何 芳,曲 英
(大连市普兰店区生态环境事务服务中心,辽宁 大连 116200)
松材线虫病又称松树萎蔫病(Pine wilt disease),是由松材线虫寄生在松树体内引起的一种毁灭性森林病害。该病具有致死率高、极难防治等特点,被列为国际Ⅰ级检疫对象[1],给我国林业生态系统造成严重危害[2]。由于松材线虫病的传播速度非常迅速,危害性极高,松树感染松材线虫病后难以治愈,病死率极高,因此又被称之为 “松树癌症”[15]。松材线虫病适生范围广、传播速度快、寄主种类多、感病松树死亡率高、防治困难[16]。在热带、亚热带地区蔓延较为迅速、危害严重,造成严重的经济和生态损失[17]。而我国是遭受松材线虫病危害最严重的国家之一,目前约有17个省区仍受松材线虫病影响[3]。2016年松材线虫病在辽宁首次发现后,迅速扩散蔓延,目前已在沈阳、大连、丹东、铁岭等7市20个县(区)发生[4]。
松材线虫的不同生长阶段(虫卵期、幼虫期、成虫期)的生长特性有所不同,具有不同的危害程度[5]。该病害早期疾病症状不明显,很难被发现[6]。主要依靠松褐天牛携带传播,其生活史主要发生在松树或松褐天牛体内,而松褐天牛的幼虫主要在松树体内活动[7]。松材线虫进入松树木质部的途径为天牛取食树皮时的伤口,通过取食寄主植物的上皮细胞或树脂道,从而大量繁殖逐渐扩散至全株[8],也可通过在衰弱木伤口上产卵进行传播[9]。由于该疫病在我国出现较晚,相关技术人员对松材线虫病的认识不够深入,因此对我国的森林资源造成巨大威胁,并因此浪费了大量的人力、物力[10]。和普通的植物病害相比,松材线虫病具有较为复杂的发病条件,寄主作物、媒介昆虫、松材线虫以及发病环境等共同导致了松材线虫病的发生与流行[11]。
松材线虫属于线形动物门,是目前我国危害最严重的入侵物种之一[12]。该虫病源于北美洲等地,松树感染松材线虫后致病率为100%,且防治极为困难[13]。松树如果患病,将在6周左右死亡,防控如果不及时,松树林可在几年内大面积毁灭殆尽[14]。
辽宁地区森林资源丰富,林产经济发达,具有大型林业产业基地和木材集散地,交通网络发达。自2016年大连市出现松树线虫病害后,病害发生区已经向北推移超400 km[18]。2018年辽宁省被国家林业和草原局正式列为松材线虫病新发生区,疫情发生面积3400 hm2,由松材线虫造成的经济损失和生态损失难以估量,疫情防控形势极为严峻[19]。研究发现,注干施药技术是将有效成分注入树体,发挥药效主要依靠树木蒸腾作用传导分布药剂,药剂实施精准、防治效率高,适合对我国松材线虫病的主动预防[20]。本研究选用目前大连普兰店地区市售的4种杀线虫剂,利用药剂浸渍法对松材线虫分别进行了毒力测定,以期为当地松线虫病害的防治提供参考。
30%克线磷乳油(山东百士威农药有限公司)、3%克百威颗粒剂(汝州市试剂厂)、30%阿维菌素乳油(威海韩孚生化药业有限公司)、5%高效氯氰菊酯乳油(绍兴天诺农化有限公司)。
松材线虫:将松材线虫接种在琼脂培养基上(灰葡萄孢菌丝体),在25 ℃恒温培养箱中培养7 d,待菌丝体被食用完后放入4 ℃冰箱备用。采用贝曼漏斗分离法收集,使用3% H2O2进行表面消毒7 min,然后用ddH2O清洗至少3次后为实验所用松材线虫。
采用浸渍法测定药剂对线虫的毒力。具体步骤如下:吸取2 mL待测药液于直径6 cm的凹面皿中,随后在每皿中挑入100条处理好的松材线虫,置于25 ℃恒温培养箱中分别培养12、24、36、48 h;于解剖镜下利用针刺触碰法判断线虫的死活情况。
计算死亡率(%):死亡率=死亡线虫数/处理线虫数×100%。同一处理重复3次。
采用Excel对数据进行处理,SPSS26.0计算EC50值。
不同药剂对松材线虫的杀死率情况如表1所示。
由表1可知,不同的药剂对松材线虫表现出不同的致死作用,同时不同浓度的药剂毒力效果也有所差异。其中毒力效果表现最好的药剂为30%阿维菌素乳油,毒力随着药剂浓度的增加而增强,当浓度为10、20、30、40、50 g/L时,用药12 h时松材线虫的死亡率分别为11.26、23.59、35.12、55.67、63.13%,并随着时间的增加毒力持续升高,当时间达到48 h,50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率高达91.86%;30%克线磷乳油毒力效果相对较差,当浓度为10、20、30、40、50 g/L时,用药12 h时松材线虫的死亡率分别为2.35、12.37、23.24、34.51、41.39%,当时间达到48 h,50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率为61.35%;5%高效氯氰菊酯乳油与3%克百威颗粒剂毒力效果最差,当时间达到48 h,两种药剂浓度为50 g/L时,松材线虫的死亡率分别为18.53%、21.35%。
30%克线磷乳油在不同时间段毒力效果如表2所示。
由表2可知,30%克线磷乳油在12 h、24 h、36 h、48 h各阶段表现出不同的毒力效果,EC50值分别为57.576、55.445、47.240、42.471 g/L,随着时间的增长,半数致死量降低较为缓慢。EC50值越小,说明该药剂对松材线虫抑制作用越好。
表1 不同药剂对松材线虫的杀死率
30%阿维菌素乳油在不同时间段毒力效果如表3所示。
表2 30%克线磷乳油在不同时间段毒力
表3 30%阿维菌素乳油在不同时间段毒力
由表3可知,30%阿维菌素乳油在12 h、24 h、36 h、48 h各阶段表现出不同的毒力效果,EC50值分别为37.794、28.636、22.046、16.433 g/L,与30%克线磷乳油相比,半数致死量显著降低,毒力效果较好。在用药48 h时,30%阿维菌素乳油的EC50值为16.433 g/L,显著低于30%克线磷乳油(42.471 g/L)。
本文选用目前大连普兰店地区市售的四种杀线虫剂,即30%克线磷乳油、3%克百威颗粒剂、30%阿维菌素乳油、5%高效氯氰菊酯乳油,利用药剂浸渍法对松材线虫分别进行了毒力测定。结果显示:不同的药剂对松材线虫表现出不同的致死作用,同时不同浓度的药剂毒力效果也有所差异,毒力随着药剂浓度或时间的增加而增强。毒力效果表现最好的药剂为30%阿维菌素乳油,当用药时间达到48 h,50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率高达91.86%;其次为30%克线磷乳油,当用药时间达到48 h,50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率高达61.35%;5%高效氯氰菊酯乳油与3%克百威颗粒剂毒力效果最差,当时间达到48 h,两种药剂浓度为50 g/L时,松材线虫的死亡率分别为18.53%、21.35%。