，减少舍内氨气、硫化氢等有害气体含量，增大舍内氧气供给；静默生产，尽量避免驱赶猪群，以免造成猪群应激；对于发病的猪舍采取隔离管理，每天用1:200 的过硫酸氢钾带猪喷雾消毒，及时清扫舍内粪便及污物，保持舍内环境清洁[4]。对病死猪只采用深埋等无害化处理方式进行处理。

使用上述方案对患病猪群进行治疗至第7 天时，患病猪群体温恢复正常，采食量逐渐上升，14 d 后猪群精神状况恢复，死亡率得到有效控制，没有继续出现发病状况；同时对于未发病的栋舍采用上述方法进行了保健预防。

6 讨论

细菌、病毒、寄生虫等各类病原微生物的存在，严重制约着养猪业的飞速发展，减少和消灭各类病原微生物对猪群的危害，受到广大科技工作者和养猪从业者的广泛关注。近年来，猪群发病多呈现混合感染的态势，感染后表现的临床症状十分复杂[5]，增加了诊断难度。对于该病防治的关键在于早发现、早确诊，病原明确后，采取针对性预防和治疗措施，才能有效控制该病的发生。

结合该养殖户猪群此次发病情况来看，主要是由于该场区免疫程序设置不合理，猪圆环病毒PVC2 疫苗免疫缺失，导致猪群抗体水平低下，极易受到野毒攻击而发病。加之本猪场内生物安全防控体系不健全，日常饲养管理水平低下，造成发病猪舍内饲养环境较差，氨气味重，猪群密度高，养殖户日常消毒意识较差，病原微生物在猪舍内频繁滋生，从而导致了猪传染性胸膜肺炎继发感染的发生。

笔者认为要杜绝该病的发生，首先必须要加强广大养殖户的标准化养殖意识，根据本地区和本场的实际情况制定科学合理的免疫程序，严格执行免疫操作。其次，饲养管理水平低下是导致继发感染的主要诱因，这就要求广大养殖户在日常饲养过程中务必重视猪舍内的饲养管理工作，保证猪舍内饲料、饮水供应充足，温湿度适宜，通风良好，将日常带猪消毒工作落到实处，尽量减少猪舍内各类病原微生物的含量，将发病风险降到最低。最后，混合感染性疾病的临床症状复杂，单纯依靠临床症状和病理剖检特征很难找到真正的致病源，因此，对于混合感染性疾病的确诊必须要依靠实验室诊断技术手段，明确病原，对症治疗。对疾病的治疗不得盲目用药，以免导致耐药菌株和药物残留的出现，可以采用药敏试验选择高敏感性抗菌药。

综上所述，只有采取综合防治措施，从免疫接种、生物安全防控、加强饲养管理等各个环节着手，才能极力避免猪圆环病毒PVC2 和传染性胸膜肺炎混合感染的发生。