血清学指标及IgG抗A/B抗体效价与新生儿溶血病严重程度的关系分析

王文萍　张呈球　程艳梅

【摘要】 目的：分析血清學指标及IgG型抗A/B抗体效价与新生儿溶血病（HDN）严重程度的关系。方法：选取2020年1月—2022年12月上饶市人民医院收治的82例HDN患儿为研究对象，分析游离试验与放散试验结果，并进行不规则抗体筛查、测定血型抗体效价及检测血清学指标[血清总胆红素（STB）、非结合胆红素（UCB）、红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）、白蛋白（ALB）]；比较不同IgG抗A/B抗体效价之间的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平及临床指标；采用Pearson相关性分析RBC、Hb、ALB与STB、UCB的关系；采用Spearman相关性分析IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB的关系。结果：游离试验检测HDN的阳性率为71.95%、放散试验检测HDN的阳性率为85.37%，两种方式比较差异有统计学意义（P<0.05）。IgG抗A/B血型放散试验抗体效价为1︰1～1︰32，最高为1︰32；游离试验的抗体效价为1︰1～1︰2，最高为1︰2。不同IgG抗A/B抗体效价的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平及新生儿日龄、住院时间比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示，血清RBC、Hb、ALB与STB、UCB呈负相关。Spearman相关性分析结果显示，IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB呈正相关（P<0.05）。结论：IgG抗A/B抗体效价能够测定HDN患儿体内抗A/B抗体水平，血清RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗体效价能够辅助判断HDN的严重程度。

【关键词】 新生儿溶血病 血清学指标 抗体效价 IgG型

Analysis of the Relationship between Serological Indexes， IgG Anti-A/B Antibody Titer and the Severity of Neonatal Hemolytic Disease/WANG Wenping， ZHANG Chengqiu， CHENG Yanmei. //Medical Innovation of China， 2023， 20（36）： -134

[Abstract] Objective： To analyze the relationship between serological indexes， IgG anti-A/B antibody titer and the severity of hemolytic disease of newborn （HDN）. Method： A total of eighty-two children with HDN admitted to Shangrao People's Hospital from January 2020 to December 2022 were selected as the study objects， and the results of ionization test and release test were analyzed. Irregular antibody screening， blood group antibody titers and serological indicators [serum total bilirubin （STB）， unconjugated bilirubin （UCB）， red blood cell （RBC） count， hemoglobin （Hb）， albumin （ALB）] were detected. The STB， UCB， RBC， Hb， ALB levels and clinical indexes of different IgG anti-A/B antibody titers were compared; Pearson correlation was used to analyze the relationship between RBC， Hb， ALB and STB and UCB. Spearman correlation was used to analyze the relationship between IgG anti-A/B titer and STB and UCB. Result： The positive rate of HDN detected by ionization test was 71.95%， and that by release test was 85.37%， there was statistical significance between the two methods （P<0.05）. The titers of IgG anti-A/B blood group release test ranged from 1︰1 to 1︰32， with the highest being 1︰32. The titer of antibody in ionization test was 1︰1 to 1︰2， the highest was 1︰2. The levels of STB， UCB， RBC， Hb， ALB， neonatal age and hospital stay of different IgG anti-A/B antibody titers were statistically significant （P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that serum RBC， Hb and ALB were negatively correlated with STB and UCB. Spearman correlation analysis showed that the titer of IgG anti-A/B antibody was positively correlated with STB and UCB （P<0.05）. Conclusion： IgG anti-A/B antibody titer can determine the level of anti-A/B antibody in children with HDN， and serum RBC， Hb， ALB and IgG anti-A/B antibody titer can assist in judging the severity of HDN.

[Key words] Hemolytic disease of newborn Serological indicators Antibody titer IgG type

First-author's address： Shangrao People's Hospital， Jiangxi Province， Shangrao 334000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.36.030

