脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物对良、恶性胸腹水的诊断价值

王君可

胸腹水是常见临床疾病，患者主要表现为恶心、呕吐、呼吸困难、胸腹痛等症状，严重影响其身心健康[1]。临床上将胸腹水分为恶性和良性两类。由于不同原因引起的胸腹的性质、治疗以及预后存在较大差异，胸腹水的良、恶性鉴别诊断具有重要意义。传统涂片法诊断胸腹水易受人为因素的影响，存在结果阳性率低等问题[2]。胸腹水的脱落细胞学是检查诊断胸腹水的重要手段之一，具有操作简单、创伤小等特点，临床应用较为广泛[3-4]。随着免疫学、分子生物学技术的发展，血清肿瘤标志物检测在诊断恶性胸腹水中得到广泛应用，具有可定量、定性的特点，但由于特异度和灵敏度较低，容易出现误诊、漏诊[5]。近年来，脱落细胞DNA 倍体分析用于诊断恶性肿瘤获得良好效果[6]。目前，临床上关于脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物鉴别诊断良、恶性胸腹水的研究较少，缺乏可靠的临床参考依据。本研究对永康市第一人民医院2020年1月至2022年1月收治的胸腹水患者腹水进行分析，旨在探讨脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物鉴别诊断良、恶性胸腹水的价值，以期为临床提供参考。

1 对象和方法

1.1 对象 共收集到胸腹水患者93 例，其中男54 例，女39 例；年龄43～79（61.34±8.89）岁。根据病理检查结果证实恶性胸腹水40 例（胸水32 例，腹水8 例），良性胸腹水53 例（胸水43 例，腹水10 例）。纳入标准：（1）因胸腔/腹腔积液而行胸腔/腹腔穿刺抽液的患者；（2）具有完整的临床资料；（3）同意配合。排除标准：（1）伴血液系统疾病者；（2）精神疾病者；（3）临床资料不全者。

1.2 脱落细胞DNA 倍体分析 取患者腹水200 ml，提取脱落细胞，将其分成两部分，一部分用于细胞学病理诊断；另一部分行脱落细胞Feulgen 染色DNA 定量分析。采用BS 固定液（甲醇320 ml+甲醛60 ml+冰乙酸20 ml）固定50 min；流水冲洗4～5 次；盐酸酸解1 h，再次流水冲洗4～5 次；Feulgen 染色：将切片置于DNA染液中浸染75 min；流水冲洗4～5 次后浸洗15 min；脱水，湿法封片，按照细胞DNA 定量检测分析仪及其系统诊断软件方法进行细胞DNA 倍体分析。结果判定[7]：以2 倍体细胞为主，未发现异倍体细胞或异倍体细胞峰为阴性（-）；1～2 个DNA 指数＞2.5 的细胞为弱阳性（+）；3～5 个DNA 指数＞2.5 的细胞为阳性（++）；≥6 个DNA 指数＞2.5 的细胞为强阳性（+++）。

1.3 肿瘤标志物测定 采集患者肘静脉血5 ml，2 000 r/min 离心10 min，取血清，采用化学发光免疫分析技术测定糖类抗原（carbohydrate antigen，CA）125、CA153 和癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）。判定结果：CA125≥35 U/ml 或CA153≥25 U/ml 或CEA≥5 μg/L 为阳性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 23.0 统计软件。计数资料以频数和构成比表示，组间比较采用χ2检验，采用ROC 曲线分析诊断良、恶性胸腹水的灵敏度和特异度。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 脱落细胞DNA 倍体分析准确率 脱落细胞DNA倍体分析结果显示，恶性胸腹水38 例，良性胸腹水55例，脱落细胞DNA 倍体分析检测恶性胸腹水准确率为95.00%（38/40），见表1。

表1 脱落细胞DNA 倍体分析准确率（例）

2.2 两组患者血清肿瘤标志物阳性率比较 肿瘤标志物检测显示，恶性胸腹水组CA125、CA153 和CEA 阳性率均高于良性胸腹水组（均P＜0.05），见表2。

表2 两组患者血清肿瘤标志物阳性率比较[例（%）]

2.3 脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水灵敏度和特异度 恶性胸腹水诊断中，脱落细胞DNA 倍体分析预测灵敏度为0.925，特异度为0.858；肿瘤标志物预测灵敏度为0.643，特异度为0.621；脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物预测灵敏度为0.961，预测特异度为0.948。脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水灵敏度和特异度高于脱落细胞DNA 倍体分析与肿瘤标志物单项检测（均P＜0.05），见图1。

图1 不同方法诊断恶性胸腹水的ROC 曲线

3 讨论

采用胸腹水脱落细胞检查是目前临床诊断鉴别良、恶性的金标准[8-12]。肿瘤发生、发展中一般会伴染色体数量和结构的变化，故而通过检测细胞核DNA 倍体分布，可了解正常细胞的周期变化并及时发现恶性增殖的肿瘤细胞[13-14]。细胞核DNA 倍体分析具有较高的特异度和灵敏度，不受细胞蜕变的影响，通过将DNA 倍体分析标准化，得到可重复、客观的诊断结果，具有相对廉价、实用的特点[15]，此外DNA 倍体分析还可以获得形态分析无法获知的肿瘤生物学特征信息[16]。但应用DNA 倍体分析有时无法确定核异质细胞及非整倍体、多倍体等，故而仍需与脱落细胞学检查及肿瘤标志物检测等联合[17]。本研究发现，脱落细胞DNA 倍体分析检测恶性腹水准确率为95.00%，有效提高了诊断恶性胸腹水准确率。

肿瘤标志物对疾病病情的判断具有重要指导价值。CA125、CA153 和CEA 是重要的肿瘤标志物，其中CA125 水平升高主要见于卵巢癌；CA153 水平升高常见于乳腺癌；CEA 水平升高常见于卵巢癌、直肠癌、胃癌及胰腺癌。肿瘤标志物水平检测在鉴别恶性胸腹水也具有重要临床价值[6]。桂强[5]研究发现，经细胞形态学检出联合血清肿瘤标志物诊断可有效提高准确性和灵敏度，为恶性胸腔积液/腹水患者鉴别诊断提供可靠参考依据。本研究表明，恶性胸腹水组CA125、CA153、CEA 阳性率均高于良性胸腹水组。许娟[18]研究表明，采用细胞DNA 倍体联合肿瘤标志物检测具有较大应用价值，方案更为准确，灵敏度和特异度更高。本研究发现，脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水灵敏度和特异度高于脱落细胞DNA 倍体分析或肿瘤标志物单项检测，由此可见脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物有利于患者疾病的治疗，具有较高的临床应用价值，提高治疗有效率，在临床诊断中可大力推广应用。但本研究还存在一些不足，样本量小，还需后续增加样本量深入研究，提供更多可靠参考信息。

综上所述，脱落细胞DNA 倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水灵敏度和特异度良好，可提高诊断价值。