黄柏药对的配伍机理与药理作用研究进展＊

王宝才，李俊江，杨小源，徐志伟

（甘肃省中医院，甘肃 兰州 730050）

黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.的干燥树皮，味苦，性寒，归肾、膀胱经。具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮功效；用于湿热泻痢，黄疸尿赤，带下阴痒，热淋涩痛，脚气痿躄，骨蒸劳热，盗汗，遗精，疮疡肿毒，湿疹湿疮[1]。黄柏的药用历史源远流长，两千多年前的《神农本草经》中就有黄柏的药用记载，称其为“檗木”，位列上品：“味苦寒，主五脏肠胃中结热，黄疸，肠痔，止泄利，女漏下，赤白阴阳蚀疮。”《本草经集注》中称之为“黄檗”[2]。

研究表明黄柏主要含有生物碱类、黄酮类、挥发油类、甾醇类、酚酸类、苯丙素类、三萜类、酰胺类、多糖类等成分，其药理作用亦较为广泛，具有抗炎、抑菌、止血、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、保护神经、平喘、预防骨质疏松等药理作用[3-7]。黄柏在数千年临床应用过程中，逐渐与某些清热药、温里药、泻下药、补虚药、除湿药等组成固定的配伍组合即药对，为了便于分类探讨，根据药对的核心功效与主治病症的差异，将黄柏药对分为“清热类”与“除湿类”。比如黄柏与黄连、白头翁等组成以清热为核心功效的药对，与苍术、甘草等组成以除湿为核心功效的药对[8-9]。尚未见有文献对黄柏药对的研究现状进行总结，故文章通过梳理黄柏药对的研究进展，以期为黄柏药对的应用与开发提供借鉴。

1 清热类药对

黄柏与黄连、白头翁、肉桂、大黄、知母、黄芩配伍，常用于治疗热毒泄痢、斑疹疮毒、血淋、高脂血症、糖尿病等。

1.1 黄柏与黄连配伍

黄柏与黄连配伍最早出自东汉张仲景《伤寒论》。刘完素曰：“诸苦寒药多泄，惟黄连、黄柏性冷而燥，能降火去湿，而止泄痢，故治痢以之为君。”两者相须为用，治疗风火之目疾、呕吐、湿热痢疾、黄疸、吐血、便血及痈疡斑疹丹毒等。张立宏等[10]采用网络药理学预测筛选出35个潜在活性成分与34个关键靶点基因，药对通过多靶点、多信号通路治疗溃疡性结肠炎（UC）。吴铁松等[11]考察了不同配伍比例对耐万古霉素肠球菌的抑菌活性，发现黄柏－黄连比例为1∶2 时，抑菌效果最强。欧阳学认等[12]通过拆方研究，发现黄柏－黄连药对能显著降低高脂高糖饮食小鼠的总胆固醇、甘油三酯、血糖。马红兵等[13]研究发现，黄柏－黄连提取液对放射性皮肤损伤表现出明显的防治作用，具有良好的消炎、镇痛、止痒效果。李林芳[14]观察对比了药对水煎液湿敷与33%硫酸镁湿敷对渗漏性静脉炎的疗效，发现药对总体疗效优于硫酸镁。韩志强等[15]优选出黄连－黄柏（1∶7）的最佳提取工艺：超声功率360 W、乙醇浓度90%、提取时间30 min、料液比1:25。

1.2 黄柏与白头翁配伍

黄柏与白头翁配伍始见于《伤寒论·厥阴篇》白头翁汤。药理研究表明，白头翁具有广泛的抑菌和杀虫作用，对痢疾杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、疟原虫、溶组织内阿米巴原虫滋养体、阴道毛滴虫具有杀灭作用。常用于热毒血痢，阴痒带下，阿米巴痢疾[16-18]。两药相须为用，治疗急慢性菌痢，阿米巴痢疾证属热毒内盛者。俞赟丰等[19]对治疗UC 的方药进行数据挖掘研究，结果表明白头翁－黄柏药对关联的支持度为84.62%，证明白头翁－黄柏对治疗UC起到了关键作用，是治疗UC的核心药对。张莉[20]研究发现，黄柏－白头翁（1∶1）提取液对大肠杆菌具有抑制作用，并可改善小鼠肠道微生物区系，从而治疗大肠杆菌引起的腹泻。

