杏香兔耳风化学成分研究

徐贞权，何明珍，姚 闽, 3，王昭君，欧阳辉，李志峰，杨世林, 2，李军茂*，冯育林, 2*

杏香兔耳风化学成分研究

徐贞权1，何明珍1，姚 闽1, 3，王昭君1，欧阳辉1，李志峰1，杨世林1, 2，李军茂1*，冯育林1, 2*

1. 江西中医药大学，中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，江西 南昌 330006 2. 创新药物与高效节能降耗制药设备国家重点实验室，江西 南昌 330006 3. 江西省药品检验检测研究院，江西 南昌 330029

研究兔耳风属植物杏香兔耳风的化学成分。采用溶剂萃取、大孔吸附树脂、硅胶、ODS柱色谱以及HPLC等技术进行化学成分分离纯化，运用核磁共振等波谱数据分析鉴定化合物结构。从杏香兔耳风乙醇提取物中分离得到20个化合物，分别鉴定为3β--β--glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydrozaluzanin C（1）、岩白菜素（2）、glucozaluzanin C（3）、芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸甲酯（4）、costunolide-15-β--glucopyranoside（5）、芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸苷（6）、木犀草素-7--β--葡萄糖醛酸苷（7）、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（8）、绿原酸（9）、1,3--二咖啡酰奎宁酸（10）、3--反式对羟基香豆酰奎宁酸（11）、木犀草素-7--β--葡萄糖苷（12）、木犀草素（13）、原儿茶酸（14）、5--顺式对羟基香豆酰奎宁酸（15）、1--咖啡酰奎宁酸（16）、隐绿原酸（17）、5--反式对羟基香豆酰奎宁酸（18）、3,5--二咖啡酰奎宁酸（19）、2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β--glucozaluzanin C（20）。化合物2、4～8、11、15～16、18为首次从兔耳风属植物中分离得到。

兔耳风属；杏香兔耳风；咖啡酰奎宁酸；芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸苷；木犀草素-7--β--葡萄糖醛酸苷；芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷

杏香兔耳风Champ.又名一支香、扑地金钟，为菊科兔耳风属多年生草本植物，具有清热解毒、利湿、止血等功效[1]，主要用于治疗慢性宫颈炎、阴道炎、呼吸道感染等疾病[2-3]。杏香兔耳风被开发成的中成药制剂，如“复方杏香兔耳风片”“复方杏香兔耳风颗粒”等，临床广泛引用于治疗湿热带下所导致的妇科疾病。杏香兔耳风植物主要有奎宁酸类、黄酮类、倍半萜类等化学成分[4-6]，现代药理学研究发现杏香兔耳风具有抗菌、抗炎、止血等药理学作用[3]。课题组前期研究发现，杏香兔耳风水部位为其活性部位，为进一步开发杏香兔耳风植物资源利用，阐明该药物的药效物质基础，为其临床应用及质量控制提供科学依据，本实验对杏香兔耳风水部位的化学成分进行研究，从中分离并鉴定了20个化合物，分别鉴定为8α-hydroxy-11α, 13-dihydroglucozaluzanin（1）、岩白菜素（bergenin monohydrate，2）、glucozaluzanin C（3）、芹菜素- 7--β--葡萄糖醛酸甲酯 [apigenin 7--β- (6′′-methylglucuronide)，4]、costunolide-15-β-- glucopyranoside（5）、芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸苷（apigenin-7--β--glucuronopyranoside，6）、木犀草素-7--β--葡萄糖醛酸苷（luteolin- 7--β--glucuronopyranoside，7）、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（apigenin-6,8-di-C-β--glucopyranoside，8）、绿原酸（chlorogenic acid，9）、1, 3--二咖啡酰奎宁酸（1,3-di--caffeoylquinic acid，10）、3--反式对羟基香豆酰奎宁酸（3---- coumaroylquinic acid，11）、木犀草素-7--β--葡萄糖苷（luteolin-7--β--glucoside，12）、木犀草素（luteolin，13）、原儿茶酸（protocatechuic acid，14）、5--顺式对羟基香豆酰奎宁酸（5---coumaroyl- quinic acid，15）、1--咖啡酰奎宁酸（1-- caffeoylquinic acid，16）、隐绿原酸（cryptochlorogenic acid，17）、5--反式对羟基香豆酰奎宁酸（5--- coumaroylquinic acid，18）、3,5--二咖啡酰奎宁酸（3,5--dicaffeoylquinic acid，19）、protocatechuic acid 2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β-- glucozaluzanin C（20）。其中，化合物2、4～8、11、15～16、18为首次从兔耳风属植物中分离得到。

