不同肝病患者血清自身抗体谱阳性率调查*

孙 璀,曹琳琳,刘 俊

自身抗体是指针对自身组织、器官、细胞或细胞成分的抗体。正常人体血液中存在低滴度的生理性自身抗体,不会引发疾病。当自身抗体滴度升高至一定水平后,就会破坏机体的免疫耐受平衡,引起器官组织受损,导致自身免疫性疾病的发生。自身免疫性肝病(autoimmune liver disease,ALD)是因机体免疫功能紊乱引起的一组特殊类型的慢性肝病。因自身免疫反应攻击肝组织,导致肝组织或胆管发生慢性损伤。ALD潜伏期较长,患者临床表现与其他类型肝病相似,可能影响了早期诊断。目前,临床多通过肝功能和自身抗体检测等诊断ALD,但因该系列疾病起病较为隐匿,临床表现多变,导致诊断较为困难[1]。临床资料显示,不同类型的ALD具有其相对特有的自身抗体,进一步说明了自身抗体谱诊断ALD的重要性[2]。既往研究发现,自身抗体也存在于其他肝病患者[3],使诊断的特异性受到了质疑。相关研究表明,病毒性肝炎的发生及发展可能与自身抗体的免疫应答功能有关[4]。本研究检测了不同肝病患者血清自身抗体谱的变化,现将检测分析结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2019年3月～2022年3月我院收治的自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者51例(男性4例,女性47例,平均年龄为45.7±5.3岁)、原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者27例(男性1例,女性26例,平均年龄为55.4±4.7岁)和原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)患者14例(男性7例,女性7例,平均年龄为53.3±5.6岁)。符合有关ALD的诊断标准[5,6]。参照《自身免疫性肝炎诊断和治疗指南(2021年)》[5]将AIH患者分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。另选择慢性乙型肝炎(CHB)61例,慢性丙型肝炎(CHC)15例(男51例,女25例,平均年龄为36.4±6.2岁),符合慢性乙型肝炎和丙型肝炎防治指南的诊断标准[7,8],非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者34例(男18例,女16例,平均年龄为37.6±5.3岁),符合非酒精性脂肪性肝病防治指南的诊断标准[9],药物性肝损伤患者27例(男14例,女13例,平均年龄为38.9±5.7岁),符合药物性肝损伤防治指南的诊断标准[10],和健康体检者68例(男性47例,女性21例,平均年龄为37.6±4.6岁)。排除标准:(1)肝硬化或肝癌;(2)药物性肝损伤和酒精性肝病;(3)合并严重的器质性疾病;(4)重叠综合征。本研究获得我院医学伦理委员会审核、通过,受试者签署知情同意书。

1.2 血清自身抗体谱检测 使用欧蒙公司提供的EUROBLot Master Ⅱ全自动免疫印迹分析仪及其配套试剂检测血清抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)、抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗体(SLA/LP)、抗肝肾微粒体抗体Ⅰ型(LKM-1)、抗跨膜糖蛋白210kD抗体(gp210)、抗多核点抗体(Sp100)、抗肝细胞溶质抗原Ⅰ型(LC-1)、抗3E和抗早幼粒细胞性白血病(PML)和抗Ro-52抗体(抗体滴度>1:100判为阳性)。

1.3 统计学处理 应用IBM SPSS Statistics 24.0软件行统计学分析,计数资料的比较采用x2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同肝病患者与健康人血清自身抗体阳性率比较 ALD患者血清AMA-M2、抗SLA/LP、抗LKM-1、抗gp210、抗LC-1、抗3E、抗PML和抗Ro-52阳性率显著高于其他肝病组(P<0.05,表1)。

表1 不同肝病患者与健康人血清自身抗体阳性率(%)比较

2.2 不同ALD患者血清自身抗体阳性率比较 AIH组患者血清抗SLA/LP、抗LKM-1和抗LC-1阳性率显著高于PBC组或PSC组(P<0.05),而PBC患者血清AMA-M2、抗gp210和抗3E阳性率显著高于AIH组或PSC组(P<0.05,表2)。