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是由于孕母与新生儿体内的红细胞血型不吻合，导致新生儿出现免疫性溶血性疾病[1-2]。HDN的发病机制是胎儿代表父母双方的红细胞抗原表型不一致，当胎儿代表父体红细胞抗原的红细胞进入母体时，母体的免疫系统会产生破坏新生儿红细胞的IgG型抗体，并且通过胎盘屏障进入胎儿的血液循环，破坏胎儿体内的红细胞[3]。目前临床上对HDN的诊断主要依据游离试验及放散试验的结果进行判定，当出现多个试验阳性结果时，以放散试验的结果为HDN的诊断标准[4]。HDN具有发病急，症状重及病情进展迅速等特点，患儿多伴随有不同程度的黄疸、溶血性贫血、呼吸窘迫等症状，严重的情况下甚至会引起患儿死亡[5]。有研究表明，母体的抗A/B抗体通过结合患儿红细胞表面相应抗原引起溶血，孕母体内的IgG型抗A/B抗体效价对新生儿HDN具有较好的预测作用，新生儿HDN严重程度与孕母体内抗体效价水平相关[6]。目前对HDN患儿体内IgG型血型抗体效价与病情严重程度的关系尚不明确，相关研究报道较少。本研究通过分析血清学指标及IgG型抗A/B抗体效价与HDN严重程度的关系，为临床诊治提供参考意见。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年1月—2022年12月上饶市人民医院收治的82例HDN患儿为研究对象。纳入标准：（1）均符合HDN的相关诊断标准[7]；（2）在出生后存在黄疸、血红蛋白降低、呼吸窘迫、高胆红素血症等相关症状；（3）均为单胎，且足月分娩；（4）均为ABO血型。排除标准：（1）合并存在其他先天性发育畸形疾病；（2）合并存在先天性心血管病变；（3）合并存在新生儿感染性疾病；（4）合并存在凝血功能障碍；（5）其他血型系统或其他原因引起的HDN。研究对象中男43例，女39例；新生儿日龄1～7 d，平均（3.47±0.89）d；体重2.6～3.9 kg，平均（3.16±0.58）kg；血型分型为A型41例、B型38例、AB型3例。本研究已获得本院医学伦理委员批准同意，患儿的监护人均签署相关的知情同意书。

1.2 检测方法

1.2.1 仪器与试剂 ABO血型检测卡，抗人球蛋白检测卡及离心机和微柱孵育器；抗A、B血清试剂，标准ABO红细胞及ABO正反定型试剂卡；微柱凝胶检测卡；血细胞计数仪；西门子全自动生化分析仪。

1.2.2 检测内容 （1）血型鉴定与抗体筛查：采集HDN患儿入院时的静脉血3 mL，在离心机以3 000 r/min离心5 min（离心半径6 cm），分离红细胞与血浆，采用微柱凝胶检测卡检测ABO血型与不规则抗体。（2）游离试验及放散试验检测：选取HDN患儿的红细胞，以生理盐水进行3次洗涤后，分别进行游离试验及放散试验检测。（3）IgG型抗A/B抗体效价：采用等比例梯度浓度稀释法对放散试验与游离试验的阳性样本检测液进行稀释，并置于微柱凝胶检测卡进行抗体效价测定。（4）血细胞计数：采集HDN患儿静脉血2 mL，检测血液标本的红细胞（red blood cell，RBC）计数、血红蛋白（hemoglobin，Hb）、白蛋白（albumin，ALB）水平。（5）生化检测：采集HDN患儿静脉血2 mL，

在离心机以3 000 r/min离心5 min（离心半径10 cm），

检测血液标本中的血清总胆红素（serum total bilirubin，STB）、非结合胆红素（unconjugated bilirubin，UCB）水平。

1.3 观察指标

（1）分析HDN患儿游离试验及放散试验检测结果；（2）分析HDN患儿IgG型抗A/B抗体效价的分布情况；（3）收集所有患儿的日龄、性别、血型、体重、血液指标等一般资料，并比较不同IgG抗A/B抗体效价之间的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平；（4）采用Pearson相关性分析RBC、Hb、ALB与STB、UCB的关系；采用Spearman相关性分析IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB的关系。

1.4 统计学处理

采用SPSS 21.0统计学软件分析所有数据。符合正态分布的计量资料以（x±s）表示，进行独立样本t检验，多样本或多组间比较采用F检验；计数资料以率（%）表示，进行字2检验；采用Pearson相关性分析及Spearman相关性分析两变量之间的相关性。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HDN患儿游离试验及放散试验结果分析

在82例HDN患儿中，游离试验检测HDN的阳性率为71.95%、放散试验检测HDN的阳性率为85.37%，两种方式比较，差异有统计学意义（字2=4.395，P=0.036），见表1。

2.2 HDN患儿IgG抗A/B抗体效价的分布情况分析

分析放散试验与游离试验阳性样本的IgG抗A/B抗体效价，其中放散试验的抗体效价为1︰1～1︰32，最高为1︰32；游离试验的抗体效价为1︰1～1︰2，最高为1︰2，见表2。

2.3 不同IgG抗A/B抗体效价之间的一般资料比较

不同IgG抗A/B抗体效价的STB、UCB、RBC、Hb、ALB水平及新生儿日龄、住院时间比较，差异均有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.4 RBC、Hb、ALB与STB、UCB的相关性

Pearson相关性分析结果显示，血清RBC、Hb、ALB与STB、UCB均呈负相关（P<0.001），见表4。

2.5 IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB的相关性

Spearman相关性分析结果显示，IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB均呈正相关（rs=0.586，P<0.001；rs=0.574，P<0.001）。