1.3 黄柏与肉桂配伍

黄柏与肉桂配伍见于《兰室秘藏》通关丸（又名滋肾丸），黄柏属于清热药而肉桂属温里药，两者属于反佐配伍，肉桂起到引药入血、引火归元作用。任钧国等[21-23]研究发现肉桂能促进黄柏中小檗碱在正常大鼠前列腺中的渗透性，并且能明显增强或改变知柏对大鼠性激素的作用，上述研究一定程度揭示了肉桂引经作用的分子机制。王迅等[24-25]发现肉桂可促进知柏活性成分在组织中的分布，机理可能是反佐配伍肉桂后改变了知柏中活性成分的跨膜转运，从而改变活性成分的分布；肉桂反佐配伍亦能促进知柏中活性成分下调IL-1α等炎症因子的表达，从而起到抗炎及保护泌尿系统器官的双向调节作用。

1.4 黄柏与大黄配伍

黄柏与大黄配伍见于《金匮要略》卷中大黄消石汤，主治黄疽腹满，小便不利而赤，自汗出。大黄具有广泛的药理作用，体外抑菌实验表明：大黄所含蒽醌类成分能抑制细菌及真菌的生长[26]。李建红等[27]发现大黄与黄柏具有良好的体外抗沙眼衣原体（Ct）的作用，其药效物质基础为大黄素、芦荟大黄素、大黄酸及盐酸小檗碱。黄敏[28]发现大黄的7种单体成分中，芦荟大黄素的抗Ct效果最好；黄柏的9种单体成分中，盐酸小檗碱的抗Ct效果最好。吴丹[29]将黄柏碱与大黄酸制成黄柏碱－大黄酸拼合产物，药理实验结果表明：拼合产物能极显著抑制HK-2 细胞活力，且其细胞毒性较单体明显降低；拼合产物的降尿酸作用明显优于黄柏碱与大黄酸的物理混合物，且可增强盐酸黄柏碱的降尿酸作用。其降尿酸机制为调节体内GLUT9 等尿酸转运体的mRNA 表达。裴妙荣等[30]以蒽醌类、生物碱类成分提取量为指标，考察了大黄、黄柏合提与单提工艺，发现由于药对中酸碱成分反应析出，导致合提药液中游离蒽醌、总蒽醌、小檗碱含量显著下降。

1.5 黄柏与知母配伍

黄柏与知母配伍见于《兰室秘藏》通关丸（又名滋肾丸），现代药理研究发现黄柏－知母配伍具有降血糖、改善糖尿病大鼠认知功能障碍、抗炎、改善肥胖症、抑制前列腺增生等作用。苏萌等[31]证实脱水淫羊藿素是药对抗炎的物质基础，其通过TNF通路发挥抗炎作用。金惠杰等[32]证实黄柏－知母对糖尿病大鼠及HepG2 胰岛素抵抗细胞具有显著的降糖、降脂作用，作用机制为药对降低胰岛素水平、提升胰岛素敏感性、促进糖脂代谢。章常华等[33]发现不同剂量的黄柏—知母药对均对肥胖症有良好的防治作用，作用机制为改善脂质代谢，调节胆汁酸代谢。林爱华等[34]发现黄柏能明显减少知母中芒果苷在大鼠体内的吸收，芒果苷的体内药物动力学行为发生了显著变化。王瑞成等[35]比较了黄柏－知母药对不同浓度乙醇洗脱部位的抗炎活性，发现30%乙醇洗脱部位为抗炎的药效部位，抗炎机理为抑制iNOS、COX-2蛋白表达及炎症因子分泌。