表2 不同病理类型ALD患者血清自身抗体阳性率比较(%)比较

2.3 不同亚型AIH患者血清自身抗体阳性率比较 Ⅱ型AIH患者血清抗LKM-1和抗LC-1阳性率显著高于Ⅰ型或Ⅲ型患者(P<0.05),而Ⅲ型患者血清抗SLA/LP阳性率显著高于Ⅰ型或Ⅱ型(P<0.05,表3)。

表3 不同亚型AIH患者血清自身抗体阳性率(%)比较

2.4 不同类型病毒性肝炎患者血清自身抗体阳性率比较 CHB与CHC患者血清自身抗体阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05,表4)。

表4 不同类型病毒性肝炎患者血清自身抗体阳性率(%)比较

3 讨论

ALD是因患者自身免疫系统发生免疫应答及免疫功能紊乱后,向肝脏攻击导致肝组织发生炎症反应、胆管坏死的一种慢性疾病。临床表现多样,常累及关节和神经系统等[6]。ALD患者的临床表现多样且不典型。人体感染慢性肝炎病毒后,机体会产生相应的体液和细胞免疫反应,而ALD是机体免疫系统对自身细胞或分子发生免疫应答。近年来有研究发现,慢性病毒性肝炎患者体内可检测出多种自身抗体,提示慢性肝炎或与自身免疫功能紊乱存在某种关联[6]。自身免疫反应参与了慢性肝炎的疾病进展过程,故自身免疫反应与慢性病毒性肝炎的部分生化指标变化趋势相似,难以通过检测生化指标进行鉴别诊断[11]。

相关研究指出,不同类型的ALD患者因免疫功能紊乱类型不同而存在临床表现的差异,自身免疫抗体也明显不同[12]。自身免疫抗体谱对于不同类型的ALD的诊断和鉴别至关重要[13,14]。在最新的国际AIH诊疗指南中明确指出,与AIH诊断相关的自身抗体包括ANA、ASMA、抗LKM-1和抗LC-1等传统应用的抗体[15]。抗SLA/LP 抗体被许多学者证明为 AIH 高度特异性的自身抗体,并发现抗SLA/LP抗体可能与AIH的发病机制有关。抗SLA/LP抗体在AIH所有相关自身抗体中最具有诊断价值[16]。临床资料显示,抗SLA/LP抗体在AIH患者的阳性率为10%～30%[17]。本研究结果发现AIH患者血清抗SLA/LP抗体阳性率为21.6%。Ⅲ型AIH是最不确定的类型,以抗SLA/LP抗体阳性为特征。本研究发现,Ⅲ型患者抗SLA/LP阳性率显著高于Ⅰ型或Ⅱ型患者,进一步提示血清抗SLA/LP阳性或可作为诊断Ⅲ型AIH的依据。

AIH和PBC是ALD中发病率最高的两种疾病。AIH以自身免疫细胞攻击肝细胞为主,早期症状无特异性,易与病毒性肝炎相混淆;PBC是一种慢性进行性胆汁淤积性肝病,主要影响小叶间胆管,早期治疗预后较好。如不及时治疗可进展为胆汁淤积性肝硬化,而影响患者预后[18]。随着对ALD了解的深入,相关自身抗体检测在其诊断方面的重要性越来越显著。虽然自身抗体可用于诊断ALD,并用于病情及预后评估,但不同类型ALD患者自身抗体谱不同[19]。ALD的发病机制与免疫功能异常密切相关,自身抗体在其发病机制中起着重要的作用。每种ALD又具有特征性的自身抗体[20],故自身抗体检测对ALD的诊断和临床分型等具有重要的意义。AMA-M2亚型抗体对PBC具有较高的诊断灵敏度和特异度,PBC患者AMA-M2抗体早在无症状期即可检测出阳性[21,22]。通过检测血清AMA-M2和抗3E等可对患者疾病类型进行鉴别。