1 仪器与材料

Bruker avance 600型核磁共振仪（德国布鲁克公司）；Triple TOF 5600型高分辨质谱仪（美国ABSciex公司）；EYALA旋转蒸发器（日本Eyala公司）；DHG-9036A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；EL204型电子天平[梅特勒托利多仪器（上海）有限公司]；LC-XR20UPLC/HPLC（日本岛津公司）；汉邦NU3000制备液相色谱（江苏汉邦科技股份有限公司）；LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；YMC-Pack ODS-A HPLC（250 mm×10 mm，5 μm，日本）；COSMOSILC18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，日本NacalaiTesque公司）；DAION HP20树脂（日本三菱公司）；柱色谱硅胶（300～400目，青岛海洋化工有限公司）；WRR型熔点仪（上海精密仪器有限公司）；WZZ-2B型自动旋光仪（上海精密科学仪器有限公司）；液相和制备液相所用试剂为色谱纯，其他均为分析纯。

杏香兔耳风药材购买于江西省樟树药材市场，由江西中医药大学钟国跃教授鉴定为兔耳风属杏香兔耳风Champ.的干燥全草，样本（XXTEF20210905）保存在江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心。

2 提取与分离

干燥的杏香兔耳风全草25 kg，粉碎，用70%乙醇回流提取2次，每次2 h。提取液减压浓缩至无醇味，依次用石油醚（60～90 ℃）、醋酸乙酯萃取，将被石油醚、醋酸乙酯萃取后的溶液称为水部位，水部位浸膏2082 g。

取水部位浸膏2082 g经DAION HP20树脂分离，依次采用水及30%、60%、90%乙醇洗脱，得到4个部位A～D；组分B（280 g）经硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）洗脱，得到15个组分B-1～B-15。

组分B-8利用硅胶柱色谱，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）溶剂体系梯度洗脱，得到42个流分Fr. 1～42，经高分辨质谱仪检测，合并Fr. 27～42，Fr. 27～42再经制备液相（乙腈-水15∶85）分离得到化合物1（1700 mg，R＝15.1 min）、2（16.9 mg，R＝7.5 min）；组分B-7利用硅胶柱色谱，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）梯度洗脱，得到47个流分Fr. 1～47，经高分辨质谱仪检测，合并Fr. 5～9，再经制备液相色谱（乙腈-水25∶75）分离得到化合物13（156.4 mg，R＝25.4 min）；合并Fr. 17～23，再经制备液相（乙腈-水25∶75）分离得到化合物3（200.1 mg，R＝21.4 min）、5（61.5 mg，R＝33.6 min）。B-12～B-15利用ODS柱，甲醇-水（10∶90→90∶10）溶剂梯度洗脱，得到38个流分Fr.1～38，Fr. 25再经制备液相（乙腈-水25∶75）分离得到化合物4（50.0 mg，R＝30.2 min）；合并Fr. 11～13，Fr. 11～13再经制备液相（乙腈-水20∶80）分离分到化合物6（500.1 mg，R＝20.8 min）、7（604.6 mg，R＝25.4 min）；合并Fr. 6～10，再经制备液相（乙腈-水15∶85）分离得到化合物8（54.2 mg，R＝42.6 min）；Fr. 2经制备液相（乙腈-水10∶90）制备得到化合物11（17.2 mg，R＝15 min）；合并Fr. 20～21，再经制备液相（乙腈-20∶80）制备得到化合物10（14.6 mg，R＝25.4 min）、Fr. 3-5合并，Fr. 3～5再经制备液相（乙腈-水5∶95→12∶82）制备得到化合物14（16.2 mg，R＝26.3 min）、9（18.0 mg，R＝32.3 min）、15（43.3 mg，R＝53.1 min）、16（19.9 mg，R＝60.2 min）、17（16.7 mg，R＝68.3 min）、18（5.0 mg，R＝79.5 min）、19（16.7 mg，R＝81.5 min）。

组分C（168 g）经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）溶剂体系梯度洗脱，得到6个组分C-1～C-6，组分C-6利用ODS柱，甲醇-水（5∶95→95∶5）溶剂梯度洗脱，得到60个流分Fr. 1～60，合并Fr. 10～13，再经制备液相（乙腈-水13∶87）制备得到化合物12（113.4 mg，R＝23.2 min）；合并Fr. 23～29，Fr. 23～29再经制备液相色谱（乙腈-水14∶86），制备得到化合物合物20（79.2 mg，R＝45.3 min）。

3 结构鉴定

化合物2：白色针晶（甲醇），mp 272 ℃，ESI-MS/327.071 4 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C14H16O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.00 (1H, s, H-7), 4.97 (1H, d,= 10.2 Hz, 11-OH), 3.98 (1H, t,= 9.8 Hz, H-4a), 3.85 (1H, d,= 10.3 Hz, H-11), 3.77 (3H, s, 9-OCH3), 3.58 (1H, t,= 8.8 Hz, H-3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 163.8 (C-6), 151.5 (C-8), 148.5 (C-10), 141.0 (C-9), 118.5 (C-6a), 116.3 (C-10a), 109.9 (C-7), 82.2 (C-2), 80.2 (C-4a), 74.1 (C-4), 72.5 (C-10b), 71.1 (C-3), 61.5 (C-11), 60.2 (OCH3)。以上数据与文献报道数据基本一致[8]，故鉴定化合物2为岩白菜素。