1.6 黄柏与黄芩配伍

黄柏与黄芩配伍见于《肘后备急方》黄连解毒汤，治一切实热火毒，三焦热盛之证。其中黄芩善于清上焦之火，黄柏善于清下焦之火。陈桂红等[36]比较了不同配伍比例对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制作用，发现黄柏与黄芩配比为1∶2 时，2 味药的抑菌效果最佳且具有协同作用。王秋红等[37]发现黄柏与黄芩配伍后能显著保护黄药子引起的雌性大鼠肝损伤，其机制为提高肝脏的GSH和抗氧化水平，降低血清ALT、ALP 及AST 水平，减轻干细胞损伤。马秉智等[38]预测了黄柏-黄芩治疗银屑病的物质基础和机制，发现黄芩苷、小檗碱等与银屑病关键靶点表皮生长因子蛋白具有较高的亲和力，黄芩苷、汉黄芩苷、小檗碱及黄柏碱为代表的成分是治疗银屑病的特征成分。李桐等[39]通过分子热力学特征探讨黄柏与黄芩配伍产生沉淀的机理，发现沉淀过程是由焓驱动非共价键结合的化学反应，并非物理凝聚吸附沉淀。

2 除湿类药对

黄柏与苍术、栀子、甘草、当归配伍，常用于治疗胆囊炎、肝炎、湿疹、慢性前列腺炎、痛风等病症。

2.1 黄柏与苍术配伍

黄柏与苍术配伍最早出自元代危亦林《世医得效方》卷九苍术散，黄柏与苍术各等分，主治湿热下注，下肢酸软无力，足膝红肿热痛，带下色黄而臭，阴部湿疮，小便短赤，舌苔黄腻者。朱培霞等[40]考察了不同配伍比例对药效成分的影响，发现黄柏中生物碱的提取量与苍术的占比成反比，当黄柏-苍术配比为3∶1 时，小檗碱的提取量最高。张思旋等[41]得到与痛风相关的“活性成分—潜在靶点”网络包含17 个靶点，KEGG 通路富集分析得到通路23 条，GO功能富集分析得到GO条目149个。潘志等[42]给高尿酸血症小鼠灌胃黄柏-苍术提取物，发现给药1周后小鼠血清尿酸水平显著降低。张杨等[43]将黄柏-苍术按1∶7配比进行提取，分别给大鼠灌胃药对提取物与盐酸小檗碱单体，发现药对可以延缓盐酸小檗碱在大鼠体内的代谢速度。

2.2 黄柏与栀子配伍

黄柏与栀子配伍见于《伤寒论》栀子柏皮汤，主伤寒、身黄发热。现常用于治疗急性黄疸型肝炎、胆囊炎、重症肝炎等。韩静文等[44]对栀子柏皮汤拆方研究发现，与栀子苷单体相比较，药对中栀子苷在大鼠体内的药动学参数AUC 及T1/2明显增加；与栀子单味药相比，药对中栀子苷在大鼠体内的药动学参数AUC0-t、AUC0-∞及T1/2显著增高。肖旭等[45]研究发现，黄柏单味药的保肝利胆作用较弱，与栀子配伍后，药对能显著降低小鼠血清ALT、AST 与肝组织MDA 水平，其效果强于栀子柏皮汤给药组，药对还能同时升高肝组织中SOD的水平，表明黄柏与栀子通过交互协同发挥保肝作用。李磊[46]采用阳黄症大鼠模型为研究对象，发现黄柏-栀子药对能显著降低大鼠血清中ALT，AST，TBIL，TBA 和补体C3，C4表达水平，显著提高肝SOD活性。

