干扰素α1b联合孟鲁司特钠治疗小儿嗜酸性粒细胞支气管炎的疗效及对氧化应激反应、外周血FOXP3 mRNA水平的影响

赵利娟，马 敏，王学增

1.河南省郑州瑞祥医院儿科，河南郑州 450100；2.河南省第二人民医院儿科，河南郑州 450000

嗜酸性粒细胞(Eos)支气管炎(EB)是引发慢性咳嗽的常见病因之一，是以呼吸道Eos增多为主要病理变化，而患者由于呼吸道梗阻致喘憋，影响患者生活质量[1]。调查结果指出，EB是引起慢性咳嗽的一个重要原因，占慢性咳嗽的10%～30%[2]。既往研究指出，EB和哮喘免疫病理学特征接近[3]。EB对于激素反应较好，吸入性糖皮质激素是2006年美国胸科医师协会建议的一线治疗药物，多数EB患者经治疗后具有良好预后，少数患者在停药后反复发作[4]。因此仍需寻找更为有效的治疗方案。干扰素α1b具有抗病毒、抗细胞增殖、免疫调节等作用[5]，对传染性单核细胞增多症等具有良好效果[6]。孟鲁司特钠为白三烯受体拮抗剂，在支气管炎治疗中效果良好[7]。既往研究表明，支气管炎患儿体内多具有明显的氧化应激反应，在病情发生、发展中起到重要作用[8]。鉴于此，本研究选取EB患儿128例，分析干扰素α1b联合孟鲁司特钠的疗效及对氧化应激反应的影响，现报道如下。

1 资料和方法

1.1一般资料 选取2019年5月至2021年5月郑州瑞祥医院收治的128例EB患儿为研究对象，采用随机数字表法将患儿分为对照组和观察组，每组64例。观察组：男33例，女31例；年龄5～11岁，平均(7.85±1.16)岁；病程8～18 d，平均(13.06±2.09)d。对照组：男29例，女35例；年龄5～11岁，平均(8.03±1.34)岁；病程9～17 d，平均(12.95±1.83)d。两组一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

诊断标准：符合《咳嗽的诊断与治疗指南：2009版》[9]中的EB诊断标准。纳入标准：EB首次发病。排除标准：(1)入组前接受支气管扩张剂、糖皮质激素等药物治疗；(2)存在严重肾肝功能异常；(3)伴消化道病变；(4)过敏体质；(5)中途自愿退出研究；(6)同期接受其他研究。所有患儿家属对本研究知情同意并签署知情同意书。本研究通过郑州瑞祥医院伦理委员会审核批准。

1.2方法

1.2.1治疗方法 所有患儿入院之后均予以吸氧、化痰、止咳等基础治疗。

对照组采用孟鲁司特钠(Merck Sharp & Dohme Ltd，批准文号：国药准字J20130054)治疗，睡前口服，5 毫克/次，1次/日。观察组采用干扰素α1b(深圳科兴药业有限公司，批准文号：国药准字S20033035)联合孟鲁司特钠治疗。孟鲁司特钠具体用法同对照组；干扰素α1b进行雾化吸入，2 μg/kg，2次/日。两组持续用药2周。

1.2.2观察指标 (1)对比两组临床疗效。临床控制：咳嗽消失，Eos比例恢复正常；显效：偶有咳嗽，Eos比例恢复正常；有效：咳嗽频繁，但未影响日常生活，Eos比例接近正常；无效：尚未达到上述标准[10]。总有效率=(总例数-无效例数)/总例数×100%。

(2)对比两组临床症状消失时间，临床症状包括发热、咳嗽、咳痰、喘息、哮鸣音。

(3)对比治疗前后两组外周血Eos计数及诱导痰EOS分类。收集所有患儿晨起空腹静脉血，采用XS-500i型号全自动血液分析仪(日本希森美康)进行Eos计数。所有患者晨起收集痰液前先清水漱口，然后深咳，咳痰到已消毒的培养皿内，将痰液处理后作痰涂片，由专业医务人员利用光学显微镜进行细胞分类。

(4)对比治疗前后两组外周血FOXP3 mRNA水平及T淋巴细胞亚群水平。收集全部研究对象晨起空腹静脉外周血5 mL，通过ZE5型号流式细胞仪(美国Bio-Rad公司)检测CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比，计算CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值。静脉血经RNA提取与反转录试剂盒反转录cDNA第1链，采用荧光定量PCR检测FOXP3 mRNA基因表达，用2-ΔΔCt计算FOXP3 mRNA水平。

(5)对比治疗前后两组外周血氧化应激指标水平。检测的氧化应激指标包括超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、晚期蛋白氧化产物(AOPPs)、脂质过氧化氢(LHP)。收集晨起空腹外周静脉血5 mL，以3 000 r/min离心5 min，离心半径12 cm，取血清，采用比色法测定T-AOC水平；采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD水平；采用酶联免疫吸附试验测定AOPPs、LHP水平。

2 结 果

2.1两组临床疗效比较 观察组临床总有效率(95.31%)高于对照组(79.69%)，差异有统计学意义(χ2=7.143，P=0.008)。见表1。

表1 两组临床疗效比较[n(%)]

