VitC 对运输应激小鼠肺脏结构的影响

贾 盟，邹 骏，白莹莹，王金莉

（锦州医科大学，辽宁 锦州 121000）

随着人类生活的不断发展，我们对肉制品的质量也随之提高，而运输应激是影响畜禽肉质和存活率的重要因素之一。动物机体在运输途中有很多影响的因素如高温、晃动、环境变化和生理压力等一些应激源的共同作用后的反应叫做运输应激。运输应激显然已经成为拖延中国畜牧养殖业发展的重要因素，例如猪在运输应激过程中会感染副猪嗜血杆菌引发传染性胸膜肺炎，其特征性剖检变化为纤维素坏死性肺炎、纤维素性胸膜肺炎和慢性关节炎，对猪的肉质和死亡有极大影响。

畜禽能量代谢、免疫能力和抗应激能力等方面的提高，可使畜禽在运输应激过程中能更好地生存，保证肉质和存活率。VitC 可从抗氧化方面提高畜禽抗应激的能力和机体免疫力，促进动物肾上腺糖皮质激素的合成，加快细胞新陈代谢，支持细胞的营养及维持其正常的工作。因此研究不同浓度的VitC 对运输过程中小鼠肺脏结构的影响，具有重要意义。本实验通过病例剖检及石蜡切片的方法观察肺脏的病理变化来确定不同浓度VitC 对运输应激小鼠肺脏产生的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物与设计 5 周龄健康的小鼠30 只（购自锦州医科大学动物实验中心），将小鼠随机分为3 组，每组10 只小鼠，空白对照组、运输应激组和1.5g/kgVitC 运输应激药物组。空白对照组正常采食饮水，运输应激组和1.5g/kgVitC 运输应激药物组在采食和饮水方面进行控制，每天8：00 在37.5℃的摇床上进行以50r/min 的速度下模拟运输应激，时间为3h，连续摇3d，适当增加噪音模拟运输应激的过程。观察小鼠的临床症状，处死小鼠并剖检对比，取出肺脏，用4%多聚甲醛固定液固定用于实验。

1.2 实验材料 显微数码拍摄图像分析系统（BX53F）购自锦州益众商贸有限公司；生物组织摊片烤片机（KL 型）购自锦州益众商贸有限公司；生物组织包埋机（JB-P5）购自锦州恒达医疗器械有限公司；轮转式切片机（HistoCore BIOCUT）购自徕卡显微系统（上海）有限公司；组织脱水机（KRD-TA型）购自孝感康瑞德电子科技有限公司；石蜡包埋机（KRD-LB2 型）购自孝感康瑞德电子科技有限公司；组织染色机（KRD-RA）购自孝感康瑞德电子科技有限公司。

1.3 剖检和制作石蜡切片 观察不同浓度的VitC对运输应激小鼠的肺脏组织的影响将小鼠处死后剖检，观察肺脏的解剖学结构和学病理组织变化，拍照。取肺部组织置于4%多聚甲醛固定液中固定2h，流水冲洗、梯度脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、HE染色和封片，在光学显微镜下观察肺脏的组织学变化并拍照。

2 结果

2.1 VitC 对运输应激小鼠肺脏解剖结构的影响

图1 小鼠肺脏病理解剖结构

空白对照组小鼠精神状态良好，食欲正常。运输应激组小鼠精神萎靡，食欲减退，运输应激药物组小鼠精神状态较好。剖检空白对照组小鼠的肺脏组织可见共分5 个叶，左侧肺脏一个单叶，右侧肺脏三个分叶及一个较小的副叶，肺组织肉眼观察无出血点或出血斑，胸腔内无渗出液和纤维素凝块。运输应激小鼠如图，肺脏有红色的渗出液和纤维素凝块，小鼠的各个肺叶上肉眼可见数量不等的出血点或出血斑。运输应激药物组小鼠肺脏的运输应激症状明显消失，小鼠肺脏剖检后纤维素渗出物明显减少，仅可见少量的出血点及红色渗出液。

