通络止痛贴膏的薄层鉴别及初步稳定性考察*

范俊锋 周 艳 吴雪茹 严春霞

（广州中医药大学第三附属医院药学部，广东 广州 510378）

凝胶贴膏系指原料药物与适宜的亲水性基质混匀后涂布于背衬材料上制成的贴膏剂[1]。与传统糊剂、橡胶膏剂相比，具有载药量大、使用方便、刺激性小、安全性高、保湿性好、透皮吸收率高及用药依从性高等显著优点[2-4]。它能防止肝脏首过效应，降低胃肠刺激，减少给药次数，提高患者的依从性，可以作为传统橡皮膏、黑膏药的替代品，成为近年来的研究热点和焦点[5]。通络止痛贴膏是广州中医药大学第三附属医院治疗痛症的临床经验方，主要由三棱、莪术、姜黄、琥珀、乳香、没药、薄荷脑、薄荷油、冰片、松节油等组成，具有活血通络、破气止痛、化瘀散结的功效，临床上用于治疗癌症等引起的身痛、骨痛、关节痛等痛症，效果显著，深受患者喜爱。该方以往以传统中药贴敷制剂应用于临床，在使用过程中有不易控制剂量、易污染衣物、不便储存等缺点[6]，故将其研制成凝胶贴膏。为控制通络止痛贴膏的质量，本文采用薄层色谱法（TLC）对方中三棱、姜黄、琥珀和冰片进行鉴别，并对其进行稳定性考察。

1 仪器与试药

1.1 仪器 KS-150EI 型超声波清洗机（宁波海曙科生超声波设备有限公司）；WFH-203B 三用紫外分光仪（上海精科实业有限公司）；MSE125P-OCE-DU 分析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；LHS-150SC 型恒温恒湿培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）；MTC-250 药品稳定性试验箱（上海三腾仪器有限公司）；CZY-G 初粘性测试仪（济南兰光机电技术有限公司）；DHG-9140 型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；LRH-70 生化培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）；MIR-150A 霉菌培养箱（上海三腾仪器有限公司）；BOS-150 干热灭菌器（上海三腾仪器有限公司）；持粘力测试装置（自制）；剥离强度测试装置（自制）。

1.2 试药 通络止痛伤贴膏（批号：220201、220202、220203）由广州中医药大学第三附属医院制剂室提供；三棱、莪术、姜黄、琥珀、乳香、没药等中药饮片购自岭南中药饮片有限公司，由广州中医药大学吴雪茹教授鉴定均为正品；冰片对照品（批号：110743-200504）由中国食品药品检定研究院提供；所用试剂均为分析纯；硅胶G 薄层板由实验室自制。

2 方法与结果

2.1 通络止痛贴膏的质量标准研究

2.1.1 三棱的薄层鉴别 取本品1 贴，除去盖衬，剪碎，加乙酸乙酯40 mL，加热回流30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL 使溶解，作为供试品溶液。另取三棱对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。参照2020版《中华人民共和国药典》四部0502 通则[1]下薄层色谱法试验，吸取上述2 种溶液各10 μ L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。见图1。

图1 三棱TLC 鉴别图谱

2.1.2 姜黄的薄层鉴别 取本品1 贴，除去盖衬，剪碎，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇40 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1 mL 使溶解，作为供试品溶液[7]。另取姜黄对照药材0.2 g，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇20 mL，同法制成对照药材溶液。参照2020 版《中华人民共和国药典》四部0502通则[1]下薄层色谱法试验，吸取上述2 种溶液各10 μ L，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以二氯甲烷-无水乙醇-浓氨试液（30∶2∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。见图2。

图2 姜黄TLC 鉴别图谱

2.1.3 琥珀的薄层鉴别 取本品1 贴，除去盖衬，剪碎，置具塞锥形瓶中，加乙酸乙酯40 mL，超声提取30 min，过滤，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL 作为供试品溶液[8]。另取琥珀对照药材1 g，加乙酸乙酯10 mL 同法制成对照药材溶液。参照2020 版《中华人民共和国药典》四部0502 通则[1]下薄层色谱法试验，吸取上述2 种溶液各10 μ L，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液显色，在105 ℃加热至斑点显色清晰。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图3。

图3 琥珀TLC 鉴别图谱

2.1.4 冰片的薄层鉴别 取本品1 贴，除去盖衬，剪碎，置具塞锥形瓶中，加甲基叔丁基醚40 mL，振摇10 min，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 mL 使溶解，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加甲醇制成每1 mL 含2 mg 的溶液，作为对照品溶液。参照2020 版《中华人民共和国药典》四部0502 通则[1]下薄层色谱法试验，吸取上述2 种溶液各10 μ L，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图4。

图4 冰片TLC 鉴别图谱

2.2 通络止痛贴膏的稳定性考察

2.2.1 加速试验 根据2020 版《中华人民共和国药典》四部9000 通则[1]指导原则中的原料药物与制剂稳定性试验指导原则，将3 批通络止痛贴膏分别于恒温恒湿条件下进行考察，温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%，分别于第1 个月、2 个月、3 个月、6 个月末各考察1 次，按照制剂稳定性重点考察项目（包括性状、鉴别、检查、微生物限度）进行检查，结果样品各项指标均无明显变化，质量稳定。见表1。

表1 3 批通络止痛贴膏加速试验结果

2.2.2 综合评价 取通络止痛贴膏置于加速试验条件下，温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%，分别于第0个月、1 个月、2 个月、3 个月、6 个月各取样1 次，以初黏力、持黏力、综合感官、剥离强度等为评价指标进行综合评分[9]，结果显示，综合评分总分优良。见表2。

表2 3 批通络止痛贴膏综合评价结果

由表1 的结果可知，通络止痛贴膏在加速试验中外观均为棕色至棕褐色的凝胶贴膏，气香，符合标准规定；各个时间点取样的三棱、姜黄、琥珀和冰片的薄层鉴别均呈正反应，符合标准规定；含膏量、黏附力和赋形性等各项检查项也均符合标准规定；各个时间点的微生物限度均符合规定。说明通络止痛贴膏质量稳定且可靠。由表2 的结果可知，在各个试验阶段中通络止痛贴膏的初黏力、持黏力、综合感官、剥离强度的总分都在90 分（满分100 分）以上，符合制剂的质量要求。

3 讨论

本课题采用薄层色谱法（TLC）对通络止痛贴膏处方中的各个药味进行薄层鉴别研究，结果处方中的三棱、姜黄、琥珀和冰片等药味的色谱斑点清晰，特征明显，分离度好，且阴性对照溶液无干扰，说明该方法专属性高、重现性好，可作为通络止痛贴膏的质量控制方法。

通过加速试验[温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%]对3 批通络止痛贴膏进行了初步稳定性考察，结果显示，通络止痛贴膏的性状外观均无变化，三棱、姜黄、琥珀和冰片的鉴别均呈正反应，微生物限度均符合规定，表明通络止痛贴膏的质量稳定可控。

制剂质量的稳定是制剂在研发、注册管理中非常重要的因素，直接影响到制剂质量，进而影响制剂的临床使用安全性，故需对其进行稳定性考察。本研究参照《中华人民共和国药典》，通过加速试验，对通络止痛贴膏的初步稳定性进行了考察，结果显示其质量稳定可靠，为通络止痛贴膏的医院制剂有效期的制定提供了科学依据。