2.2两组临床症状消失时间比较 观察组发热、咳嗽、咳痰、喘息、哮鸣音消失时间均短于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组临床症状消失时间比较

2.3治疗前后两组外周血Eos计数及诱导痰Eos分类比较 治疗前两组外周血Eos计数及诱导痰Eos分类比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组外周血Eos计数及诱导痰Eos分类均较治疗前减少(P<0.05)，且治疗后观察组外周血Eos计数及诱导痰Eos分类少于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后两组外周血Eos计数及诱导痰Eos分类比较

2.4治疗前后两组外周血FOXP3 mRNA水平及T淋巴细胞亚群分析 治疗前两组外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD8+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值相比，差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值均较治疗前升高(P<0.05)，CD8+T淋巴细胞百分比较治疗前下降(P<0.05)；且治疗后观察组外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值均高于对照组(P<0.05)，CD8+T淋巴细胞百分比低于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 治疗前后两组外周血FOXP3 mRNA水平及T淋巴细胞亚群分析

组别nCD3+ T淋巴细胞百分比(%)治疗前治疗后FOXP3 mRNA治疗前治疗后观察组6445.15±6.3759.78±6.32a2.14±0.314.03±0.75a对照组6446.21±7.0652.42±6.17a2.16±0.333.64±0.53at0.3533.3970.8926.666P0.7240.0010.374<0.001

2.5治疗前后两组外周血氧化应激指标水平比较 治疗前两组外周血SOD、T-AOC、AOPPs、LHP水平相比，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组外周血SOD、T-AOC水平较治疗前升高(P<0.05)，且治疗后观察组外周血SOD、T-AOC水平均高于对照组(P<0.05)。治疗后两组外周血AOPPs、LHP水平较治疗前降低(P<0.05)，且治疗后观察组外周血AOPPs、LHP水平均低于对照组(P<0.05)。见表5。

表5 治疗前后两组外周血氧化应激指标水平比较

3 讨 论

EB是一类以气道Eos浸润为特征的非哮喘支气管炎，2006年被美国《咳嗽的诊断与治疗指南》作为独立疾病纳入慢性咳嗽的常见病因。EB病因可能和吸入变应原与接触职业性过敏原等因素有关，属于嗜酸性气道炎症，临床表现是特应性干咳、慢性咳嗽等状况，影响患者日常生活。近几年，EB发病率呈逐年升高趋势[11]。临床上关于EB发病机制尚未阐明，常用糖皮质激素吸入治疗，部分患者效果欠佳，故需寻找更为有效的治疗方案。

孟鲁司特钠可竞争性结合半胱氨酸受体，下调白三烯活性，起到降低气道炎症反应的效果，有利于减轻气道阻塞，以改善临床症状。干扰素α1b具有免疫调节和广谱抗病毒等作用，可促进基因产物形成，阻滞DNA及RNA生长、病毒蛋白翻译，激活巨噬细胞、NK细胞等，增强细胞吞噬能力，提高机体自身抵抗力。干扰素α1b能阻滞Eos、T淋巴细胞，减少炎症因子释放与合成，减轻炎症反应，改善临床症状，且雾化吸入便于痰液稀释，可快速减轻咳痰症状，并增强患儿治疗依从性。本研究结果中观察组临床总有效率达95.31%，发热、咳嗽、咳痰、喘息、哮鸣音消失时间明显缩短，Eos计数及诱导痰Eos分类得到改善，说明干扰素α1b联合孟鲁司特钠治疗可提高治疗效果，减轻临床症状。

EB患儿伴细胞免疫功能异常。CD3+T淋巴细胞反映T淋巴细胞总数；CD4+T淋巴细胞越少，细胞免疫应答越差；CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值下降说明细胞免疫功能减弱[12]；CD8+T淋巴细胞杀伤能力因FOXP3 mRNA表达减少而增强[13]。本研究结果显示，治疗后观察组外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值高于对照组，说明干扰素α1b联合孟鲁司特钠治疗可改善免疫功能，促进病情好转，原因可能为干扰素α1b存在免疫调节功能。

呼吸道Eos增多后，可导致呼吸道产生炎症反应，过度释放脂质过氧化、活性氧，损伤组织细胞，破坏机体内氧化与抗氧化之间的动态平衡，导致患儿产生氧化应激反应；AOPPs与LHP为氧化代谢产物，其水平和氧化应激度呈正比；SOD反映了抗氧化能力，由于疾病机体增加了SOD消耗，使SOD呈低表达[14]。本研究显示，经干扰素α1b、孟鲁司特钠联合治疗2周后，外周血SOD、T-AOC水平升高，AOPPs、LHP水平下降，说明EB患儿体内氧化应激反应得到改善，其原因可能是干扰素α1b能减少Eos分泌，阻滞炎症因子分泌，减轻炎症反应，降低脂质过氧化与活性氧的过度释放，有利于氧化与抗氧化之间的平衡恢复。

综上所述，干扰素α1b与孟鲁司特钠联合治疗EB患儿效果显著，可减轻临床症状，下调Eos计数、痰Eos分类，增强免疫功能，调节氧化应激。