化合物4：黄色粉末，ESI-MS/459.092 2 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C22H20O11。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 13.0 (1H, brs, 5-OH), 7.96 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3, 5), 6.86 (1H, s, H-3), 6.85 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.48 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.57 (1H, brs, 2-OH), 5.48 (1H, brs, 4-OH), 5.32 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1), 5.30 (1H, brs, 3-OH), 4.22 (1H, d,= 9.3 Hz, H-5), 3.67 (3H, s, 6-OCH3), 3.43 (1H, brt,= 9.4 Hz, H-4), 3.34 (2H, m, H-2, 3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.5 (C-4), 169.7 (C-6′′), 164.8 (C-2), 162.9 (C-7), 161.9 (C-5), 161.7 (C-4′), 129.1 (C-2′, 6′), 121.5 (C-1′), 116.5 (C-3′, 5′), 105.9 (C-10), 103.9 (C-3), 99.8 (C-6), 99.5 (C-1′′), 95.1 (C-8), 75.9 (C-3′), 75.6 (C-5′′), 73.2 (C-2′′), 71.8 (C-4′′), 52.5 (-OCH3)。以上数据与文献报道数据基本一致[10]，故鉴定化合物4为芹菜素-7--β--葡萄糖醛酸甲酯。

化合物6：黄色粉末，ESI-MS/445.076 2 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C21H18O11。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.97 (1H, s, 5-OH), 7.93 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2′, 6′), 6.94 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3′, 5′), 6.84 (1H, s, H-8), 6.45 (1H, d,= 1.8 Hz, H-6), 5.27 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1′′), 4.04 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5′′), 3.31～3.44 (3H, m, sugar-H)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.4 (C-4), 170.8 (C-6′′), 164.8 (C-2), 163.0 (C-7), 161.9 (C-5), 161.6 (C-4), 157.4 (C-9), 129.0 (C-2, 6), 121.4 (C-1), 116.5 (C-3, 5), 105.9 (C-10), 103.5 (C-3), 99.8 (C-1′′), 99.6 (C-6), 95.1 (C-8), 76.2 (C-5′′), 75.8 (C-4′′), 73.2 (C-3′′), 71.8 (C-2′′)。以上数据与文献报道数据基本一致[12]，故鉴定化合物6为芹菜素-7-- β--葡萄糖醛酸苷。

化合物7：黄色粉末，ESI-MS/461.072 0 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C21H18O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.43 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 7.41 (1H, dd,= 8.5, 2.0 Hz, H-6′), 6.91 (1H, d,= 2.0 Hz, H-5), 6.81 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.74 (1H, s, H-3), 6.45 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.27 (1H, d,= 7.0 Hz, H-1′), 4.02 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 3.28～3.42 (3H, m, sugar-H)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.3 (C-4), 171.1 (C-6′′), 165.0 (C-2), 163.0 (C-7), 161.6 (C-5), 157.4 (C-9), 150.5 (C-4′), 146.3 (C-3′), 121.8 (C-1′), 119.6 (C-6′), 116.5 (C-5′), 114.0 (C-2′), 105.9 (C-10), 103.6 (C-3), 99.9 (C-6), 99.7 (C-1′′), 95.0 (C-8), 76.2 (C-3′′), 75.7 (C-5′′), 73.3 (C-2′′), 71.8 (C-4′′)。以上数据与文献报道数据基本一致[13]，故鉴定化合物7为木犀草素- 7--β--葡萄糖醛酸苷。

化合物8：黄色粉末，ESI-MS/593.151 4 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C27H30O15。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 13.72 (1H, s, 5-OH), 8, 03 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.91 (2H, d,= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.80 (1H, s, H-3), 5.07 (1H, d,= 4.6 Hz, H-1), 4.79 (1H, d,= 10.0 Hz, H-1), 3.89 (1H, t,= 9.2 Hz, H-2′′′), 3.75 (1H, m, H-6′′′b), 3.71 (1H, m, H-6′′b), 3.50 (2H, m, H-6′a, 6′′a), 3.28 (3H, m, H-3′′～5′′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.6 (C-4), 164.4 (C-2), 161.7 (C-7, 4′), 159.1 (C-5′), 155.6 (C-9), 129.4 (C-2′, 6′), 122.0 (C-1′), 116.3 (C-3′, 5′), 108.0 (C-6), 105.8 (C-8), 104.1 (C-10), 103.0 (C-3), 82.4 (C-5′′), 81.3 (C-5′′), 79.3 (C-3′′′), 78.4 (C-3′′), 74.6 (C-1′′′), 73.9 (C-1′′), 72.3 (C-2′′′), 71.5 (C-2′′), 71.0 (C-4′′′), 69.5 (C-4′′), 61.8 (C-6′′′), 60.3 (C-6′′)。以上数据与文献报道数据基本一致[14]，故鉴定化合物8为芹菜素-6,8-二--葡萄糖苷。

