羊三联四防疫苗免疫效果试验

王会敏，王洪涛，张洪军，王娟，尹利利，张建军，陈瑞兰，刘佳兴，于洪浩，赵晓光，刘国臣，张秀丽

（1.河北省围场县动物疫病预防控制中心，河北 承德 068450；2.河北省承德市农业农村局科技教育工作站，河北 承德 067000；3.四合永畜牧兽医技术服务中心站，河北 承德 068451）

羊梭菌性疾病由梭状芽胞杆菌属中的微生物所引起的一类传染性疾病，包括羊快疫、羊肠毒血症、羊猝疽、羊黑疫、羔羊痢疾等病。此病的特点是发病快、病程短、病死率高，对养羊业危害极大。预防此病除了加强饲养管理，疫苗免疫是最有效的手段。本次试验通过对试验羊只注射三联四防疫苗后，定期采集血清检测抗体，对疫苗免疫效果进行评估。通过本次试验找到最佳的免疫时间，能有效控制本地区的羊梭菌病的发生。

1 试验材料

在本地4 个试验场选取200 只未感染梭菌病的羊（后经试验验证），每个试验场选取50 只羊。

2 试验药品

羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、肠毒血症四联干粉灭活疫苗 （厂家：哈药集团生物疫苗有限公司）。山羊魏氏梭菌病（cp）ELISA 检测试剂盒（厂家：上海科艾博生物）产气荚膜梭菌病核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）（厂家：广州达安生物科技有限公司）。

3 试验方法

免疫前对羊只进行耳标标号，并用红色自喷漆进行标记，在每次采血时用另外颜色进行喷记，标记后对200 只羊进行疫苗注射，每只羊按说明书要求剂量进行免疫，每只羊注射1 毫升，并于免疫后10 天、20 天、30 天、180 天、240 天、360 天、420 天静脉采血≥5 毫升，常温放置析出血清后，通过酶联免疫吸附实验进行抗体效力检样，观察免疫效力维持的时间。

4 健康羊确定及注射疫苗后的状态

在未注射前采集血液，进行梭菌病病原学检测，经过PCR 病原学及Elisa 病原学检测后，确定本次试验羊只为未感染梭菌病的羊只。

免疫后对羊只日常情况进行观察，发现个别羊只精神萎靡、采食下降、饮水偏少等症状，但此症状多在1 天内消失，绝大多数羊只在免疫后无不良反应。

5 血清采集及酶联免疫吸附（ELisa）实验

已经进行初免的羊只于免疫后10 天、20天、30 天、60 天、90 天、120 天、180 天、240 天、360 天、420 天静脉采血收集血清后，常温放置析出血清后，通过酶联免疫吸附实验进行抗体效力检样，观察免疫效力维持的时间。具体实验结果见表1。

6 结果

从表1、图1 中可以看出，用疫苗免疫后10天开始已经有抗体产生，在20 天时产生完全保护抗体，此抗体保护一直持续至240 天，360 天时抗体逐渐减弱，至420 天后所有抗体水平均消失。此试验结果与李勇生、张登基等的试验结果基本一致，与魏晓云、霍子东等在所做的对比试验中的试验结果也基本符合。为了使梭菌疫苗处于保护期内，建议在每年的4 月份与10 月份进行免疫，2 次/年，可有效防止梭菌病的发生。

表1 Elisa 抗体检测结果

图1 梭菌病抗体合格率

再次对200 只产生免疫抗体的羊只进行PCR 病原学检测，检测结果如下表2。

表2 PCR 病原学检测结果

通过此次检验结果可知：有极少数量的羊只在注射疫苗免疫后，仍能感染梭菌病，成为隐藏的携带者，本次实验达到4%，这4%在日常生产管理中不到位的情况下，会把病毒传播到整个羊群，危害养殖户安全。可见疫苗免疫不能完全起到保护作用，若要健康养殖，还应该在日常中加强饲养管理。

7 讨论

对于养殖户来说仅仅通过注射疫苗防治疫病是远远不够的。为了有效防治羊梭菌病发生，还要在平时加强饲养管理。在农区或者牧区春夏之际少抢青、抢茬；秋季避免吃过量的结籽饲草，精料、粗料、青料搭配合理。在常发地区，应定期注射“羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、肠毒血症四联苗”或者“羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、肠毒血症、羊黑疫五联苗”。若遇到发病群，有条件应立即搬圈，避免在低洼潮湿地方，转移到相对高燥的地方放牧。发病羊一般病程较短，往往来不及救治，病程稍长的除了用中药治疗外，亦可用西药抗生素、磺胺类药物共同治疗。对于体质瘦弱及羔羊要单独饲喂，增加营养，提高抵抗力。对圈舍和经常活动场所定期消毒，运草料、粪便等运输车辆定期消毒。饲草饲料严格管理，防治霉变。