3 讨论

HDN是一种新生儿血型与母体不符合引起新生儿红细胞破坏的疾病，以ABO血型最为常见，ABO-HDN占比达到80%～95%，其主要发生在O型孕产妇与A型、B型新生儿之间，也可能发生在A型、B型孕产妇生育的非O型新生儿身上[8-9]。O型孕产妇产生的IgG型抗体通过结合胎儿胎盘上的Fc受体进入胎儿的血液循环，IgG型抗体与胎儿红细胞抗原结合使红细胞损害，进而导致出现溶血，而且IgG型抗体的效价和亚型均会影响HDN的发生发展[10]。李丹等[11]研究指出，由于ABO-HDN是母婴血型不合导致母体的IgG型抗A/B抗体进入胎儿血液循环损害胎儿红细胞，对孕产妇进行血清IgG型抗A/B抗体效价测定与凝集强度检测是预防新生儿发生HDN的重要措施，母体IgG型抗A/B抗体效价水平与HDN患儿的溶血症状及病死率呈正相关。因此，分析HDN患儿体内的IgG型抗体效价水平对临床诊治可能具有积极意义。

游离试验及放散试验是诊断新生儿HDN的主要方式，本研究分析了游离试验及放散试验对HDN诊断的敏感度，放散试验检测的敏感度优于游离试验。这是因为新生儿体内的游离抗体与致敏红细胞会随着出生时间的延长而逐渐消失及被破坏，导致游离试验诊断的敏感度下降[12]。母体内的IgG型抗体效价与抗体数量会随着孕期的增加而增加，抗体数量超过母体自身抵抗范围时，容易引发新生儿发生HDN，而且IgG型抗体会通过胎盘进入胎儿的血液循环，对新生儿体内的IgG型抗体效价水平产生重要影响[13-14]。宋建等[15]研究指出，IgG型抗体在进入HDN患儿体内后会立即与红细胞进行结合，使大部分IgG型抗体以结合的形式在HDN患儿体内存在，导致放散试验的抗体效价高于游离试验。本研究对HDN患儿IgG型抗A/B抗体效价检测结果显示，放散试验的抗体效价为1︰1～1︰32，最高为1︰32；游离试验的抗体效价为1︰1～1︰2，最高为1︰2，与上述研究一致。

IgG是血清主要的抗体成分，以单体形式存在，属于人体免疫球蛋白之一，其合成与分泌主要通过脾、淋巴结中的浆细胞进行，在HDN的发病过程中发挥了关键作用，HDN的发生发展及严重程度与IgG血型抗体效价的高低相关[16-17]。RBC、Hb、ALB、STB及UCB等血清学指标同样与HDN的疾病进程密切相关，而且STB与UCB水平能够用于评估HDN患儿的病情，其水平与病情严重程度成正比[18]。刘寅寅等[19]研究指出，新生儿发生HDN会导致体内的红细胞被大量破坏，造成红细胞数量急剧减少，导致体内的RBC、Hb水平降低。薛松等[20]研究表明，HDN患儿体内大量红细胞破坏会导致Hb含量下降，血清STB水平与体内衰老红细胞裂解相关，衰老红细胞裂解后能够促进大量的Hb释放，引起HDN患儿体内STB水平升高，并且STB包括直接胆红素与UCB，同样会影响HDN患儿体内的UCB水平。段灵等[21]研究认为，ALB不仅能够提高胆红素的水溶性以及增加血浆对胆红素的处理能力，而且可以减少胆红素对组织细胞毒性的影响，血清ALB水平降低容易导致机体对胆红素代谢能力下降，进而导致胆红素水平升高。本研究结果显示，HDN患儿的血清STB、UCB水平随着IgG抗A/B抗体效价升高而上升，RBC、Hb、ALB水平随着IgG抗A/B抗体效价升高而下降。这可能是因为IgG抗A/B抗体效价越高，携带的抗体数量会越多，进而增加HDN患儿体内的红细胞破坏情况，导致血清RBC、Hb、ALB水平下降及STB、UCB水平增加。本研究进一步分析了RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB的关联性，Pearson相关性分析结果显示，血清RBC、Hb、ALB与STB、UCB呈负相关，Spearman相关性分析结果显示，IgG抗A/B抗体效价与STB、UCB呈正相关。提示对RBC、Hb、ALB水平及IgG抗A/B抗体效价与HDN患儿病情的严重程度相关，在HDN的相关诊治过程中需要密切监测RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗体效价水平。

综上所述，IgG抗A/B抗体效价能够测定HDN患儿体内抗A/B抗体水平，血清RBC、Hb、ALB及IgG抗A/B抗体效价能够辅助判断HDN的严重程度。本研究仅分析了ABO血型HDN患儿的IgG抗A/B抗体效价，未对Rh等其他血型HDN患儿的IgG抗A/B抗体效价进行分析，未来仍需进一步研究。

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（收稿日期：2023-09-14） （本文编辑：白雅茹）