化合物9：白色粉末，ESI-MS/353.086 9 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.42 (1H, d,= 16.01 Hz, H-7), 7.03 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.00 (1H, dd,= 2.8 Hz, H-6), 6.76 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.14 (1H, d,= 16.1 Hz, H-8), 5.07 (1H, m, H-3), 3.91 (1H, m, H-4), 3.57 (1H, m, H-5), 2.01 (2H, m, H-2), 1.92 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 175.5 (C-7), 166.2 (C-9′), 148.8 (C-4′), 146.0 (C-3′), 145.4 (C-7′), 126.0 (C-1′), 121.8 (C-6′), 116.2 (C-5′), 115.2 (C-2′), 114.8 (C-8′), 74.0 (C-1), 71.4 (C-3), 70.9 (C-4), 68.7 (C-5), 37.7 (C-6), 36.8 (C-2)。以上数据与文献报道数据基本一致[15]，故鉴定化合物9为绿原酸。

在小型农田水利设施建设中，资金的缺乏也是制约其发展的重要因素。在对小型农田水利工程进行建设投资时，绝大部分资金都来自于政府拨款。由于管理经费的短缺、机构不健全，致使小型农田水利工程建成后管理粗放，以及维护管理不足导致各种问题出现，对农民群众的正常生产与生活都产生了较大影响。尽管在大力扶持水利建设与管理、规划布局、项目的安排以及资金补助方面都给予了很大倾斜，但资金短缺问题依然存在。

化合物10：白色粉末，ESI-MS/515.128 7 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C25H24O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 9.27 (4H, brs, Ar-OH), 7.48 (1H, d,= 15.7 Hz, H-7), 7.45 (1H, d,= 15.7 Hz, H-7), 7.05 (2H, brs, H-2, 2), 7.00 (2H, d,= 7.6 Hz, H-6, 6), 6.77 (2H, d,= 7.6 Hz, H-5), 6.21 (2H, d,= 15.6 Hz, H-8, 8), 5.23 (1H, m, H-3), 4.07 (1H, m, H-5), 3.60 (1H, m, H-4), 2.34 (2H, m, H-2, 6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 173.3 (C-7), 166.5 (C-9′), 165.7 (C-9′′), 148.9 (C-4′′), 148.9 (C-4′), 146.1 (C-3′′), 145.6 (C-7′, 7′′), 126.0 (C-1′, 1′′), 121.8 (C-6′), 121.6 (C-6′′), 116.3 (C-5′), 116.3 (C-5′′), 115.4 (C-2′′), 115.3 (C-2′), 114.7 (C-8′, 8′′), 80.2 (C-1), 71.8 (C-4), 70.5 (C-5), 68.2 (C-3), 36.7 (C-6), 34.7 (C-2)。以上数据与文献报道数据基本一致[16]，故鉴定化合物10为1,3--二咖啡酰奎宁酸。

化合物11：白色粉末，ESI-MS/337.092 3 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.53 (3H, m, H-2, 6, 7) 6.81 (2H, d,= 9.1 Hz, H-3, 5), 6.31 (1H, d,= 16.2 Hz, H-8), 5.10 (1H, m, H-3), 3.75 (1H, brs, H-5), 3.55 (1H, dd,= 3.0, 7.2 Hz, H-4), 1.80～2.06 (3H, m, H-2, 6a, 6b)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.1 (C-7), 166.5 (C-9′), 160.3 (C-4′), 144.9 (C-7′), 130.7 (C-2′, 6′), 125.6 (C-1′), 116.2 (C-3′5′), 115.1 (C-8′), 74.9 (C-1), 71.8 (C-3), 71.5 (C-4), 69.7 (C-5), 40.5 (C-6), 37.8 (C-2)。以上数据与文献报道数据基本一致[17]，故鉴定化合物11为3--反式对羟基香豆酰奎宁酸。