2.3 黄柏与甘草配伍

黄柏与甘草配伍亦见于《伤寒论》栀子柏皮汤。有医疗机构将黄柏、甘草2味药制成洗剂，用于治疗皮肤湿疹瘙痒、伤口感染等，疗效确切[47]。不同学者对黄柏与甘草配伍煎煮过程进行了研究[48-51]，均发现黄柏与甘草合煎后产生明显沉淀，其沉淀主要由甘草中酸性成分、黄酮类成分与黄柏中生物碱反应生成，建议当处方中同时出现黄柏与甘草，宜将黄柏、甘草分别煎煮提取，煎煮液合并后应用。肖旭等研究发现黄柏-甘草配伍能显著降低肝损伤小鼠肝组织中MDA水平，并能显著增加正常大鼠胆汁中胆固醇含量。

2.4 黄柏与当归

黄柏与当归配伍见于《兰室秘藏》经典名方当归六黄汤，其主要治疗有盗汗，自汗，发热，汗多等症。刘胜京等[52]采用网络药理学探讨黄柏-当归治疗慢性前列腺炎（CP），共筛选出46 个活性成分，药物与疾病共同的靶点有159个，黄柏-当归通过调控细胞增殖、凋亡、氧化及抗氧化等生物学过程治疗慢性前列腺炎，通过多成分、多靶点、多途径治疗CP。吕涛等[53]以有效部位进行配伍研究，发现黄柏黄酮-当归多糖-岩陀黄酮比例为1∶1∶2 时，能有效提升猪外周血淋巴细胞的转化，显著提升环磷酰胺所致免疫抑制模型大鼠淋巴细胞、白细胞数量，提高靶动物的免疫功能。

3 讨论

3.1 黄柏药对的来源

药对又称对药、兄弟药、姊妹药，是一种固定的最小组方单位，在临床治疗中具有特殊的地位，两药相配多具有协同增效、纠偏减毒作用。经典的黄柏药对组合多来源于历代经典方剂，为后世所尊崇并且不断地充实其配伍理论、临床应用场景；目前黄柏药对的研究主要以经典药对为主，如黄柏-黄连、黄柏-白头翁、黄柏-大黄、黄柏-肉桂、黄柏-知母等等。随着中医药数据库、平台的建立及相关算法的应用，中医药数据挖掘研究方法日益丰富，中医药研究人员通过频率分布分析、关联规则分析、因子分析、聚类分析、复杂网络分析等算法，挖掘出一批含黄柏方剂高频核心药物组合，这极大地丰富了黄柏药对组合的内涵，如黄柏-冰片、黄柏-生地黄、黄柏-薤白、黄柏-细辛、黄柏-龟甲、黄柏-茯苓等。

3.2 黄柏药对研究方法

3.2.1 提取工艺研究

提取工艺研究主要有以下3个方面：（1）考察不同提取方法、提取溶剂对黄柏药对的提取效果影响，常见溶剂有水、不同浓度的乙醇水溶液等，常见的提取方法有超声提取法、加热回流提取法、渗漉法等。（2）考察不同配伍比例对黄柏药对药效成分溶出的影响，优选出药对最佳配伍比例，如黄柏-苍术配比为3∶1 时，小檗碱的提取量最高。（3）考察药对分提与合提对药效成分溶出的影响，如黄柏-甘草采用合提时，黄柏中生物碱与甘草中酸性成分反应生成沉淀，黄柏与甘草宜分提后合并煎液应用。

3.2.2 网络药理学与分子对接技术预测药效物质基础

网络药理学是一种利用系统生物学、网络分析和计算化学等多学科知识研究药物与疾病之间关系的方法。分子对接技术则是一种计算机辅助的药物设计方法，利用计算机模拟研究药物与靶点之间的结合情况。上述方法从药物靶点到细胞、组织、器官和整个生物系统层面，全面揭示药物作用的机制和效应，从而为药物发现和优化提供更加全面、准确、高效的手段。目前网络药理学与分子对接技术在中药药对研究领域已有较多应用，对阐明药对作用机制发挥了重要作用，但相关研究多停留在理论预测阶段，实验验证工作开展的相对较少。有学者采用网络药理学和分子对接技术预测了黄柏-知母抗炎的主要活性成分是脱水淫羊藿素，并在细胞水平证明其通过TNF通路发挥抗炎作用。