2.2 VitC 对运输应激小鼠肺脏组织学结构的影响

图2 小鼠肺脏的组织学结构

光学显微镜下观察，正常的小鼠肺脏组织结构清晰，由图可见肺泡囊、肺泡及肺泡隔的正常组织结构，无炎性细胞渗出。运输应激小鼠肺脏镜下观察肺泡腔沉陷，几个肺泡融合形成一个大的囊腔；巨噬细胞、淋巴细胞浸润导致肺泡隔增厚，毛细血管扩张并含大量红细胞，可见上皮细胞变性、坏死，表现为核固缩，胞质淡染，有的细胞膜破裂，肺泡腔中可见到少量的红细胞、脱落的上皮细胞。与运输应激组相比较，运输应激前饲料中添加1.5g/kgVitC，镜检肺脏的组织结构比较清晰，病理性症状明显减轻，各种炎性细胞的数量减少，表明VitC 可以提高动物抗运输应激的能力。

3 讨论

3.1 运输应激对畜禽的影响 畜禽的运输是动物生产中很关键的一个过程，而运输应激会导致被运输的动物造成严重的组织损伤。运输应激可以诱发应激性心肌病，心肌细胞能发生不同程度的颗粒变性；对肝脏也会造成一定的损伤，肝细胞出现颗粒变性及水泡变性；还会对幼畜肾脏造成损伤，肾脏上皮细胞颗粒变形或空泡样变性；能引起免疫系统中心脾脏与淋巴结急性病理性损伤。能造成畜禽的肠黏膜结构损伤，小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞数量会显著增加。

运输应激可使畜禽的生长发育受到影响，畜禽的产蛋率、产奶量、产肉率下降，同时肉蛋奶的品质也会明显降低，运输应激会增加食品安全问题；运输应激使畜禽有机体的抵抗力下降，当有害物质侵害畜禽有机体时，导致疾病的发生，而人类若摄入这种动物性食品后也会引发疾病。运输应激对生殖系统的影响比较严重，可使机体激素分泌不足，进而导致幼体发育不良，性器官发育不全。

3.2 运输应激前添加VitC 对运输应激的影响 在运输应激前添加VitC，可以降低畜禽毛细血管的通透性，增强机体的抵抗力，减少在运输应激过程中的死亡率和淘汰率。VitC 的作用还可以增强畜禽的代谢和产热，增强机体对温度的适应性，减少高温下畜禽的淘汰率和死亡率，在运输过程中如若在饲料中添加适宜剂量的VitC 就可减轻畜禽疾病的发生、高温、免疫、噪音等的运输应激状态下的不利状态。VitC 还能够促进两种球蛋白（免疫球蛋白和胶原蛋白）的合成作用。VitC 还能够降低结缔组织的韧性，进而提高机体在运输应激下的抗应激能力，使畜禽体温下降，并且降低血液中皮质醇的浓度。但用量却为平时的2～3 倍。所以在运输过程中使用VitC 时可以使机体抵抗细菌和病毒的侵袭能力上升，动物的抗应激能力变强，使肺脏的结构和功能正常，加速血管内皮的自我修复功能。

3.3 对运输应激的防治措施 完善运输管理，运输前对运输环境进行严格消毒，同时对运输的畜禽健康情况进行排查，禁止运输患病和带毒的畜禽，以免在运输过程中患病畜禽与健康畜禽发生交叉感染，造成大规模的传播。长时间运输时，应饲喂易消化饲料，口服补液盐、葡萄糖溶液，抑制应激反应的产生。运输期间维护运输环境，避免冷、热、颠簸、高密度等造成的应激反应，做好运输监控，实时掌握畜禽状态，一旦出现症状，需及时处理。运输后单独隔离饲养运输动物，控制饮食，当畜禽适应新环境，检疫合格后再合群。

添加抗应激药物，运输前日粮中添加维生素、微生物制剂、中成药等降低应激的发生。一旦发现畜禽可能患有运输应激综合症后，及时治疗，避免病情恶化死亡。

4 结论

在饲料中加入1.5g/kgVitC 后可以增加机体的抗应激能力，并且有效的缓解运输应激对小鼠肺脏组织的损伤。