化合物12：黄色无定形粉末，ESI-MS/447.092 4 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C21H20O11。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.44 (1H, dd,= 8.7, 2.0 Hz, H-6′), 7.42 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 6.92 (1H, d,= 8.7 Hz, H-5′), 6.80 (1H, d,= 1.8 Hz, H-8), 6.75 (1H, s, H-3), 6.45 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.09 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1), 3.18～3.74 (6H, m, H-2～6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.4 (C-4), 164.9 (C-7), 163.4 (C-2), 161.6 (C-5), 157.4 (C-9), 150.4 (C-4′), 146.2 (C-3′), 121.8 (C-1′), 119.6 (C-6′), 116.4 (C-5′), 114.0 (C-2′), 105.8 (C-3), 103.6 (C-10), 100.3 (C-1′), 100.0 (C-6), 95.2 (C-8), 77.6 (C-4′), 76.8 (C-3′), 73.6 (C-2′), 70.0 (C-5′), 61.1 (C-6′)。以上数据与文献报道数据基本一致[18]，故鉴定化合物12为木犀草素-7--β--葡萄糖苷。

化合物13：黄色针晶（甲醇），mp 346～350 ℃，ESI-MS/285.041 5 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C15H10O6。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.40 (2H, m, H-2′, 6′), 6.90 (1H, d,= 8.8 Hz, H-5′), 6.65 (1H, s, H-3), 6.44 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.19 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 182.1 (C-4), 164.6 (C-7), 164.3 (C-9), 161.9 (C-5), 157.7 (C-3′), 150.1 (C-2), 146.2 (C-4′), 122.0 (C-1′), 119.4 (C-6′), 116.5 (C-2′), 113.8 (C-5′), 104.2 (C-10), 103.3 (C-3), 99.3 (C-8), 94.3 (C-6)。以上数据与文献报道数据基本一致[19]，故鉴定化合物13为木犀草素。

化合物14：白色粉末，ESI-MS/153.018 3 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C7H6O4。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.34 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.29 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.79 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 167.8 (C-1′), 150.4 (C-4), 145.3 (C-3), 122.3 (C-1), 122.1 (C-6), 117.0 (C-5), 115.6 (C-2)。以上数据与文献报道数据基本一致[20]，故鉴定化合物14为原儿茶酸。

化合物15：淡黄色粉末，ESI-MS/337.092 4 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.52 (2H, d,= 8.2 Hz, H-5′, 9′), 6.80 (1H, d,= 12.9 Hz, H-3′), 6.63 (2H, d,= 8.9 Hz, H-6′, 8′), 5.19 (1H, m, H-5), 3.87 (1H, m, H-3), 3.55 (1H, m, H-4), 2.10 (2H, m, H-6), 2.02 (1H, dd,= 3.2, 14.2 Hz, H-2α), 1.90 (1H, m, H-2β)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.5 (C-7), 166.6 (C-9′), 160.1 (C-4′), 144.5 (C-7′), 130.6 (C-2′, 6′), 125.7 (C-1′), 116.3 (C-8′), 115.7 (C-3′, 5′), 73.3 (C-1), 71.6 (C-5), 71.4 (C-4), 67.8 (C-3), 40.5 (C-2), 35.5 (C-6)。以上数据与文献报道数据基本一致[21]，故鉴定化合物15为5--顺式对羟基香豆酰奎宁酸。

化合物16：黄色无定形粉末，ESI-MS/353.088 8 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.42 (1H, d,= 15.9 Hz, H-3′), 7.05 (1H, d,= 1.8 Hz, H-5′), 6.98 (1H, brd,= 8.2 Hz, H-9′), 6.77 (1H, d,= 8.2 Hz, H-8′), 6.16 (1H, d,= 15.9 Hz, H-2′), 5.09 (1H, dd,= 5.0, 17.0 Hz, H-4), 4.76 (1H, d,= 5.0 Hz, H-3), 2.00 (2H, m, H-2), 1.79 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 175.6 (C-7), 166.3 (C-1′), 148.8 (C-7′), 146.0 (C-6′), 145.4 (C-3′), 126.0 (C-4′), 121.8 (C-9′), 116.2 (C-8′), 115.2 (C-2′), 114.8 (C-5′), 74.1 (C-1), 71.4 (C-4), 71.1 (C-3), 68.8 (C-5), 37.7 (C-6), 37.2 (C-2)。以上数据与文献报道数据基本一致[22]，故鉴定化合物16为1--咖啡酰奎宁酸。

化合物17：黄色无定形粉末，ESI-MS/353.091 2 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.50 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7′), 7.06 (1H, s, H-2′), 7.01 (1H, d,= 7.6 Hz, H-6′), 6.77 (1H, d,= 7.6 Hz, H-5′), 6.28 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8′), 4.87 (1H, d,= 4.8 Hz, H-4), 4.67 (1H, dd,= 8.0, 5.0 Hz, H-3), 4.10 (1H, brs, H-5)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.0 (C-7), 166.8 (C-9′), 148.8 (C-4′), 145.3 (C-3′), 126.1 (C-1′), 121.7 (C-6′), 116.3 (C-5′), 115.2 (C-8′), 115.1 (C-2′), 77.3 (C-4), 74.5 (C-1), 66.9 (C-3), 64.5 (C-5), 40.4 (C-6), 38.3 (C-2)。以上数据与文献报道数据基本一致[23]，故鉴定化合物17为隐绿原酸。