3.2.3 药效与毒性试验

通过在体或离体动物实验，观察验证药对对相应疾病的治疗效果，丰富了传统中药功能主治的内涵，亦佐证了药对配伍的科学有效。通过毒性试验证明药对配伍的安全有效，是对传统配伍增效减毒理论的科学阐释。有学者研究了黄柏-白头翁提取物对小鼠腹泻的防治作用与安全性，发现药对提取物具有显著地抑制大肠埃希菌的作用，并能促进肠道有益菌生长，抑制有害菌生长；提取物对小鼠安全无毒副作用。黄柏-苍术提取物能显著地降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，具有开发成为治疗痛风的中成药的潜力。体外抑菌试验表明：黄柏-黄连提取液对耐万古霉素肠球菌有良好的抑制作用，为开发抗耐药菌的中药制剂提供了新思路。

3.2.4 体内药代动力学研究

由于中药成分复杂多样，药代动力学研究对象往往选取某一种具有代表性、特征性的成分，通过测定化学成分在体内的药动学参数，解释传统中药配伍理论的内涵，证明了配伍理论的正确性。通关丸中肉桂属于佐使药，既能佐制黄柏苦寒之性，又能引火归元兼有引经之作用；研究表明，肉桂能加强黄柏中小檗碱在前列腺的渗透性，证明了肉桂的在处方中的引经作用，揭示了传统配伍理论的科学内涵。黄柏与知母配伍后，随着黄柏配伍比例的增加知母中芒果苷在大鼠体内的吸收显著减少，表明配伍比例不同对药效成分的吸收亦有明显影响。

3.2.5 不同炮制品对药效的影响

炮制能够改变药物的四气五味、升降浮沉、归经、毒性、药效等，因此同一药物的不同炮制规格能够影响药对的成分溶出、药效发挥。有学者比较了黄柏-知母药对盐炙前后的成分与药效变化，发现盐黄柏-盐知母药对中芒果苷、黄柏碱、小檗碱等的含量增加，新芒果苷、绿原酸、柠檬苦素等的含量降低；黄柏-知母能够抑制肾阴虚模型大鼠肝、肾、小肠组织中Na+-K+-ATP 酶活力，改善阴虚内热的症状，盐黄柏-盐知母的抑制酶活力的作用更强，滋阴清热作用得到进一步增强。

3.2.6 有效成分/组分配伍研究

传统药对的配伍停留在饮片层面，由于饮片所含成分复杂，质量难以控制，疗效机理难以明确。随着分离纯化技术的进步，已经从中药材中分离出数以千计的有效成分或有效组分，研究人员以中医药理为指导，考察有效成分/组分配伍后作用机理，符合中药质量可控、安全有效、机理清楚的发展要求，扩大了传统中药配伍的内涵。有学者将黄柏碱、大黄酸单体制成黄柏碱-大黄酸拼合产物，分析了拼合产物的结构特征、理化性质、药效、毒性及作用机理，发现拼合产物比单体毒性更低，降尿酸作用比单体得到增强。

4 结语

黄柏作为应用历史悠久的常用中药，目前对其药理作用、化学成分、经典药对的配伍机理有较为深入的研究，并取得了一系列创新性的研究成果；对黄柏药对的配伍机理研究揭示了传统中药配伍理论的科学内涵，佐证了临床药对配伍应用的合理性、有效性。文章归纳和总结了经典黄柏药对的配伍机理和临床应用研究，可知黄柏与其他药物配伍能起到增效、减毒的作用。随着中医药数据挖掘研究方法的发展，已整理挖掘出一批新型黄柏药对如黄柏-冰片、黄柏-生地黄等等，药对挖掘并进行深入研究将是黄柏药对研究的又一着力点。