化合物18：黄色无定形粉末，ESI-MS/337.093 5 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.60 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3′, 5′), 7.53 (1H, m, H-7′), 6.75 (2H, d,= 9.0 Hz, H-2′, 6′), 5.69 (1H, d,= 13.2 Hz, H-8′), 3.94 (1H, s, H-3), 3.57 (1H, dd,= 3.0, 8.4 Hz, H-4), 2.00 (2H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 175.4 (C-7), 166.2 (C-9′), 160.2 (C-4′), 145.0 (C-7′), 130.7 (C-2′, 6′), 125.6 (C-1′), 116.2 (C-3′, 5′), 115.0 (C-8′), 74.0 (C-1), 70.9 (C-5), 70.6 (C-3), 68.6 (C-4), 37.6 (C-2), 37.6 (C-6)。以上数据与文献报道数据基本一致[24]，故鉴定化合物18为5--反式对羟基香豆酰奎宁酸。

化合物19：黄色无定形粉末，ESI-MS/515.123 5 [M－H]−，结合NMR推测分子式为C25H24O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 9.53 (2H, brs, 4′, 4′′-OH), 9.08 (2H, brs, 3′, 3′′-OH), 7.43 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7′), 7.39 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7′′), 7.01 (1H, s, H-2′), 6.99 (1H, s, H-2′′), 6.91 (2H, d,= 8.1 Hz, H-6′, 6′′), 6.74 (2H,= 8.1 Hz, H-5′, 5′′), 6.21 (1H, d,= 15.8 Hz, H-8′), 6.07 (1H, d,= 15.8 Hz, H-8′′), 5.29 (1H, m, H-3), 5.02 (1H, m, H-5), 4.00 (1H, m, H-3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 173.0 (C-7), 166.5 (C-9′), 165.7 (C-9′′), 148.9 (C-3′), 148.5 (C-3′′), 146.0 (C-7′), 145.8 (C-7′′), 145.3 (C-4′, 4′′), 125.8 (C-1′), 125.7 (C-1′′), 121.4 (C-6′), 120.4 (C-6′′), 116.3 (C-2′), 116.3 (C-2′′), 116.2 (C-5′), 115.7 (C-5′′), 114.9 (C-8), 114.5 (C-8′), 79.9 (C-1), 73.3 (C-5), 71.5 (C-4), 66.4 (C-3), 32.3 (C-2, 6)。以上数据与文献报道数据基本一致[25]，故鉴定化合物19为3,5--二咖啡酰奎宁酸。

化合物20：白色无定形粉末，ESI-MS/587.213 5 [M－H]−，结合NMR推测分子式为 C30H36O12。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.48 (1H, d,= 15.9 Hz, H-β), 7.02 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′′), 6.98 (1H, m, H-6′′), 6.77 (1H,= 8.1 Hz, H-5′′), 6.20 (1H, d,= 16.0 Hz, H-α), 5.15 (1H, d,= 1.1 Hz, H-15), 5.13 (1H, d,= 1.1 Hz, H-15), 4.94 (1H, s, H-14), 4.82 (1H, s, H-14), 4.70 (1H, m, H-2′), 4.54 (1H, d,= 8.1 Hz, H-1′), 4.46 (1H, m, H-3), 3.94 (1H, t,= 10.0 Hz, H-6), 1.05 (3H, d,= 7.54 Hz, H-13)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 179.3 (C-7), 166.0 (C=O), 149.9 (C-4), 148.9 (C-3′′), 146.0 (C-4′′), 145.6 (C-β), 144.4 (C-10), 126.0 (C-1′′), 121.7 (C-6′′), 116.2 (C-5′′), 115.2 (C-14), 114.5 (C-2′′), 113.2 (C-15), 99.4 (C-1′), 79.8 (C-3), 79.1 (C-6), 77.5 (C-5′), 74.8 (C-2′), 74.1 (C-3′), 70.9 (C-8), 69.2 (C-4′), 61.4 (C-6′), 52.6 (C-7), 49.4 (C-5), 46.0 (C-9), 43.6 (C-1), 38.3 (C-11), 36.8 (C-2), 11.1 (C-13)。以上数据与文献报道数据基本一致[26]，故鉴定化合物20为2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β--glucozaluzanin C。

4 讨论

本实验对杏香兔耳风的乙醇提取物进行化学成分研究，从中分离并鉴定了20个化合物，包括4个倍半萜类化合物，9个酚酸类化合物，6个黄酮类化合物，1个异香豆素类化合物，其中化合物2、4～8、11、15～16、18为首次从兔耳风属植物中分离得到，之前关于兔耳风属的黄酮苷类化学成分多集中于葡萄糖类黄酮，本研究首次在杏香兔耳风植物中分离得到3个葡萄糖醛酸化黄酮苷，可能为杏香兔耳风植物的专属性成分。根据文献报道，分离得到的化合物具有良好的生物活性，其中酚酸类成分绿原酸（9）、3,5--二咖啡酰奎宁酸（19）有效降低NIH3T3细胞中炎症调节因子PGE2的生成[27]，黄酮类成分木犀草素-7--β--葡萄糖苷（12）、木犀草素（13）对心肌细胞具有保护作用[28-29]、抗炎作用[27]，芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷（8）具有抗氧化活性[30]。倍半萜类成分glucozaluzanin C（3）对人肿瘤细胞株具有显著的非特异性细胞毒性[31]，3β--β--glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro- zaluzanin C（1）、2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13- dihydro-3β--β--glucozaluzanin C（20）具有抗环氧合酶1和2作用[26]。上述分离得到的化合物可能为杏香兔耳风的活性物质。本研究进一步丰富了杏香兔耳风的化学成分，为杏香兔耳风药效物质基础的进一步阐明奠定了基础。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

[1] 江西省卫生厅. 江西省中药材标准 [M]. 南昌: 江西科技出版社. 2014: 174-175.

[2] 李军茂. 复方杏香兔耳风抗宫颈炎的药效物质基础及作用机制研究 [D]. 南昌: 江西中医药大学, 2021.

[3] 陈欣悦, 贺文娟, 刘忠, 等. 杏香兔耳风化学成分及药理作用研究进展 [J]. 现代中药研究与实践, 2021, 35(6): 89-93.

[4] 吴蓓, 李军茂, 黄小方, 等. UHPLC-MS/MS法同时测定杏香兔耳风中13种成分的含量 [J]. 中草药, 2020, 51(15): 4025-4031.

[5] 吴蓓, 彭春燕, 李军茂, 等. 基于UFLC-Q-TOF- MS/MS技术及PCA分析的不同产地杏香兔耳风药材差异研究 [J]. 中国中药杂志, 2017, 42(21): 4165-4171.

[6] 冯发进, 许志玲, 张前军, 等. 兔儿风属植物化学成分的研究进展 [J]. 中国中药杂志, 2015, 40(7): 1244-1251.

[7] Feng F, Chen M H, Xing C X,. Two novel sesquiterpenoids fromchamp [J]., 2009, 11(10): 856-860.

[8] 赵慧玲, 吴蓓, 王琦, 等. 百尾参化学成分的分离与鉴定 [J]. 中草药, 2017, 48(3): 443-447.

[9] Li X S, Liu J Y, Cai J N,. Complete1H and13C data assignments of two new guaianolides isolated from[J]., 2008, 46(11): 1070-1073.

[10] 张家佳, 李香梅, 任丽花, 等. 白鹃梅化学成分 [J]. 中国中药杂志, 2011, 36(9): 1198-1201.

[11] 杨辉, 谢金伦, 孙汉董. 云木香化学成分研究I [J]. 云南植物研究, 1997, 19(1):87-93.

[12] 王凌天, 孙忠浩, 钟明亮, 等. 风轮菜酚酸类化学成分研究 [J]. 中国中药杂志, 2017, 42(13): 2510-2517.

[13] 韦建华, 西庆男, 曾艳婷, 等. 壮药三角泡黄酮类化学成分研究 [J]. 中草药, 2018, 49(11): 2502-2507.

[14] 冯晓茹, 李晓波, LUU THI THANH THUY, 等. 荨麻根脂溶性化学成分研究 [J]. 中国药学杂志, 2017, 52(14): 1217-1222.

[15] 王凯, 刘双, 李蒙, 等. 忍冬叶化学成分及其保肝活性研究 [J]. 中草药, 2022, 53(8): 2285-2291.

[16] 王美娇, 王金兰, 王丹, 等. 柳蒿化学成分研究(II) [J]. 中草药, 2019, 50(22): 5411-5418.

[17] da Silva Pinto L, de Souza F H D, Nascimento I R,. Phenylpropanoids from(Poaceae) [J]., 2015, 63: 68-71.

[18] 何潇, 郭文静, 吴佳辉, 等. 鸦胆子中黄酮及其抗炎、抗补体活性的研究 [J]. 天然产物研究与开发, 2020, 32(12): 2094-2100.

[19] 彭谷, 黄娟, 周应军, 等. 水葱化学成分研究 [J]. 中草药, 2020, 51(19): 4902-4906.

[20] 赵泽青, 苏艳芳, 黄雄, 等. 莛子藨地上部分化学成分研究 [J]. 中草药, 2016, 47(12): 2089-2094.

[21] 刘江, 王海峰, 曲佳琳, 等. 甘茶花的化学成分研究 [J]. 中草药, 2014, 45(3): 308-313.

[22] 许小方, 李会军, 李萍, 等. 灰毡毛忍冬花蕾中的化学成分 [J]. 中国天然药物, 2006, 4(1): 45-48.

[23] Yu H, Yang G Q, Sato M,. Antioxidant activities of aqueous extract fromstem waste to inhibit fish oil oxidation and identification of its phenolic compounds [J]., 2017, 232: 379-386.

[24] 刘梦, 李志峰, 冯宇, 等. 荔枝核化学成分的分离与鉴定 [J]. 中草药, 2019, 50(15): 3593-3597.

[25] 杜月, 王晓琴, 包保全, 等. 祁州漏芦花化学成分研究 [J]. 中草药, 2016, 47(16): 2817-2821.

[26] Wang H, Wu T, Yan M,. Sesquiterpenes fromand their inhibitory activities against cyclooxygenases-1 and 2 [J].(), 2009, 57(6): 597-599.

[27] 谢斌, 吴蓓, 欧阳辉, 等. 杏香兔耳风中五种单体对NIH3T3细胞内PGE2生成的影响 [J]. 亚太传统医药, 2016, 12(1): 9-11.

[28] 马春剑, 马晓静, 鲍海咏, 等. 木犀草素调控Nrf2-Gpx4介导铁死亡途径抑制AngⅡ诱导心肌细胞肥大[J]. 中药材, 2022(11): 2731-2736

[29] 周玲, 解砚英, 李杰, 等. 木犀草素-7--β--葡萄糖苷对缺血缺氧培养乳鼠心肌细胞的保护作用 [J]. 中药新药与临床药理, 2008, 19(4): 259-261.

[30] Siger A, Czubinski J, Kachlicki P,. Antioxidant activity and phenolic content in three lupin species [J].2012, 25(2): 190-197.

Study on chemical constituents of

XU Zhen-quan1, HE Ming-zhen1, YAO Min1, 3, WANG Zhao-jun1, OUYANG Hui1, LI Zhi-feng1, YANG Shi-lin1, 2,LI Jun-mao1, FENG Yu-lin1, 2

1. National Pharmaceutical Engineering Center for Solid Preparation in Chinese Herbal. Medicine, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330006, China 2. State Key Laboratory of Innovative Medicine and High Efficiency and Energy Saving Pharmaceutical Equipment, Nanchang 330006, China 3. Jiangxi Institute for Drug Control, Nanchang 330029, China

To investigate chemical constitutes of.The compounds were isolated and purified by solvent extraction, macroporous adsorbent resin, silica gel column chromatography, ODS and semi-preparative HPLC. The structures of the compounds were elucidated by spectral analyses, including MS and NMR spectral techniques.Twenty compounds were isolated fromand were identified as 3β--β--glucopyranosyl-8α-hydroxy-11α,13- dihydrozaluzanin C (1), bergenin monohydrate (2), glucozaluzanin C (3), apigenin 7--β-(6′′-methylglucuronide) (4), costunolide-15-β--glucopyranoside (5), apigenin-7--β--glucuronopyranoside (6), luteolin-7--β--glucuronopyranoside (7), apigenin-6,8-di-C-β--glucopyranoside (8), chlorogenic acid (9), 1,3-di--caffeoylquinic acid (10), 3----coumaroylquinic acid (11), luteolin-7--β--glucoside (12), luteolin (13), protocatechuic acid (14), 5---coumaroylquinic acid (15), 1-- caffeoylquinic acid (16), cryptochlorogenic acid (17), 5---coumaroylquinic acid (18), 3,5--dicaffeoylquinic acid (19), and 2′---caffeoyl-8α-hydroxy-11α,13-dihydro-3β--β--glucozaluzanin C (20).Compounds 2, 4—8, 11, 15—16 and 18 were isolated from the genusfor the first time.

DC.;Champ.; cafeoyl quinic acid; apigenin-7--β--glucuronopyranoside; luteolin-7--β--glucuronide; apigenin-6,8-di-C-β--glucopyranoside

R284.1

A

0253 - 2670(2023)06 - 1728 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.06.004

2022-11-11

国家自然科学基金资助项目（82173945）；国家自然科学基金资助项目（81760702）；国家自然科学基金资助项目（81560636）；江西省教育厅科学技术研究项目（GJJ211261）；江西省食品监督管理局科研项目（2020JS10）；江西省卫生健康委员会科技计划项目（202211429）；江西省中医药管理局科技计划项目（2022A366）；江西中医药大学创新基金项目（JZYC22S60）；江西中医药大学校级科技创新团队发展计划（CXTD22001）

徐贞权，男，硕士研究生，从事中药活性成分研究。E-mail: xzq330225@qq.com

李军茂，男，博士，讲师，从事中药活性成分和药物代谢研究。E-mail: ljm3039@163.com

冯育林，男，博士，教授，从事中药药效物质及新药研究。E-mail: fengyulin2003@126.com

[责任编辑 王文倩]